3種殺菌劑對榛子苗期根腐病防效的比較1)

白劍宇 羅達(dá) 吳正保 史彥江 宋鋒惠

(新疆林業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)林研究所，烏魯木齊，830063)

榛子(Corylusheterophlla)是世界公認(rèn)的四大堅果樹種之一，具有抗逆性強(qiáng)、結(jié)實(shí)早、易管理等特點(diǎn)，其果仁具有極高的營養(yǎng)價值和保健功能[1]。在我國，榛子主要分布于東北、華北及陜西、甘肅和新疆等地[2]。1993年新疆林業(yè)科學(xué)院首次從美國引進(jìn)美洲榛(C.americana)，并在新疆試種成功[3]，不但豐富了新疆堅果種類，而且成為部分果農(nóng)經(jīng)濟(jì)收入的新來源。自2001年以來，新疆林業(yè)科學(xué)院不斷加大榛子新品種的引進(jìn)力度，先后從國內(nèi)外引進(jìn)雜交榛子優(yōu)良品種，并在新疆不同生態(tài)區(qū)開展不同品種榛子生物學(xué)特性和品種選育等研究工作，掌握了榛子不同品種在新疆不同地區(qū)的最佳栽培管理技術(shù)措施，為榛子在新疆大面積推廣種植提供了重要的理論基礎(chǔ)[4-5]。自新疆引進(jìn)和種植榛子以來，很少有危害嚴(yán)重的病蟲害發(fā)生，但近年來在榛子擴(kuò)繁過程中，榛子幼苗根部腐爛、枯死現(xiàn)象普遍發(fā)生，給新疆榛子種苗擴(kuò)繁帶來了嚴(yán)重的危害，并成為新疆榛子產(chǎn)業(yè)規(guī)模發(fā)展壯大的重要限制因素[6-7]。基于此，在新疆林業(yè)科學(xué)院植物病害專家的幫助下，通過對疑似病原物的形態(tài)學(xué)鑒定、致病性試驗(yàn)驗(yàn)證和分子生物學(xué)鑒定，初步認(rèn)定榛子苗期發(fā)生的根腐病主要是由腐霉(Pythiumsp.)侵染引起的，但具體種類及分類地位還需要進(jìn)一步的試驗(yàn)驗(yàn)證。為降低該病害在榛子幼苗擴(kuò)繁中的危害，項(xiàng)目組成員對文獻(xiàn)記載的作物根腐病防治中常用的防控藥劑進(jìn)行查閱和篩選，針對榛子根腐病防控藥劑進(jìn)行了探索性的初選試驗(yàn)，篩選出吡唑醚菌酯、戊唑醇和丙環(huán)唑3種防效相對較好的防治藥劑。這3種藥劑均具有保護(hù)、鏟除、治療和強(qiáng)內(nèi)吸活性等特性，可應(yīng)用于多種作物的根腐病防治[8-13]。為進(jìn)一步明確3種藥劑的田間防效，為榛子苗期根腐病的高效防控提供最佳使用藥劑，項(xiàng)目組成員在前期藥劑初選的基礎(chǔ)上針對這3種藥劑開展了田間防治效果的比對分析研究，為新疆榛子苗期根腐病的防治提供理論依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

榛子根腐病供試菌株是由新疆林業(yè)科學(xué)院植物病理實(shí)驗(yàn)室分離、鑒定后保存的高致病力的菌株(ZZGF-03)。榛子幼苗為適宜新疆發(fā)展的優(yōu)良品種平歐雜種榛8#，種植于伊犁河谷察布查爾縣烏宗不拉克村榛子種苗繁育基地日光溫室。殺菌劑為本課題組初選試驗(yàn)篩選出的對榛子苗期根腐病防治效果較好的3種藥劑，具體為430 g·L-1戊唑醇SC(拜耳作物科學(xué)中國有限公司)、質(zhì)量分?jǐn)?shù)25%吡唑醚菌酯EC(山東康喬生物科技有限公司)和質(zhì)量分?jǐn)?shù)50%丙環(huán)唑EC(陜西湯普森生物科技有限公司)。PDA培養(yǎng)基，馬鈴薯200 g、葡萄糖30 g、水瓊脂15 g，加水至1 L，高壓滅菌后用于菌株的培養(yǎng)和菌絲生長速率的測定。

1.2 方法

1.2.1 殺菌劑對病菌菌絲生長影響的測定

采用菌絲生長速率法[14]測定。在預(yù)試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，將3種供試殺菌劑原液以推薦使用質(zhì)量濃度為中心配置成系列梯度，并與加熱后冷卻至45 ℃左右的PDA培養(yǎng)基混合，制成含藥劑的PDA平板。其中，平板中戊唑醇質(zhì)量濃度分別為0.009 375、0.018 750、0.037 500、0.075 000、0.300 000、0.600 000、1.200 000 mg·L-1，丙環(huán)唑、吡唑醚菌酯質(zhì)量濃度分別為0.025、0.050、0.100、0.200、0.500 mg·L-1，并以等量不加藥劑的PDA平板為空白對照。供試榛子根腐病菌在PDA平板上25 ℃培養(yǎng)5 d，用打孔器在菌落邊緣打取直徑為4 mm的菌餅，正面向下接種在對照及含藥PDA平板上，每個處理和對照設(shè)3次重復(fù)，并置于培養(yǎng)箱中25 ℃培養(yǎng)，當(dāng)對照培養(yǎng)皿中菌落直徑長到培養(yǎng)皿直徑的3/4時，采用十字交叉法分別測量各處理和對照的菌落直徑，計算各藥劑處理對菌絲生長的抑制率，并以毒力最低的藥劑為基準(zhǔn)藥劑計算其他藥劑的相對毒力比值。

菌落增長直徑=菌落直徑-菌餅直徑。

菌絲生長抑制率={(對照菌落增長直徑-處理菌落增長直徑)/對照菌落增長直徑}×100%。

毒力比值=測試藥劑EC50(或EC95)/基準(zhǔn)藥劑EC50(或EC95)。

1.2.2 殺菌劑對榛子根腐病田間防治效果的測定

田間藥效試驗(yàn)在新疆伊犁察布查爾縣烏宗布拉克村榛子種苗繁育基地根腐病發(fā)病嚴(yán)重的日光溫室進(jìn)行。試驗(yàn)于2018年4月16日開始，在參照前期灌根防治榛子苗期根腐病使用劑量的基礎(chǔ)上，將3種殺菌劑的有效劑量分別設(shè)置2個質(zhì)量濃度，其中吡唑醚菌酯質(zhì)量濃度為30、60 mg·L-1，430 g·L-1戊唑醇懸浮劑質(zhì)量濃度為25、50 mg·L-1，丙環(huán)唑水乳劑質(zhì)量濃度為5、10 mg·L-1。在榛子幼苗為3～5葉期，隨機(jī)選取榛子葉齡相對一致的幼苗，每株幼苗灌根500 mL配置好的藥液，設(shè)置清水對照。每處理3次重復(fù)，每重復(fù)100株，設(shè)保護(hù)行。分別于施藥后30、60、90 d進(jìn)行全區(qū)調(diào)查，統(tǒng)計各對照和處理的發(fā)病情況，計算發(fā)病率和防治效果。

病株率=(發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù))×100%。

防治效果={(空白對照區(qū)病株率-藥劑處理區(qū)病株率)/空白對照區(qū)病株率}×100%。

1.3 數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 20.0軟件分析殺菌劑質(zhì)量濃度和菌絲生長抑制率的線性回歸關(guān)系，并應(yīng)用Duncan氏新復(fù)極差法對處理間的差異顯著性進(jìn)行檢驗(yàn)，P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 殺菌劑對菌絲生長的抑制作用

吡唑醚菌酯、丙環(huán)唑和戊唑醇3種殺菌劑抑制榛子根腐病菌菌絲生長的毒力相近，EC50分別為0.053 9、0.055 1、0.074 7 mg·L-1；綜合比較各藥劑的EC50、EC95可見，吡唑醚菌酯、戊唑醇對菌絲生長的抑制作用較強(qiáng)，其EC95分別為16.575、16.699 mg·L-1，毒力比值分別為0.351 0、0.353 7(表1)。

表1 3種殺菌劑對榛子根腐病菌菌絲生長的毒力

2.2 殺菌劑對榛子根腐病的田間防治效果

榛子苗藥劑處理后30 d，60 mg·L-1吡唑醚菌酯與50 mg·L-1戊唑醇的防治效果較好，分別為93.99%與90.94%；而施藥后60 d，60 mg·L-1吡唑醚菌酯的防治效果最高，達(dá)90.53%，其次是50 mg·L-1戊唑醇處理和10 mg·L-1丙環(huán)唑處理，防效分別為84.21%、82.52%。施藥90 d后，各處理組防治效果均與藥劑處理60 d的防效沒有明顯差異，防治效果趨于穩(wěn)定(表2)。從清水對照結(jié)果看，榛子幼苗根腐病萌動發(fā)育前期發(fā)病率隨時間的延長逐漸升高，60 d后發(fā)病率趨于穩(wěn)定。各藥劑處理對榛子根腐病均具有一定的防效，但各藥劑高劑量處理對榛子根腐病的防治效果更穩(wěn)定，可作為榛子苗期根腐病防治使用劑量。

表2 3種殺菌劑對榛子苗期根腐病的田間防治效果

3 結(jié)論與討論

供試的3種殺菌劑對榛子根腐病菌均具有相對較高的毒力，其中，吡唑醚菌酯與丙環(huán)唑的抑菌效果最好，EC50相近，戊唑醇次之。綜合田間藥劑防控效果可見，3種藥劑對榛子根腐病均有較高的防效，其中高劑量的吡唑醚菌酯和戊唑醇的處理發(fā)病率要低于低劑量處理，防效相對穩(wěn)定。生產(chǎn)中，推薦使用高劑量的吡唑醚菌酯和戊唑醇用于新疆榛子種苗擴(kuò)繁中根腐病的防治，最佳使用有效劑量分別為60、50 mg·L-1。吡唑醚菌酯是一種作用位點(diǎn)單一的高抗性風(fēng)險殺菌劑，而戊唑醇、丙環(huán)唑均是抗性風(fēng)險相對較低的中抗性風(fēng)險殺菌劑。因此，實(shí)際應(yīng)用中3種藥劑可以交互使用，從而達(dá)到延緩病原菌抗藥性產(chǎn)生的目的。作物根腐病的防治是一個世界難題，其原因是作物根腐病多由土壤中的多種病原菌復(fù)合侵染引起，而土壤環(huán)境復(fù)雜，微生物種類繁多，植物根系一旦受到某種病菌侵染發(fā)病，土壤中其他病原菌也會先后侵染，加重危害。新疆發(fā)生的榛子苗期根腐病是一種國內(nèi)新病害，目前尚無有關(guān)榛子根腐病發(fā)生的報道。目前，該病僅僅被認(rèn)為是由腐霉屬中的某種真菌侵染引起，其他土壤真菌是否也是其病原還需要進(jìn)一步地驗(yàn)證。因此，要想準(zhǔn)確鑒定榛子苗期根腐病的病原，明確哪些病菌是病害發(fā)生的主導(dǎo)因素和先導(dǎo)因素需要大量的試驗(yàn)驗(yàn)證。該病為何僅在新疆發(fā)生，其致病病原具體種類及分類地位如何？病害發(fā)生與侵染規(guī)律如何？病害發(fā)生與當(dāng)?shù)亓⒌貤l件的關(guān)系如何？這些都將是下一步研究的重點(diǎn)。本研究僅針對當(dāng)前榛子苗期根腐病發(fā)生與危害嚴(yán)重的情況下，初步篩選出防效較好的幾種應(yīng)急防控藥劑，但由于新疆土壤條件復(fù)雜，不同地區(qū)、不同地塊土壤結(jié)構(gòu)成分和理化性質(zhì)不同，藥劑的使用劑量和防治效果也會有明顯的差異。因此，還需因地區(qū)和土壤條件的不同進(jìn)行相應(yīng)的試驗(yàn)確認(rèn)。