枸櫞酸咖啡因注射液與3種注射液的配伍穩(wěn)定性研究

李鵬 蔣宇丹

摘 要 目的：考察枸櫞酸咖啡因注射液與3種常用注射液的配伍穩(wěn)定性。方法：將枸櫞酸咖啡因注射液分別與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和10%葡萄糖酸鈣注射液進(jìn)行配伍，放置于室溫，分別在0 min、10 min、30 min、24 h考察性狀、pH、滲透壓、不溶性微粒，采用高效液相色譜法測定有關(guān)物質(zhì)、咖啡因含量和5%葡萄糖注射液配伍中5-羥甲基糠醛的含量。結(jié)果：在上述條件下，性狀、pH、滲透壓、不溶性微粒、有關(guān)物質(zhì)和含量均無明顯變化，與5%葡萄糖注射液配伍中5-羥甲基糠醛無明顯變化。結(jié)論：枸櫞酸咖啡因注射液與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和10%葡萄糖酸鈣注射液配伍后的溶液在24 h內(nèi)安全穩(wěn)定。

關(guān)鍵詞 枸櫞酸咖啡因注射液 配伍穩(wěn)定性 咖啡因 5-羥甲基糠醛 高效液相色譜法

中圖分類號(hào)：R971.7； R942 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1006-1533（2020）15-0090-04

Study on compatible stability of caffeine citrate injection with 3 kinds of injections

LI Peng*， JIANG Yudan**

（Department of R&D， Shanghai Harvest Pharmaceutical Co.， Ltd.， Shanghai 201206， China）

ABSTRACT Objective： To investigate the compatibility stability of caffeine citrate injection with three commonly used injections. Methods： The caffeine citrate injection was mixed with 5% glucose injection， 0.9% sodium chloride injection or 10% calcium gluconate injection， respectively and the mixtures were kept at room temperature. Their properties， pH value， osmolality， and insoluble particles were investigated at 0 min， 10 min， 30 min， and 24 h after mixture， respectively and the contents of the related substances， caffeine and 5-hydroxymethylfurfural in 5% glucose injection were determined by high performance liquid chromatography. Results： Under the above-mentioned conditions， the properties， pH value， osmotic pressure， insoluble particles， related substances and the other contents showed no significant change. Conclusion： The caffeine citrate injection being compatible with 5% glucose injection， 0.9% sodium chloride injection or 10% calcium gluconate injection is stable and safe within 24 hours.

KEY WORDS caffeine citrate injection； compatible stability； caffeine； 5-hydroxymethylfurfural； HPLC

咖啡因是中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮藥，通過刺激呼吸中樞、阻斷腺苷受體和改善呼吸肌功能等發(fā)揮作用。其具有肺保護(hù)作用，可以減低早產(chǎn)兒呼吸暫停的發(fā)生危險(xiǎn)，提高撤機(jī)成功率，同時(shí)具有腦保護(hù)作用[1]，故枸櫞酸咖啡因注射液是新生兒科非常常用的一種藥物，主要可以用于治療早產(chǎn)新生兒的原發(fā)性呼吸暫停。參照藥用說明書，枸櫞酸咖啡因注射液除靜脈注射外，可與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和10%葡萄糖酸鈣注射液配伍后靜脈滴注。枸櫞酸咖啡因注射液臨床療效較好，并發(fā)癥少，安全性高[2]，有與5%葡萄糖注射液和0.9%氯化鈉注射液配伍的報(bào)道[3-4]，但無配伍穩(wěn)定性的相關(guān)研究。本研究將枸櫞酸咖啡因注射液分別與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和10%葡萄糖酸鈣注射液進(jìn)行配伍，放置于室溫，分別在0 min、10 min、30 min、24 h考察性狀、pH、滲透壓、不溶性微粒，采用高效液相色譜法測定有關(guān)物質(zhì)、咖啡因含量和5%葡萄糖注射液配伍中5-羥甲基糠醛的含量，以期為臨床合理用藥提供參考。

1 儀器與試藥

Agilent 1260液相色譜儀，VWD檢測器、自動(dòng)進(jìn)樣器（美國安捷倫科技有限公司）；Sartorius CPA225D電子天平（德國賽多利斯科學(xué)儀器有限公司）；SEVEN EASY pH計(jì)〔梅特勒-托利多國際貿(mào)易（上海）有限公司〕；SMC 30D滲透壓儀、GWF-8JD不溶性微粒測定儀（均天津天河分析儀器有限公司）。

咖啡因?qū)φ掌罚ㄖ袊称匪幤窓z定研究所，批號(hào)：171215-201512），茶堿對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究所，批號(hào)：100121-201104），可可堿對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究所，批號(hào)：101110-201202），副黃嘌呤對(duì)照品（Toronto Research Chemicals INC，批號(hào)：2-AAH-100-1），5-羥甲基糠醛對(duì)照品（中國食品藥品檢定研究所，批號(hào)：11626-201610）。枸櫞酸咖啡因注射液（上海禾豐制藥有限公司，規(guī)格：1 ml∶20 mg，批號(hào)：Y161201、Y161202、Y161203），5%葡萄糖注射液（石家莊鵬海制藥有限公司，批號(hào)：1601272203），0.9%氯化鈉注射液（石家莊鵬海制藥有限公司，批號(hào)：1601282201），10%葡萄糖酸鈣注射液（成都倍特藥業(yè)有限公司，批號(hào)：170316）。四氫呋喃、乙腈、甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

2.1.1 有關(guān)物質(zhì)與咖啡因含量

Welch Ulrimate XB- C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以0.01 mol/L醋酸鈉-乙腈-四氫呋喃（191∶5∶4）（冰醋酸調(diào)節(jié)pH至4.5±0.1）為流動(dòng)相；檢測波長為275 nm；進(jìn)樣量10 μl。

2.1.2 5-羥甲基糠醛的測定

Welch Ulrimate XB- C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；以甲醇-水（10∶90）為流動(dòng)相；檢測波長為284 nm；進(jìn)樣量20 μl。

2.2 溶液的配制

2.2.1 對(duì)照品溶液

精密稱取茶堿適量，制成每1 ml中含茶堿0.02 mg的溶液，作為茶堿貯備液。精密稱取咖啡因?qū)φ掌愤m量并精密量取茶堿貯備液適量，制成含0.2 mg/ml的咖啡因和0.004 mg/ml的茶堿的溶液，作為咖啡因含量測定用對(duì)照品溶液。

精密稱取5-羥基糠醛對(duì)照品10 mg，置100 ml量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取1 ml，置50 ml量瓶中，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為5-羥基糠醛測定用對(duì)照品溶液。

2.2.2 配伍溶液

取枸櫞酸咖啡因注射液與3種注射液分別按1∶1混合。

2.2.3 供試品溶液

取“2.2.2”制備的溶液適量，分別用水稀釋制成每1 ml中約含0.4 mg枸櫞酸咖啡因的溶液，作為咖啡因含量測定用供試品溶液。此外，取“2.2.2”制備的溶液適量，分別用水稀釋制成每1 ml中約含0.8 mg枸櫞酸咖啡因的溶液，作為有關(guān)物質(zhì)測定用供試品溶液。

2.3 配伍穩(wěn)定性方法與結(jié)果

2.3.1 性狀

取“2.2.2”制備的溶液，在室溫條件下，分別于0 min、10 min、30 min、24 h觀察配伍液的外觀變化。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)各配伍液均無顯著變化（表1）。

2.3.2 pH

取“2.2.2”制備的溶液，在室溫條件下，分別于0 min、10 min、30 min、24 h測定配伍液的pH。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)各配伍液的pH均無顯著變化（表2）。

2.3.3 不溶性微粒

取“2.2.2”制備的溶液，在室溫條件下，分別于0 min、10 min、30 min、24 h采用光阻法測定配伍液的不溶性微粒，各配伍溶液中含25 μm及以上的微粒均小于25粒，含10 μm以上的微粒均小于150粒，符合2015年版《中國藥典》的規(guī)定[5]。

2.3.4 滲透壓

取“2.2.2”制備的溶液，在室溫條件下，分別于0 min、10 min、30 min、24 h使用滲透壓儀測定配伍液的摩爾濃度滲透壓。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)各配伍液的滲透壓均無顯著變化（表3）。

2.3.5 有關(guān)物質(zhì)

精密量取“2.2.1”制備的對(duì)照品溶液和“2.2.3”制備的供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖至主峰保留時(shí)間的2倍。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)各配伍液均未檢出有關(guān)物質(zhì)。

2.3.6 咖啡因含量

精密量取“2.2.1”制備的對(duì)照品溶液和“2.2.3”制備的供試品溶液各10 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算咖啡因含量。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)各配伍液中咖啡因含量無顯著變化（表4）。

2.3.7 5-羥基糠醛的測定

精密量取“2.2.1”制備的對(duì)照品溶液和“2.2.2”制備的與5%葡萄糖注射液的配伍溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算5-羥基糠醛的含量。結(jié)果顯示，24 h內(nèi)5-羥基糠醛含量無變化（表5）。

3 討論

3.1 有關(guān)物質(zhì)和含量方法學(xué)驗(yàn)證

有關(guān)物質(zhì)檢查和咖啡因含量測定參照USP中枸櫞酸咖啡因注射液項(xiàng)下的色譜條件，對(duì)方法進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，專屬性、線性、精密度、準(zhǔn)確度等均符合規(guī)定，方法可用于配伍試驗(yàn)。

3.2 5-羥甲基糠醛方法學(xué)驗(yàn)證

5-羥甲基糠醛的測定采用高效液相色譜法[6]，對(duì)方法進(jìn)行了方法學(xué)驗(yàn)證，專屬性、線性、精密度、準(zhǔn)確度等均符合規(guī)定，方法準(zhǔn)確、可靠。

3.3 5-羥甲基糠醛的研究目的

5-羥甲基糠醛是葡萄糖等單糖化合物在高溫或弱酸等條件下脫水產(chǎn)生的醛類化合物[7]，故5-羥甲基糠醛會(huì)在葡萄糖在放置過程中產(chǎn)生，5-羥甲基糠醛可發(fā)生聚合反應(yīng)而由聚合物可導(dǎo)致制劑變色，且顏色的深淺與5-羥甲基糠醛產(chǎn)生的量成正比，并且5-羥甲基糠醛過量對(duì)人體有一定損害[6，8]。因此，在與葡萄糖注射液配伍溶液中增加測定5-羥甲基糠醛，以評(píng)價(jià)配伍溶液的臨床安全性。

3.4 配伍穩(wěn)定性考察的必要性

注射劑中的不溶性微粒在1～50 μm、肉眼不可見，但因其可隨血液流動(dòng)且不能被代謝而可能對(duì)人體造成難以發(fā)現(xiàn)和潛在的嚴(yán)重危害。因注射劑的配伍不合理，會(huì)產(chǎn)生大量的不溶性微粒，從而引起靜脈炎、肺水腫、血管肉芽腫、血栓、過敏反應(yīng)、類熱原反應(yīng)等，嚴(yán)重危害人體健康[9-10]。故在本研究中，對(duì)配伍溶液進(jìn)行了不溶性微粒考察。

4 結(jié)語

注射液的配伍穩(wěn)定性是臨床應(yīng)用中極為重要的一個(gè)環(huán)節(jié)，決定著患者的用藥安全。本研究通過對(duì)枸櫞酸咖啡因注射液分別與5%葡萄糖注射液、0.9%氯化鈉注射液和10%葡萄糖酸鈣注射液進(jìn)行配制成的溶液進(jìn)行配伍穩(wěn)定研究，結(jié)果配伍溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定，為枸櫞酸咖啡因注射液的臨床用藥安全提供了依據(jù)。但實(shí)際臨床中還應(yīng)隨時(shí)觀察患者情況，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。

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