■秦 毅 王金榮* 喬漢楨 陳勇江 李林儒 張良玉 王小輝
(1.河南工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院,河南鄭州450001;2.河南神農(nóng)膨化飼料科技有限公司,河南滎陽(yáng)450100)
飼料的擠壓膨化技術(shù)是一種集混合、殺菌、脫毒、加壓和成型的加工技術(shù),多用于水產(chǎn)、寵物和早期斷奶仔豬飼料的加工。飼料原料通過高溫、高壓、擠壓和剪切等一系列處理,其理化性質(zhì)均會(huì)發(fā)生變化,如原料表面蓬松、蛋白質(zhì)變性、淀粉糊化、脂肪氧化等,同時(shí)可以鈍化物料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子。擠壓膨化技術(shù)可以改變飼料原料中營(yíng)養(yǎng)成分的結(jié)構(gòu),對(duì)原料中有效成分具有改善作用。李次力等[1]研究發(fā)現(xiàn)亞麻籽經(jīng)擠壓膨化處理后,氨基酸和可溶性纖維含量增加,脂肪含量減少,改善了亞麻籽粕的飼用品質(zhì)。Sobota 等[2]對(duì)玉米-小麥型飼料膨化后發(fā)現(xiàn),飼料蛋白質(zhì)的二硫鍵及蛋白空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,有利于動(dòng)物的消化吸收,進(jìn)而提高飼料利用率。郭樹國(guó)等[3]研究發(fā)現(xiàn)豆粕膨化過程中,蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生伸展、重組、分子表面的電荷重新分布,顯著提高蛋白消化率。飼料原料中含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,導(dǎo)致動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收率顯著降低,生長(zhǎng)發(fā)育受到阻礙。擠壓膨化工藝后可以有效降低抗?fàn)I養(yǎng)因子活性。例如擠壓膨化加工可降低大豆脲酶和胰蛋白酶抑制因子的活性,并且不同加工工藝參數(shù)對(duì)抗?fàn)I養(yǎng)因子的滅活效果有顯著的影響。Mustakas 等[4]研究表明,隨著膨化設(shè)定的溫度和原料水分含量升高,脲酶和胰蛋白酶抑制劑被有效地破壞,可以顯著提高產(chǎn)品質(zhì)量和胰蛋白酶抑制因子的鈍化效果。白兆鵬等[5]研究了擠壓膨化處理后的全脂大豆,結(jié)果表明大豆的抗?fàn)I養(yǎng)因子顯著降低,適口性得到明顯改善。此外擠壓膨化還可以使飼料具有特殊的香味,有利于增加動(dòng)物食欲,促進(jìn)動(dòng)物采食。
本試驗(yàn)擬通過對(duì)擠壓膨化處理的玉米、大豆及亞麻籽常規(guī)養(yǎng)分、抗?fàn)I養(yǎng)因子和蛋白溶解度等指標(biāo)的分析,探究經(jīng)過膨化加工后飼料原料組分的變化規(guī)律,以期為膨化飼料在動(dòng)物生產(chǎn)中的應(yīng)用提供借鑒。
玉米、大豆和亞麻籽,購(gòu)于河南某飼料原料廠。
1.2.1 膨化設(shè)備
HR165型單螺桿擠壓膨化機(jī),購(gòu)于湛江恒潤(rùn)公司。
1.2.2 膨化工藝參數(shù)
① 玉米:調(diào)質(zhì)溫度50 ℃,蒸汽壓力0.5 MPa,喂料區(qū)溫度70 ℃,混合區(qū)90 ℃,剪切區(qū)110 ℃,泄壓區(qū)140 ℃,喂料速度12 Hz,螺桿轉(zhuǎn)速180 r/min。
② 大豆:調(diào)質(zhì)溫度70 ℃,蒸汽壓力0.5 MPa,喂料區(qū)溫度110 ℃,混合區(qū)120 ℃,剪切區(qū)140 ℃,泄壓區(qū)150 ℃,喂料速度40 Hz,螺桿轉(zhuǎn)速180 r/min。
③ 亞麻籽:調(diào)質(zhì)溫度60 ℃,蒸汽壓力0.5 MPa,喂料區(qū)溫度110 ℃,混合區(qū)130 ℃,泄壓區(qū)140 ℃,喂料速度18 Hz,螺桿轉(zhuǎn)速90 r/min。
①常規(guī)養(yǎng)分指標(biāo)含量及測(cè)定方法:蛋白質(zhì)、粗脂肪和總磷分別采用GB/T 6432—2018、GB/T 6433—2006、GB/T 6437—2006 測(cè)定。②蛋白溶解度采用GB/T 19541—2004 測(cè)定。③脲酶活性采用GB/T 8622—1988 測(cè)定。④植酸磷(沉淀消解法)[6]:粉碎樣品經(jīng)1.2%稀鹽酸提取,過濾。取濾液加1.0%三氯化鐵生成植酸磷沉淀,將沉淀用硝酸、硫酸消解,取消解液與10%鉬酸銨發(fā)生反應(yīng)生成磷鉬酸,用2.0%抗壞血酸進(jìn)行鉬蘭顯色,在波長(zhǎng)660 nm下進(jìn)行顯色測(cè)定。以磷標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并定量分析植酸磷含量。⑤熱敏蛋白:熱敏蛋白的測(cè)定采用Promatest-玉米熱敏蛋白變性的評(píng)估方法。粉碎后的樣品用萃取液(13.6 g KH2PO4、4.2 g K2HPO4、20 g NaCl 定容至 2 000 ml)震蕩提取3 min 后過濾,備用。取濾液與考馬斯亮藍(lán)染色液混合反應(yīng)15 min,并以萃取液作為空白,測(cè)定595 nm 處的吸光值。以牛血清白蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,并定量分析熱敏蛋白含量。
數(shù)據(jù)分析采用SAS 9.1.3 進(jìn)行方差分析,以變異系數(shù)對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示,P<0.05表示差異顯著。
本試驗(yàn)采集了26 份玉米樣品,測(cè)定玉米經(jīng)擠壓膨化后常規(guī)養(yǎng)分及抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的變化(見表1)。由表1可知,擠壓膨化加工使玉米的蛋白質(zhì)與總磷含量有所提高,經(jīng)膨化處理后玉米的脂肪、植酸磷、蛋白溶解度及熱敏蛋白含量均有下降。其中膨化后玉米的脂肪含量相比膨化前降低38.87%,蛋白質(zhì)含量提高2.24%,蛋白溶解度降低33.17%,熱敏蛋白含量降低40.74%,植酸磷含量降低37.5%,總磷含量增加了15.0%。玉米經(jīng)擠壓膨化處理后,脂肪、蛋白溶解度和植酸磷與膨化前相比發(fā)生顯著變化(P<0.05),各項(xiàng)指標(biāo)變異程度依次為:CV植酸磷>CV蛋白溶解度>CV熱敏蛋白>CV脂肪>CV總磷>CV蛋白質(zhì)。
本試驗(yàn)測(cè)定了25批次的大豆經(jīng)擠壓膨化前后常規(guī)成分及抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的變化(見表2)。由表2可知,擠壓膨化加工使大豆的蛋白質(zhì)與總磷含量有所提高,脂肪、蛋白溶解度、熱敏蛋白和脲酶活性均有下降,植酸磷的含量基本上無變化。與大豆膨化前相比,膨化大豆的脂肪含量降低1.26%,蛋白質(zhì)含量提高1.23%,蛋白溶解度降低12.12%,熱敏蛋白含量降低94.65%,脲酶活性降低97.46%,植酸磷含量降低6.25%,總磷含量提高3.39%。
表1 玉米擠壓膨化后營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的變化(干物質(zhì)基礎(chǔ),%)
表2 大豆擠壓膨化后營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的變化(干物質(zhì)基礎(chǔ))
大豆經(jīng)擠壓膨化處理后,蛋白溶解度、熱敏蛋白和脲酶活性與膨化前相比發(fā)生顯著變化(P<0.05),各項(xiàng)指標(biāo)變異程度依次為:CV脲酶活性>CV植酸磷>CV熱敏蛋白>CV蛋白溶解度>CV總磷>CV脂肪>CV蛋白質(zhì)。
試驗(yàn)測(cè)定了10批次的亞麻籽經(jīng)擠壓膨化前后常規(guī)成分及抗?fàn)I養(yǎng)因子含量的變化(見表3)。由表3可知,擠壓膨化加工使亞麻籽的蛋白質(zhì)含量有所提高,脂肪、蛋白溶解度和總磷均有下降趨勢(shì),對(duì)熱敏蛋白具有顯著的降低。其中膨化亞麻籽的脂肪含量相比膨化前降低1.35%,蛋白質(zhì)含量提高0.73%,蛋白溶解度降低8.05%,熱敏蛋白含量降低40.0%,總磷含量下降1.92%。
表3 亞麻籽擠壓膨化后營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的變化(干物質(zhì)基礎(chǔ),%)
亞麻籽經(jīng)擠壓膨化處理后,熱敏蛋白與膨化前相比發(fā)生顯著變化(P<0.05),各項(xiàng)指標(biāo)變異程度依次為:CV熱敏蛋白>CV總磷>CV蛋白溶解度>CV脂肪>CV蛋白質(zhì)。
在本試驗(yàn)中,飼料原料經(jīng)擠壓膨化處理后,玉米的蛋白質(zhì)及總磷含量分別提高了2.24%和15.0%,大豆的蛋白質(zhì)及總磷含量分別提高了1.23%、3.39%,亞麻籽的蛋白質(zhì)含量提高0.73%,但總磷含量降低了1.92%。飼料原料經(jīng)膨化加工后,其中的蛋白質(zhì)與總磷的含量并沒有顯著變化,但可能改變對(duì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)特征影響了蛋白質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。徐紅華等[7]研究發(fā)現(xiàn),擠壓膨化可以破壞蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致大豆球蛋白內(nèi)部疏水基暴露,蛋白分子變性,減少二硫鍵的形成;隨著擠壓溫度升高,會(huì)破壞蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,可以增加蛋白質(zhì)的交聯(lián)作用,降低游離巰基含量。
此外,在本研究中,玉米、大豆和亞麻籽的熱敏蛋白含量分別降低了40.74%、94.65%和40.0%,蛋白溶解度降低了33.17%、12.12%和8.05%,這可能與原料蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的改變有關(guān)。熱敏蛋白是衡量鹽可溶性蛋白受溫度影響的重要指標(biāo),蛋白溶解度指標(biāo)反映了蛋白質(zhì)變性的程度,這兩個(gè)指標(biāo)的改變可能與蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。有研究表明膨化加工過程中的作用力破壞原料中蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)性質(zhì)發(fā)生改變,可溶性蛋白含量降低,導(dǎo)致原料中蛋白質(zhì)溶解度降低[8]。Sun 等[9]在研究熱處理(40~120 ℃)甘薯蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),熱處理可以顯著提高無規(guī)則卷曲和β-轉(zhuǎn)角的含量,而β-折疊含量顯著降低。趙成彬等[10]研究發(fā)現(xiàn),隨著擠壓溫度的升高,膨化豆粕的二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,氮溶解指數(shù)和蛋白質(zhì)分散指數(shù)先增大后減小,有利于提高豆粕品質(zhì)。原料中的蛋白質(zhì)在膨化機(jī)內(nèi)經(jīng)過高溫、高壓、高剪切力的作用,原有的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,在離開模口時(shí),由于壓力迅速下降,原料中的水分急劇蒸發(fā),因此物料會(huì)形成多孔氣泡狀的蓬松結(jié)構(gòu),破壞了蛋白質(zhì)原有的空間結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)亞基之間發(fā)生重新聚集,二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生變化。此外,杜雙奎[11]發(fā)現(xiàn)原料在高溫高壓的剪切作用下,蛋白質(zhì)的三、四級(jí)結(jié)構(gòu)的作用力變?nèi)?,蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生伸展和重組,分子間氫鍵、二硫鍵等部分?jǐn)嗔选Vx藍(lán)華等[12]對(duì)茶渣蛋白進(jìn)行擠壓膨化改性后提高了茶渣蛋白的持水力、吸水性及乳化性,說明擠壓膨化可以改善茶渣蛋白的功能特性。
膨化加工工藝對(duì)飼料中脂肪含量有一定的影響,在本試驗(yàn)中玉米、大豆和亞麻籽經(jīng)過膨化后其中的脂肪含量分別降低38.87%、1.26%和1.35%,這可能是由于在高溫條件下,原料中不飽和脂肪酸容易被氧化形成復(fù)合物有關(guān),同時(shí)高溫也會(huì)導(dǎo)致脂肪自身發(fā)生降解,這與前人的研究結(jié)果一致。飼料原料在高溫下進(jìn)行擠壓膨化處理,飼料中的脂肪會(huì)有一定程度的氧化,并與淀粉形成淀粉脂質(zhì)復(fù)合物,其中的飽和脂肪酸較穩(wěn)定,而不飽和脂肪酸極易被氧化,尤其在高溫、氧氣、金屬等條件下更易氧化而生成過氧化物和金屬過氧化物復(fù)合物,導(dǎo)致原料中的粗脂肪水平降低[13]。甘振威等[14]發(fā)現(xiàn)飼料中的脂肪在擠壓膨化過程中分解為甘油和游離脂肪酸,并與淀粉、蛋白質(zhì)形成復(fù)合物,導(dǎo)致飼料中粗脂肪含量降低。Nierle 等[15]研究表明部分脂肪可以在擠壓過程中隨蒸汽揮發(fā)掉,并且少量脂肪可以與糊化的淀粉形成較難被溶劑萃取的絡(luò)合物,降低了脂肪的測(cè)定值。
飼料原料中的抗?fàn)I養(yǎng)因子如胰蛋白酶抑制劑、植酸磷等容易造成幼齡動(dòng)物對(duì)營(yíng)養(yǎng)成分消化吸收障礙,飼料轉(zhuǎn)化率降低,導(dǎo)致動(dòng)物生產(chǎn)性能下降,造成經(jīng)濟(jì)損失。膨化加工可降低大豆的脲酶活性,破壞大豆中胰蛋白酶抑制因子,并且隨著膨化溫度的升高及加熱時(shí)間的延長(zhǎng),原料中抗?fàn)I養(yǎng)因子活性下降,并呈正相關(guān)的趨勢(shì)。從本試驗(yàn)研究結(jié)果可以看出,經(jīng)過膨化加工,大豆的脲酶活性損失率達(dá)到97.46%。一般認(rèn)為大豆的脲酶活性與胰蛋白酶抑制因子的含量呈正相關(guān),脲酶活性越低說明對(duì)大豆中的抗胰蛋白酶抑制因子的破壞越大。劉海軍等[16]研究發(fā)現(xiàn),膨化過程中的高溫高水分條件下,對(duì)大豆脲酶活性及胰蛋白酶含量有顯著的失活現(xiàn)象。膨化溫度達(dá)到100~140 ℃時(shí)可使大豆胰蛋白酶抑制因子活性降低74.8%~88.6%[17],這與本試驗(yàn)研究結(jié)果一致。
植物性飼料原料中的植酸可以與蛋白質(zhì)、金屬離子、磷等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)結(jié)合,降低了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的利用率。飼料中的植酸磷不能直接被動(dòng)物消化,經(jīng)過添加植酸酶或者采用適宜的加工方式,提高植酸磷的利用率。在本試驗(yàn)中,經(jīng)過擠壓膨化加工后不同原料中植酸磷含量的變化不盡一致,玉米中的植酸磷顯著降低,但是對(duì)于大豆中的植酸磷并沒有顯著的影響。在本試驗(yàn)所采集的樣品中植酸磷的含量較低,導(dǎo)致不同原料中植酸磷含量的變異系數(shù)較大,但總體飼料中的植酸磷含量經(jīng)擠壓膨化處理后均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。
擠壓膨化加工技術(shù)對(duì)飼料原料中的營(yíng)養(yǎng)成分及抗?fàn)I養(yǎng)因子有一定的影響,在本試驗(yàn)條件下,經(jīng)擠壓膨化加工后,可以提高玉米、大豆和亞麻籽中的蛋白質(zhì)的含量,降低脂肪、蛋白溶解度和熱敏蛋白含量。其中膨化加工可以顯著降低玉米中植酸磷含量,但對(duì)于大豆中的植酸磷含量的降低沒有顯著變化,但有下降的趨勢(shì)。