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    不同配比基質(zhì)對(duì)香合歡幼苗抗寒性的影響

    2020-08-19 13:00:03王琨袁高慶林緯賴家業(yè)
    南方農(nóng)業(yè)·中旬 2020年6期
    關(guān)鍵詞:抗寒性基質(zhì)

    王琨 袁高慶 林緯 賴家業(yè)

    摘 要 采用正交試驗(yàn)法將天然土(A)、泥炭土(B)、珍珠巖(C)和椰糠(D)按不同的體積比例配成9種栽培基質(zhì),進(jìn)行香合歡容器苗抗寒性研究試驗(yàn)。低溫處理香合歡離體葉片后,測(cè)定相對(duì)電導(dǎo)率、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、過氧化物酶(POD)活性和過氧化氫酶(CAT)活性,并擬合Logistic方程求出低溫半致死溫度(LT50),采用隸屬函數(shù)法綜合評(píng)價(jià)不同配比基質(zhì)對(duì)香合歡抗寒性的影響。結(jié)果表明:不同基質(zhì)下,香合歡幼苗LT50變化范圍為-3.68~-0.88 ℃;依據(jù)隸屬函數(shù)綜合評(píng)價(jià)結(jié)果,篩選出最強(qiáng)抗寒性培養(yǎng)基質(zhì)為N6基質(zhì),即A、B、C、D比例為1∶2∶0.5∶1。

    關(guān)鍵詞 香合歡;基質(zhì);容器苗;抗寒性

    香合歡(Albizia odoratissima (Linn. f.) Benth)又稱香須樹(中國(guó)高等植物圖鑒)、香茜藤(海南)、黑格(廣東)和牛角森(廣西),是豆科合歡屬植物,分布于我國(guó)的廣西、廣東、云南、福建和貴州等地,以及菲律賓、馬來西亞等國(guó)[1]。香合歡樹干通直,心材占比大,木材硬度大,木材氣干密度達(dá)0.843 g·cm-3,尺寸穩(wěn)定性好,是制作高級(jí)家具、運(yùn)動(dòng)器材、雕刻及各種裝飾的優(yōu)質(zhì)原材料[2],因其具有根瘤和良好的固氮能力,對(duì)改良土壤、改善林間生態(tài)環(huán)境及提高單位面積蓄積量有良好的作用,是混交營(yíng)林以及生態(tài)造林的先鋒樹種。隨著對(duì)香合歡生態(tài)價(jià)值和商品價(jià)值認(rèn)識(shí)的不斷深入,營(yíng)造香合歡人工林正在成為關(guān)注熱點(diǎn),市場(chǎng)對(duì)香合歡優(yōu)質(zhì)苗木的需求也在不斷增加。因此迫切需要研究和推廣香合歡優(yōu)質(zhì)苗木培育技術(shù)[2]。

    容器育苗技術(shù)已被證明是培育優(yōu)質(zhì)苗木的重要技術(shù)之一。目前,篩選育苗基質(zhì)普遍關(guān)注苗木生長(zhǎng)指標(biāo)和出圃率指標(biāo),而在對(duì)基質(zhì)作為植物馴化成敗的主導(dǎo)影響因子和苗木抗性的改良方面的研究卻比較薄弱[3-4]。國(guó)內(nèi)外關(guān)于不同基質(zhì)對(duì)植物抗寒、抗旱性影響的研究已有報(bào)道[5-6]。

    在香合歡容器育苗方面,僅見有不同基質(zhì)對(duì)香合歡發(fā)芽影響的報(bào)道。羅群鳳等[2]探討了天然土、細(xì)沙、椰糠及泥炭土播種基質(zhì)對(duì)香合歡種子發(fā)芽的影響,結(jié)果表明天然土和椰糠對(duì)芽苗根系和莖生長(zhǎng)發(fā)育較好,但是天然土播種發(fā)芽率顯著低于椰糠。在低溫脅迫下,植物的生理生化變化表現(xiàn)在細(xì)胞膜系統(tǒng)受損、平衡滲透壓和清除活性氧等多個(gè)方面。沈惠娟等[7]的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),杉木幼苗葉電導(dǎo)率隨處理溫度的下降而增加。鄭威等[8]對(duì)番荔枝幼苗進(jìn)行室內(nèi)控溫實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)丙二醛(MDA)含量隨溫度降低呈先增后減的趨勢(shì)。超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)和過氧化氫酶(CAT)等生理指標(biāo)變化也被應(yīng)用于文冠果[9]、風(fēng)鈴木[10]、閩楠[11]等樹種的抗寒性鑒定?;诖?,以天然土、泥炭土、椰糠和珍珠巖4種材料作為基質(zhì),采用4因素3水平正交試驗(yàn)法配制成香合歡容器苗栽培基質(zhì),進(jìn)行香合歡容器苗抗寒性相關(guān)指標(biāo)的分析試驗(yàn),旨在探索出香合歡幼苗生長(zhǎng)最適宜的栽培基質(zhì)配比,以及香合歡抗寒性與栽培基質(zhì)的關(guān)系,為香合歡優(yōu)質(zhì)苗木培育和香合歡人工林建設(shè)提供理論和技術(shù)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)材料

    供試材料香合歡種子于2018年11月采于廣西國(guó)有雅長(zhǎng)林場(chǎng),采集的種子在4 ℃冰箱中保存。試驗(yàn)地點(diǎn)為南寧市廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院實(shí)驗(yàn)基地。2019年7月5日,挑選大小一致、無病蟲害的種子用0.3%高錳酸鉀溶液浸種15 min后置于育苗穴盤中播種。7月20日挑選生長(zhǎng)相對(duì)一致的幼苗移栽到不同基質(zhì)的容器中,共設(shè)11個(gè)處理,每處理20株苗,按常規(guī)進(jìn)行澆水、除草。11月,各個(gè)處理隨機(jī)選取5株標(biāo)準(zhǔn)苗,采集植株中部葉片分別測(cè)定抗寒指標(biāo),所有指標(biāo)重復(fù)測(cè)定3次。

    1.2 育苗基質(zhì)配比設(shè)計(jì)

    育苗基質(zhì)采用天然土(A)、泥炭土(B)、珍珠巖(C)和椰糠(D),如表1所示,按不同體積倍數(shù)比例配制,按照正交設(shè)計(jì)法組成9種配方,另設(shè)天然土(CK1)與泥炭土(CK2)2個(gè)對(duì)照。基質(zhì)充分混勻后裝入容器袋待用,容器為加厚18 cm×26 cm的無紡布種植袋。

    1.3 葉片電導(dǎo)率的測(cè)定及半致死溫度

    采用離體葉片低溫處理法,將所采葉樣分別用自來水和蒸餾水沖洗后擦干,裝入自封袋。根據(jù)百色市極端低溫達(dá)到過-5.3 ℃和香合歡在-2 ℃低溫時(shí)不致受害[1],設(shè)置5個(gè)溫度梯度(3 ℃、0 ℃、-3 ℃、-6 ℃、-9 ℃),以11月南寧市室溫(約20 ℃)作為對(duì)照。參照梁莉等[12]和趙棟[13]的試驗(yàn)方法略作改動(dòng),將自封袋放入低溫冰箱中,以3 ℃·h-1的速率降溫,降至所需溫度后維持12 h,取出試驗(yàn)材料用濾紙吸干表面水分。用直徑5 mm的打孔器打取60片葉圓片,分為3份放入50 mL燒杯中,加入20 mL蒸餾水。將50 mL燒杯放于真空泵內(nèi)抽氣30 min,取出后放在20 ℃的室溫下浸泡1 h,用DDS-11A型電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡液的電導(dǎo)值R1,測(cè)完后將燒杯放在沸水中水浴30 min,冷卻至室溫?fù)u勻后測(cè)定浸泡液的電導(dǎo)值R2,計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率REC(R1和R2的比值)。

    將低溫脅迫下的相對(duì)電導(dǎo)率值與Logistic方程進(jìn)行擬合,計(jì)算拐點(diǎn)溫度即為半致死溫度。Logistic方程如式1所示。

    1.4 生理指標(biāo)測(cè)定

    參考Logistic方程求得的不同基質(zhì)香合歡低溫半致死溫度介于-3.68~-0.88 ℃,香合歡低溫脅迫生理指標(biāo)測(cè)定試驗(yàn)將溫度設(shè)定為4 ℃、-2 ℃及-6 ℃,以室溫20 ℃為對(duì)照,試驗(yàn)材料處理法同上。MDA活性測(cè)定采用硫代巴比妥酸顯色法[14];POD、SOD活性測(cè)定參照鄒琦[15]實(shí)驗(yàn)中的方法;CAT活性測(cè)定參照楊蘭芳等[16]實(shí)驗(yàn)中的方法。

    1.5 數(shù)據(jù)處理與分析

    采用Excel 2003進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),SPSS 19.0進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。運(yùn)用隸屬函數(shù)法綜合各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行抗寒性評(píng)價(jià),計(jì)算公式如式2所示。

    式中,X(fc)表示隸屬函數(shù)值,X表示各種苗木某項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定值,Xmax、Xmin表示某項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定值所有供試苗木中的最小值和最大值;與抗寒性呈負(fù)相關(guān)的MDA采用反隸屬函數(shù)計(jì)算,計(jì)算公式如式3所示。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 低溫脅迫對(duì)香合歡葉片相對(duì)電導(dǎo)率和半致死溫度的影響

    不同低溫處理下,香合歡葉片相對(duì)電導(dǎo)率及低溫半致死溫度(LT50)見表2。由表可知,隨著處理溫度的降低,11種不同基質(zhì)香合歡葉片相對(duì)電導(dǎo)率均呈現(xiàn)先緩慢升高、再快速升高、最后保持平穩(wěn)(S型曲線)的變化趨勢(shì),說明不同基質(zhì)香合歡葉片對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)具有一致性;但不同基質(zhì)香合歡葉片相對(duì)電導(dǎo)率差異性顯著(P<0.05),擬合Logistic方程求出的LT50各不相同。

    低溫半致死溫度(LT50)與抗寒性呈負(fù)相關(guān)關(guān)系,LT50值越低,說明植物抗寒性越強(qiáng)。根據(jù)LT50得出11種不同基質(zhì)香合歡幼苗的抗寒性順序?yàn)镹6>N3>CK2>N9>N5>N4>N8>N7>CK1>N2>N1。不同基質(zhì)香合歡幼苗的LT50差異較大,變化范圍為-3.68~-0.88 ℃,基質(zhì)處理間的差異達(dá)到顯著水平,說明基于電導(dǎo)法的LT50可以很好地區(qū)分香合歡容器苗的抗寒性。

    2.2 低溫脅迫對(duì)香合歡葉片MDA含量的影響

    MDA是膜脂過氧化作用的終產(chǎn)物,反映質(zhì)膜損害的程度[17-18]。由表3可知,在室溫20 ℃時(shí),11種不同基質(zhì)香合歡葉片的MDA含量差異顯著(P<0.05),說明不同基質(zhì)香合歡對(duì)外界栽培環(huán)境有不同程度的適應(yīng);隨著溫度的降低,不同基質(zhì)香合歡葉片的MDA含量呈先上升后下降的趨勢(shì),均在-2 ℃出現(xiàn)峰值,說明香合歡受低溫的影響,葉片細(xì)胞被破壞,產(chǎn)生物質(zhì)的能力降低,因此呈下降趨勢(shì)。在-2 ℃脅迫下,基質(zhì)N1、N2、N7、N8、N9、CK1和CK2香合歡葉片的MDA含量較高,但是CK2的MDA含量變化幅度較小,僅為1.83 μmol·g-1。含量增幅最小的是基質(zhì)N6,其次是基質(zhì)N3和CK2,說明這3組基質(zhì)培育的香合歡幼苗在低溫脅迫下的膜脂過氧化程度較弱,抗寒性較強(qiáng)。

    2.3 低溫脅迫對(duì)不同基質(zhì)香合歡葉片抗氧化酶活性的影響

    從表4可知,隨低溫脅迫程度的加深,香合歡葉片的SOD、POD和CAT活性變化趨勢(shì)均表現(xiàn)為先增后降。在低溫逆境下,SOD、POD和CAT協(xié)同作用防御活性氧或過氧化物自由基對(duì)細(xì)胞膜系統(tǒng)的傷害,從而降低逆境對(duì)植物的傷害[17-18]。

    11種不同基質(zhì)香合歡葉片的SOD活性均在-2 ℃出現(xiàn)峰值,其中增幅最大的是基質(zhì)N6,比常溫下增加了59.09 U·g-1·min-1,基質(zhì)CK2和N9次之?;|(zhì)N1、N2及CK1香合歡葉片的POD和CAT活性在低溫4 ℃時(shí)出現(xiàn)峰值且增幅小,其余基質(zhì)在-2 ℃出現(xiàn)峰值且增幅較大。POD活性增幅最大的是基質(zhì)N6,其次是基質(zhì)N3和CK2,分別增加了69.43 U·g-1·min-1、55.79 U·g-1·min-1和42.47 U·g-1·min-1。基質(zhì)N3的CAT活性增幅最大,為10.84 mg H2O2·g-1·min-1,其次是基質(zhì)N5和N6,基質(zhì)N2的增幅最小,僅占最大值的16.8%。綜上可得,基質(zhì)N6培育的香合歡幼苗在低溫脅迫下SOD、POD和CAT活性增幅均較大,具有較強(qiáng)的抗寒性。

    2.4 不同基質(zhì)香合歡幼苗抗寒性綜合評(píng)價(jià)

    運(yùn)用隸屬函數(shù)法,以MDA、SOD、POD和CAT 4項(xiàng)抗寒生理指標(biāo)從室溫20 ℃到-6 ℃的增幅值來計(jì)算隸屬函數(shù)值,根據(jù)隸屬函數(shù)的總值對(duì)11種不同基質(zhì)香合歡幼苗進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)并排序,隸屬度總值越大,抗寒性越強(qiáng)。從表5可以看出,11種不同基質(zhì)香合歡幼苗抗寒性強(qiáng)弱依次為N6>N3>CK2>N5>N9>N4>N8>N7>CK1>N2>N1。

    3 討論與結(jié)論

    本試驗(yàn)中,11種不同基質(zhì)香合歡幼苗葉相對(duì)電導(dǎo)率均隨溫度的降低呈現(xiàn)上升趨勢(shì),是由于經(jīng)過低溫處理,植物細(xì)胞的生物膜發(fā)生物相變化,透性增大,電解質(zhì)向膜外滲漏導(dǎo)致。相對(duì)電導(dǎo)率配以Logistic回歸方程求出的半致死溫度(LT50)是應(yīng)用最廣泛、最能準(zhǔn)確反映植物抗寒性的間接方法,已廣泛應(yīng)用于梨[19]、蘋果和降香黃檀等[20]樹木的抗寒性鑒定,如李俊才等[19]發(fā)現(xiàn)洋梨半致死溫度與田間凍害級(jí)別極顯著相關(guān)。此次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)不同基質(zhì)培育的香合歡幼苗的LT50變化范圍為-3.68~-0.88 ℃,基質(zhì)處理間的差異達(dá)到顯著水平,與羅詩等[21]用巖棉、粗砂和刨花為栽培基質(zhì)進(jìn)行黃瓜抗寒性實(shí)驗(yàn)得出巖棉栽培的黃瓜幼苗抗寒性較強(qiáng)相似,說明栽培條件影響植物抗寒性的強(qiáng)弱。

    自由基傷害學(xué)說認(rèn)為,植物在低溫脅迫下,細(xì)胞自由基產(chǎn)生和清除的平衡被破壞而出現(xiàn)自由基的積累,過剩自由基會(huì)引起生物膜膜脂的過氧化作用,產(chǎn)生有毒的膜脂過氧化產(chǎn)物MDA;在生物進(jìn)化過程中,植物體形成了防御活性氧毒害的酶促保護(hù)系統(tǒng),包括SOD、POD、CAT,從而提高植物體清除自由基的能力,減輕或避免自由基積累對(duì)細(xì)胞造成的傷害[17-18]。組織內(nèi)MDA含量、SOD活性、POD活性、CAT活性等指標(biāo)也在鑒定橡膠樹[22]、相思樹[23]及風(fēng)鈴木等林木抗寒性方面取得很好的應(yīng)用效果。植物的抗寒生理過程受多種因素的影響,采用單一的指標(biāo)難以反映其抗寒性本質(zhì),采用多個(gè)生理指標(biāo)去衡量的隸屬函數(shù)綜合鑒定法更能準(zhǔn)確判斷植物的抗寒性[18],這種方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于板栗[24]、核桃[25]和楊樹[26]等樹木的抗寒性鑒定,且研究結(jié)果與果樹田間抗寒性表現(xiàn)基本一致。此次試驗(yàn)采用隸屬函數(shù)法綜合MDA、SOD、POD和CAT 4個(gè)生理特性指標(biāo)對(duì)11種不同基質(zhì)香合歡幼苗進(jìn)行抗寒性綜合評(píng)價(jià),抗寒性強(qiáng)弱結(jié)果依次為N6>N3>CK2>N5>N9>N4>N8>N7>CK1>N2>N1。

    利用低溫半致死溫度(LT50)間接法和隸屬函數(shù)綜合法對(duì)11種不同基質(zhì)香合歡幼苗抗寒性進(jìn)行鑒定,發(fā)現(xiàn)兩種評(píng)價(jià)結(jié)果除基質(zhì)N5和N9排名順序顛倒外基本一致,說明不同基質(zhì)香合歡幼苗試驗(yàn)評(píng)價(jià)結(jié)果能夠較為科學(xué)地評(píng)價(jià)和區(qū)分香合歡容器苗的抗寒性強(qiáng)弱。因此,篩選出基質(zhì)N6(A、B、C、D比例為1∶2∶0.5∶1)為具有最強(qiáng)抗寒性的培養(yǎng)基質(zhì),其次是基質(zhì)N3(A、B、C、D比例為0∶2∶2∶2)和CK2(泥炭土)。

    香合歡苗木抗寒性評(píng)價(jià)是優(yōu)質(zhì)苗木評(píng)價(jià)體系的重要組成部分,對(duì)香合歡育苗、訓(xùn)化、引種及推廣具有重要的理論價(jià)值和實(shí)踐意義。要徹底了解不同基質(zhì)香合歡苗木抗寒能力的穩(wěn)定性,尚需結(jié)合造林實(shí)踐情況進(jìn)行評(píng)判。

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    (責(zé)任編輯:劉昀)

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