兒童血常規(guī)標本室溫保存時間對結(jié)果影響的分析

廖旺 黃衛(wèi)彤 韋淑玉

（南寧市婦幼保健院檢驗科 廣西 南寧 530011）

隨著醫(yī)療體系的改革和發(fā)展，檢驗質(zhì)量在醫(yī)療活動中日趨重要，導(dǎo)致血常規(guī)檢查出現(xiàn)誤差的因素相對較多，按影響因素的高低可分為送檢時間過長、保存不當、采集時間不合理、抗凝劑濃度不合格、受檢者自身因素[1]。由于各醫(yī)院的實驗室質(zhì)量管理和技術(shù)水平不一樣，一些醫(yī)院對標本采集人員和送檢相關(guān)人員的培訓(xùn)過少或者培訓(xùn)不到位，導(dǎo)致標本送檢時間過長而影響到檢驗結(jié)果。同時有些檢驗人員接收標本后不及時檢測或由于工作量太大而無法及時檢測最終影響到檢驗結(jié)果。CNASCL01:2006《檢測和校準實驗室能力認可準則》(ISO/IEC17025:2005)和《實驗室資質(zhì)認定評審準則》要求實驗室為確保檢測結(jié)果的準確可靠應(yīng)采取一定的措施控制,如通過人員間比對、實驗室間比對、留樣再測等方法進行控制,確保實驗室檢測能力。其中留樣再測是考核實驗室能力較為常用、便捷的方式。留樣再測又稱留樣試驗,主要用于監(jiān)視檢測結(jié)果的復(fù)現(xiàn)性,包含了對整個檢測過程(人員、環(huán)境、設(shè)備)的監(jiān)視[2]。為了探討血常規(guī)標本檢測后室溫保存4-8 小時是否適合進行留樣再測，我們用Sysmex XN-10 血細胞分析儀在標本檢測后室溫保存4 ～8 小時內(nèi)，連續(xù)每小時檢測1次，動態(tài)觀察（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細胞壓積（HCT）、紅細胞平均體積（MCV）、紅細胞平均血紅蛋白含量（MCH）、紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板（PLT）結(jié)果變化規(guī)律。

1.資料與方法

1.1 儀器和試劑

sysmex XN-10 血細胞分析儀及原裝配套試劑，實驗前檢測質(zhì)控物在控范圍。

1.2 標本

50 份門診健康兒童（3 ～7 歲）EDTA-K2 抗凝的靜脈血。

1.3 方法

用EDTA-K2 抗凝管抽取50 例門診健康兒童（3 ～7 歲）靜脈血，每份各2ml，充分混勻，1 小時內(nèi)在sysmex XN-10 血細胞分析儀上進行檢測1 次，然后放置室溫，分別在4h、5h、6h、7h、8h 時進行測定，測定前充分混勻。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS17.0 對本次研究數(shù)據(jù)進行分析，計量資料（±s）表示，行t檢驗，計數(shù)資料（%）表示，行卡方檢驗，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計意義。

2.1 結(jié)果

2.1 紅細胞平均血紅蛋白濃度（MCHC）在≥4h 時檢測時，結(jié)果隨時間的增加明顯下降，結(jié)果與1 小時檢測結(jié)果比較有明顯差異（P＜0.05）。白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細胞平均血紅蛋白含量（MCH）、血小板（PLT）在8h 內(nèi)檢測結(jié)果與1 小時檢測結(jié)果比較無明顯變化，差異無統(tǒng)計意義（P＞0.05）。紅細胞壓積（HCT）和紅細胞平均體積（MCV）在8h 內(nèi)檢測結(jié)果，雖然與1 小時檢測結(jié)果比較不明顯，差異無統(tǒng)計意義（P＞0.05），但隨著時間的增加它們的結(jié)果呈逐漸上升趨勢。標本室溫放置檢測結(jié)果隨時間產(chǎn)生的變化結(jié)果見表1、2、3、4。

表1 標本室溫放置WBC、RBC、HGB 和HCT 結(jié)果隨時間產(chǎn)生的變化（±s）

表1 標本室溫放置WBC、RBC、HGB 和HCT 結(jié)果隨時間產(chǎn)生的變化（±s）

時間 WBC(×109/L) RBC(×1012/L) HGB(g/L) HCT(%)＜1h 8.00±1.73 4.56±0.31 122.48±6.41 36.67±1.91 4h 8.06±1.78 4.54±0.31 122.08±6.55 36.91±1.94 5h 8.05±1.76 4.55±0.30 122.40±6.63 37.08±1.96 6h 8.06±1.76 4.55±0.31 122.50±6.68 37.11±1.95 7h 8.06±1.75 4.54±0.31 122.56±6.44 37.20±1.92 8h 8.07±1.77 4.54±0.32 122.52±6.52 37.33±2.00

表2 標本室溫放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 結(jié)果隨時間產(chǎn)生的變化（±s）

表2 標本室溫放置MCV、MCH、MCHC 和PLT 結(jié)果隨時間產(chǎn)生的變化（±s）

時間 MCV(fl) MCH(pg) MCHC(g/L) PLT(×109/L)＜1h 80.60±4.32 26.93±1.72 334.12±8.75 308.12±45.77 4h 81.43±4.47 26.95±1.76 330.78±8.69 323.54±48.01 5h 81.61±4.50 26.95±1.72 329.92±8.69 323.78±46.05 6h 81.83±4.54 27.03±1.73 329.78±8.09 323.12±45.91 7h 82.11±4.60 27.07±1.73 329.66±8.44 321.60±44.89 8h 82.37±4.63 27.05±1.74 328.30±7.66 320.30±47.78

表3 WBC、RBC、HGB 和HCT1h 結(jié)果與其他小時結(jié)果顯著性（P 值）的變化

表4 MCV、MCH、MCHC 和PLT1h 結(jié)果與其他小時結(jié)果顯著性（P 值）的變化

3.討論

本研究表明，兒童靜脈血在室溫放置8h 時內(nèi)，在血常規(guī)檢驗8 個項目（WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、PLT）中，對WBC、RBC、HGB、MCH、PLT 檢測結(jié)果的影響最??；而HCT和MCV 放置時間越長，其檢測結(jié)果會逐漸升高，雖然差異無統(tǒng)計意義，但已出現(xiàn)逐漸上升趨勢；對MCHC 檢測結(jié)果的影響最大，隨著保存時間的增加結(jié)果會明顯下降。出現(xiàn)這情況主要是因為EDTA 鹽屬氨羧螯合劑，其機制是通過與水中的Ca2+形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液的凝固，靜脈血標本靜置導(dǎo)致細胞分層，分層的細胞產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，都產(chǎn)生了自己滲透壓和PH值[3]。當標本血細胞處于高滲環(huán)境時，就會使其滲透壓不斷升高，當血液在檢測過程中遇到滲透壓比較低的稀釋液時，RBC 就會有水分流入，從而導(dǎo)致MCV 不斷增大，就會導(dǎo)致HCT 隨之升高，而使MCHC 不斷降低[4]。由于sysmex 血細胞分析儀XN-10 檢測原理中MCHC 不是由儀器直接檢測所得而是根據(jù)HGB 與HCT 計算得來，有報道顯示HGB 在室溫下可穩(wěn)定數(shù)日[5]，因此影響MCHC 的結(jié)果主要是HCT，MCHC 結(jié)果就隨著HCT 上升結(jié)果越高其濃度值下降越明顯。因此，血常規(guī)標本采集4 小后，不適合做實驗室間比對、留樣再測。在艾衛(wèi)軍[4]等82 例健康成人全血標本保存時間和溫度對血常規(guī)檢測結(jié)果的影響分析、蔣蓉蓉[6]等的30 門診患者不同溫度和時間對血細胞參數(shù)的影響和丁穎[7]等的血液保存溫度和時間對激光法檢測紅細胞系統(tǒng)參數(shù)的影響的研究中，≤8h 時MCHC 的檢測結(jié)果均無顯著變化，但本研究MCHC 的檢測結(jié)果在4h時已經(jīng)發(fā)生明顯變化。由于本研究對象為兒童，然而他們研究對象為成人，因此認為兒童靜脈血MCHC 檢測結(jié)果比成人更容易隨時間的增加而產(chǎn)生影響。因此在日常工作中當標本量過大時，不能及時檢測時，應(yīng)注意根據(jù)不同年齡標本建立合理的保存方法，保證檢測結(jié)果的準確性。當懷疑首次檢測結(jié)果準確性或儀器故障維修后需要進行留樣再測進行驗證時，選擇標本時應(yīng)考慮標本保存時間和年齡因素，否則會影響檢測結(jié)果。