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    鹽地堿蓬提取物對(duì)食源性肥胖小鼠的減肥功能研究

    2020-08-27 06:40:58陳曉丹黃文文陳前鋒
    生物化工 2020年4期
    關(guān)鍵詞:高脂低劑量小鼠

    陳曉丹,黃文文,陳前鋒

    (1.盤(pán)錦職業(yè)技術(shù)學(xué)院,遼寧盤(pán)錦 124000;2.自然資源部第三海洋研究所,福建廈門 361005;3.西南大學(xué),重慶400700)

    鹽地堿蓬(S. salsa (L) Pall)屬于藜科堿蓬屬的一年生草本植物,多生長(zhǎng)于濱海濕地、灘涂等鹽堿地。因其顏色鮮艷,常用作觀賞植物,或作為一種野菜被農(nóng)民食用。鹽地堿蓬富含維生素C、微量元素、黃酮類化合物和不飽和脂肪酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1],粗蛋白、粗脂肪和總糖含量較少,膳食纖維和氨基酸等成分豐富,是一種符合現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)健康飲食觀念的野生植物[2]。

    目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)堿蓬屬植物的研究主要集中于植物生理以及耐鹽方面,對(duì)其化學(xué)成分的研究發(fā)現(xiàn),翅堿蓬中含有黃酮類、脂肪酸類、萜類、多酚類以及脂溶性化合物[3-4]等。明代的《救荒本草》中記載堿蓬具有良好的藥效:“味咸性涼,清熱消積”;《綱目拾遺》有記載:“可清熱,瘰癘、腹脹”[5]。隨著對(duì)鹽地堿蓬研究的不斷深入,更多研究著眼于對(duì)鹽地堿蓬中的多糖[6]、色素及黃酮[7-8]等物質(zhì)及其活性進(jìn)行研究。高健等[9]采用65%乙醇浸提法從鹽地堿蓬中提取總黃酮,測(cè)定了總黃酮的含量;張躍林等[10]采用水提法從鹽地堿蓬中提取黃酮類物質(zhì),進(jìn)行了含量的測(cè)定與驗(yàn)證;劉素華等[11]測(cè)定了鹽地堿蓬中的植物鹽成分主要為NaCl、KCl,同時(shí)含有微量的鈣、鐵、錳等元素[12]。胡博路等[13]的研究發(fā)現(xiàn),翅堿蓬主要通過(guò)清除氧自由基來(lái)達(dá)到抗氧化的作用,從而有益于健康和長(zhǎng)壽。目前,對(duì)于鹽地堿蓬在降脂減肥方面的研究不多。張建揚(yáng)等[14]研究證明鹽地堿蓬種子油具有一定的降脂和提高機(jī)體免疫的作用。因此,本文通過(guò)構(gòu)建小鼠營(yíng)養(yǎng)型肥胖模型并灌胃不同劑量的鹽地堿蓬提取物,以研究鹽地堿蓬提取物的減肥、減脂功能。

    1 材料與方法

    1.1 實(shí)驗(yàn)材料

    1.1.1 實(shí)驗(yàn)藥物

    堿蓬提取物:鹽地堿蓬取自遼寧省盤(pán)錦市遼河口紅海灘濕地10—11月成熟草體,實(shí)驗(yàn)室自行煎煮提取得膏狀粗提物(1 g堿蓬加10 mL水);奧利司他,浙江海正藥業(yè)股份有限公司;高脂飼料,西南大學(xué)藥學(xué)院動(dòng)物中心。

    1.1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及飼料

    SPF級(jí)昆明種小鼠,體重18~22 g,200只,雄性,西南大學(xué)藥學(xué)院采購(gòu)。小鼠飼養(yǎng)于西南大學(xué)SPF小鼠大鼠養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi),室溫(22±2)℃,相對(duì)濕度60%±2%?;A(chǔ)飼料由西南大學(xué)提供;高脂飼料由80%基礎(chǔ)飼料、10%豬油、10%蛋黃粉混勻制成備用。

    1.1.3 儀器設(shè)備

    BS-120型全自動(dòng)生化儀,深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司;Micro 17R離心機(jī),北京通世華港設(shè)備有限公司;BT224S型電子分析天平,北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 分組及給藥

    以200只雄性昆明小鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象,隨機(jī)分籠,每籠10只,飼養(yǎng)于西南大學(xué)SPF小鼠大鼠養(yǎng)殖系統(tǒng)內(nèi)。設(shè)置空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、堿蓬低劑量組、堿蓬中劑量組、堿蓬高劑量組和陽(yáng)性對(duì)照組??瞻讓?duì)照組選30只,自實(shí)驗(yàn)開(kāi)始至結(jié)束用普通飼料喂養(yǎng),其余動(dòng)物均喂養(yǎng)高脂飼料。待喂養(yǎng)高脂飼料小鼠平均體重超過(guò)對(duì)照組20%后,繼續(xù)喂養(yǎng)一周,從造模小鼠中選取已超過(guò)對(duì)照組20%的肥胖模型小鼠150只,分為5組:(1)模型對(duì)照組,每天只喂養(yǎng)高脂飼料;(2)堿蓬低、中、高劑量組,每天除喂高脂飼料外,還分別灌胃2 g/kg、4 g/kg、6 g/kg堿蓬煎煮液;(3)陽(yáng)性對(duì)照藥物組除每天喂高脂飼料外,還灌胃奧司利他0.06 g/kg。同時(shí)空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等容量的蒸餾水,自由采食,自由飲水,連續(xù)給藥5周,每周小鼠稱重,5周實(shí)驗(yàn)后隨即脫頸椎處死。

    1.3 測(cè)定指標(biāo)

    1.3.1 體重和Lee's指數(shù)

    末次給藥后,測(cè)定小鼠體重和體長(zhǎng)(小鼠鼻尖到肛門的長(zhǎng)度),按照公式1計(jì)算Lee's指數(shù)。式中,體重單位為g,體長(zhǎng)單位為cm。

    1.3.2 血清生化指標(biāo)

    灌胃5周后,各組小鼠禁食24 h,小鼠頸部動(dòng)脈取血,靜置30 min后,3 000 r/min離心10 min,分離血清,按邁瑞生化檢測(cè)試劑要求提供的方法,測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-CTC)的含量。

    1.4 統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)處理

    實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以±s表示,采用SPSS16.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和單因素方差分析。P<0.05或P<0.01表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 對(duì)小鼠體質(zhì)量變化的影響

    表1實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,用藥后各組體重變化不同,空白對(duì)照組體重增加最少,堿蓬高、中、低劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組均可以降低營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠體質(zhì)量,根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,堿蓬高、中、低劑量組與長(zhǎng)期喂養(yǎng)高脂飼料模型對(duì)照組比較,數(shù)據(jù)差別有顯著性意義(P<0.05),說(shuō)明堿蓬高、中、低劑量組對(duì)降低小鼠體重有一定作用。

    表1 鹽地堿蓬提取液對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠體質(zhì)量的影響±

    2.2 對(duì)小鼠Lee's指數(shù)的影響

    表2實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,與長(zhǎng)期喂養(yǎng)高脂飼料模型對(duì)照組比較,陽(yáng)性對(duì)照組和堿蓬高、中、低劑量組Lee's指數(shù)均明顯下降,統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明具有顯著性差異(P<0.05),說(shuō)明堿蓬高、中、低劑量組對(duì)降低小鼠Lee's指數(shù)有一定作用。

    表2 鹽地堿蓬提取液對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠Lee's指數(shù)的影響±s

    2.3 對(duì)小鼠血清生化指標(biāo)的影響

    表3實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明,陽(yáng)性藥組和堿蓬高、中、低劑量組血清中TC、TG含量(CB溶質(zhì)的物質(zhì)的量濃度)均比模型對(duì)照組低,且統(tǒng)計(jì)學(xué)分析表明差異具有顯著性(P<0.05),說(shuō)明堿蓬高、中、低劑量組具有一定的降脂作用。各給藥組HDL-CTC水平與模型對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異。

    3 結(jié)論

    本研究以高脂飼料飼養(yǎng)小鼠,誘導(dǎo)小鼠肥胖,體質(zhì)量、Lee's指數(shù)和血清TC、TG和HDL-CTC含量顯著增加的特征,說(shuō)明小鼠肥胖模型造模成功。對(duì)模型營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠以堿蓬低、中、高劑量組灌胃后,小鼠體質(zhì)量、Lee's指數(shù)和血清TC、TG含量等方面有著不同程度的改善效果,說(shuō)明鹽地堿蓬具有一定的減肥和降脂效果。

    鹽地堿蓬對(duì)營(yíng)養(yǎng)性肥胖小鼠具有減肥和降脂作用,而作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。目前,國(guó)內(nèi)鹽地堿蓬的基礎(chǔ)研究較弱,研究大多為脂溶性成分,而關(guān)于水溶性成分研究不多。本研究以水煮液為試驗(yàn)藥物,其活性成分具有較好的研究?jī)r(jià)值,對(duì)其分離成分進(jìn)行藥理活性篩選以尋找具有明顯生物活性的天然產(chǎn)物,為研究鹽地堿蓬在食品和藥品中的開(kāi)發(fā)利用提供參考。

    表3 鹽地堿蓬提取液對(duì)各組小鼠血清TC、TG和HDL-CTC含量的影響

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