門冬氨酸洛美沙星葡萄糖注射液處方工藝優(yōu)化

龍憲軍，仇 萍，劉 艷，陳迪釗，彭祖仁，楊雪純，龐思遠(yuǎn)

(1 湖南正清制藥集團(tuán)股份有限公司，湖南 懷化 418005；2 懷化學(xué)院，湖南 懷化 418000)

洛美沙星(Lomefloxacin)是第三代喹諾酮類抗菌藥物[1]，對(duì)綠膿桿菌的革蘭氏陰性菌及陽性菌有廣譜抗菌作用，廣泛應(yīng)用于敏感細(xì)菌引起的呼吸道、泌尿生殖系統(tǒng)、腹腔、膽道、腸道、皮膚軟組織感染以及鼻竇炎等治療，臨床常用其鹽類。門冬氨酸洛美沙星(Lomefloxacin Aspartate)是有機(jī)酸鹽，相對(duì)常見的無機(jī)酸鹽如鹽酸洛美沙星[2-5]，對(duì)人體的刺激性更小，患者的耐受性更好。但是，門冬氨酸洛美沙星葡萄糖水溶液不穩(wěn)定，有關(guān)物質(zhì)、含量項(xiàng)目檢測異常，貯藏過程有沉淀析出，影響了產(chǎn)品質(zhì)量和療效。因此，本文對(duì)門冬氨酸洛美沙星葡萄糖大容量注射劑制備工藝進(jìn)行研究，篩選出最優(yōu)處方和工藝，提高制劑的穩(wěn)定性，為科學(xué)生產(chǎn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

液相色譜儀，島津儀器(蘇州)有限公司；乙腈(批號(hào)20070301)，鄭州市國達(dá)儀器設(shè)備有限公司；磷酸二氫鉀(批號(hào)020050310)，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心；磷酸(批號(hào)20030801)，長沙市分路口塑料化工廠；四丁基溴化銨(批號(hào)2030317)，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心；洛美沙星對(duì)照品(批號(hào)0452-200001)，中國藥品生物制品檢定所；門冬氨酸洛美沙星(編號(hào)Y-704003)，鄭州永和制藥有限公司；無水葡萄糖(編號(hào)Y-702001)，河北圣雪葡萄糖有限責(zé)任公司；亞硫酸氫鈉(編號(hào)Y-702009)，湖南爾康制藥有限公司。

2 方法與結(jié)果

2.1 制備工藝

取配制全量3/5的注射用水，加入處方量的葡萄糖和亞硫酸氫鈉[6]，攪拌使溶解(活性炭先加法：加入活性炭過濾)；加入處方量的門冬氨酸洛美沙星(活性炭后加法：加入活性炭過濾)；再加入注射用水使成全量。0.45 μm和0.22 μm的濾芯過濾，檢測含量、檢查可見異物，合格后灌裝，滅菌，燈檢，包裝。

2.2 高效液相色譜法含量測定

色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.7 g，磷酸2.8 mL，加水稀釋至1000 mL)-0.05 mol/L四丁基溴化銨溶液(乙腈∶磷酸鹽緩沖液∶四丁基溴化銨溶液=15∶85∶4)為流動(dòng)相；檢測波長為288 nm；理論塔板數(shù)按門冬氨酸洛美沙星計(jì)算，應(yīng)不低于1500。門冬氨酸洛美沙星峰與各雜質(zhì)峰的分離度應(yīng)符合要求。

測定法：取洛美沙星對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋成每1 mL中約含洛美沙星0.4 mg的溶液，搖勻；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。精密量取20 μL注入色譜儀，記錄色譜圖。另取樣品2.0 mL，置于25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，同法測定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算。

系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn)：取洛美沙星對(duì)照品19.24 mg，置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻；精密量取5 mL，置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。進(jìn)樣20 μL，測定，結(jié)果顯示洛美沙星峰理論塔板數(shù)大于1500，主峰與其它雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

陰性干擾實(shí)驗(yàn)：按制備工藝方法不加門冬氨酸洛美沙星制得陰性對(duì)照品；按上述色譜條件，將對(duì)照品溶液、供試品溶液、陰性對(duì)照品各進(jìn)樣20 μL，測定，結(jié)果表明樣品中其他組分對(duì)門冬氨酸洛美沙星含量測定無干擾。

線性關(guān)系考察：精密稱取洛美沙星對(duì)照品10.17 mg，置10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻；精密量取5 mL置25 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液。分別精密量取貯備液1 mL、2 mL、4 mL、6 mL、8 mL、10 mL，置10 mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，制成濃度為0.4068 mg/mL、0.8136 mg/mL、1.6272 mg/mL、2.4408 mg/mL、3.2544 mg/mL和4.0680 mg/mL的溶液，進(jìn)樣20 μL，以對(duì)照品溶液濃度(X，mg/mL)對(duì)峰面積(Y)進(jìn)行線性回歸，線性回歸方程：y=4.8364×106x+4.2445×105，r=0.9998)。結(jié)果表明，洛美沙星濃度在0.4～4.0 mg/mL范圍內(nèi)與峰面積有良好的線性關(guān)系。

精密度實(shí)驗(yàn)：取樣品，照供試品溶液的制備方法制成供試品溶液。重復(fù)進(jìn)樣6次，結(jié)果6次的供試品峰面積的RSD為0.42%，表明儀器精密度較好。

重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)：取同一批樣品，照供試品溶液的制備方法平行制備5份溶液，分別進(jìn)樣，測定。結(jié)果5份平行樣含量RSD為0.52%，說明方法重現(xiàn)性較好。

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)：取同一供試品溶液，分別在0、2、4、6、8 h時(shí)測定。結(jié)果5次進(jìn)樣峰面積RSD為0.44%，表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定。

回收實(shí)驗(yàn)：精密量取上述陰性對(duì)照液9份各100 mL，分別加入對(duì)照品制成已知含量的樣品，照供試品溶液的制備方法制成供試品溶液測定。計(jì)算含量、回收率和RSD，結(jié)果見表1。

表1 回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.3 正交篩選與處方工藝優(yōu)化

根椐門冬氨酸洛美沙星的性質(zhì)和預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以門冬氨酸洛美沙星的含量和有關(guān)物質(zhì)為考察指標(biāo)，設(shè)立3個(gè)考察因素，每個(gè)因素3個(gè)水平(表2)。在滿足自由度f試≤f表?xiàng)l件下，選擇正交表L9(34)安排實(shí)驗(yàn)(表3)。實(shí)驗(yàn)按2.1項(xiàng)下方法生產(chǎn)，測量定樣品含量和有關(guān)物質(zhì)，考察3個(gè)因素對(duì)考察指標(biāo)的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3，方差分析見表4。

表2 因素水平表

表3 正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與結(jié)果

表4 方差分析表

由表4可見影響含量的主要因素是B，最佳水平是B1，A、C對(duì)其影響不大，可任取一水平；影響可見異物的主要因素是C，其次是A，較佳工藝條件是C1A2，B對(duì)其影響不大，可任取一水平。綜合兩個(gè)考察指標(biāo)沒有沖突，最終確定最佳處方工藝是A2B1C1，即以0.01%亞硫酸氫鈉作為穩(wěn)定劑，配制時(shí)0.1%活性炭先加，采用115 ℃，30 min滅菌，滅菌后快速冷卻至70 ℃以下。

3 結(jié) 論

活性炭對(duì)門冬氨酸洛美沙星有很強(qiáng)的吸附作用，致使含量降低。一般做法是采用加大投料量來保證含量合格，但成本較高。本文采用在門冬氨酸洛美沙星投料前先加活性炭過濾，經(jīng)過實(shí)踐效果較好，既保證了藥液的吸附效果，又避免對(duì)主藥造成影響，但此法不適用于主藥投料量較大的情況。

亞硫酸氫鈉對(duì)處方有穩(wěn)定作用，而且0.01%作用明顯強(qiáng)于0.05%。添加時(shí)溫度不宜過高，保持約60 ℃即可，否則亞硫酸氫鈉受熱會(huì)分解，逸出SO2同時(shí)使處方不穩(wěn)定。