MAP2K4、PKG1及ZlC1在子宮內(nèi)膜癌患者組織中表達(dá)及預(yù)后價(jià)值

閆麗明 楊 敏 王 媛 李 艷

陜西省延安市延安大學(xué)附屬醫(yī)院(716000)

子宮內(nèi)膜癌發(fā)病機(jī)制尚未完全揭示[1]。發(fā)生與患者體內(nèi)雌激素和雄激素水平密切相關(guān)，且與細(xì)胞異常增殖及原癌基因異常激活密切相關(guān)[2]。絲裂原活化蛋白激酶4(MAP2K4)是人體重要編碼MAP激酶基因家族成員，絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)可介導(dǎo)細(xì)胞翻譯重要信號(hào)系統(tǒng)，該信號(hào)通路均參與多種細(xì)胞的生理過程，包括腫瘤在內(nèi)的多種疾病均與MAP2K4等激酶組分異?；罨芮邢嚓P(guān)[3]。目前在腫瘤細(xì)胞代謝過程中癌基因可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞活化、增殖和轉(zhuǎn)移，其中腫瘤細(xì)胞獲取能量的重要來源為有氧糖酵解，其異常也是腫瘤發(fā)生發(fā)展的重要特征[4]。有研究指出，PKG1是人體內(nèi)重要的糖酵解中ATP生成酶，在多種癌中起到十分重要作用[5]。小腦鋅指結(jié)構(gòu)蛋白1(ZIC1)與多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切，在結(jié)直腸癌、胃癌等多種惡性腫瘤中扮演重要角色[6]。但目前MAP2K4、PKG1及ZlC1在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)鮮有報(bào)道，因而本文對(duì)子宮內(nèi)膜癌組織中MAP2K4、PKG1及ZlC1表達(dá)水平及對(duì)病情預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值進(jìn)行探討。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象選擇

入組標(biāo)準(zhǔn)：①患者均存完整臨床病理數(shù)據(jù)；②入組前均未接受放化療方案治療；③保存完整臨床資料且預(yù)計(jì)生存期≥6個(gè)月；④患者術(shù)后病理診斷結(jié)果均經(jīng)2名5年以上工作經(jīng)驗(yàn)病理科醫(yī)師確認(rèn)；⑤對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重心肝腎功能異常；②伴自身免疫疾病者；③3個(gè)月內(nèi)服用激素類藥物治療；④臨床資料缺失或主動(dòng)申請(qǐng)退出本研究。

1.2 一般資料

經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，收集本院2012年1月-2014年1月收治的子宮內(nèi)膜癌患者112例臨床資料作觀察組，患者體質(zhì)量(56.2±4.9)kg(45～66 kg)，年齡(46.4±6.9)歲(32～58歲)；依照國際產(chǎn)婦科聯(lián)盟手術(shù)分期標(biāo)準(zhǔn)Ⅰ期6例、Ⅱ期40例、Ⅲ期57例、Ⅳ期9例；子宮內(nèi)膜樣腺癌89例、透明細(xì)胞癌8例、漿液性乳頭狀腺癌13例、腺鱗癌2例。選擇同期103例行手術(shù)治療的子宮良性病變患者為對(duì)照組，體質(zhì)量(57.0±5.1)kg(44～67 kg)，年齡(47.0±7.0)歲(31～59歲)，兩組年齡和體質(zhì)量比較無差異(P>0.05)。

1.3 檢測(cè)方法

均采用手術(shù)治療，采集手術(shù)病灶區(qū)組織并使用石蠟包埋做連續(xù)切片，采用鏈霉親和素-生物素酶復(fù)合物法使用免疫組化法檢測(cè)病灶組織中MAP2K4、PKG1及ZlC1水平，所用試劑盒均購自聯(lián)科生物科技有限公司，抗體購自南京福麥斯生物科技有限公司。隨訪5年，記錄患者生存情況。

1.4 結(jié)果判定

MAP2K4、PKG1及ZlC1蛋白檢測(cè)陽性表現(xiàn)為細(xì)胞胞漿或細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)總黃色顆粒，使用400倍高倍鏡觀察閱片，依照陽性細(xì)胞數(shù)與著色強(qiáng)度乘積記為總得分。無陽性細(xì)胞記0分，陽性細(xì)胞數(shù)<10%記1分、10%～50%記2分、51%～75%記3分，>75%記4分；著色強(qiáng)度評(píng)估，未著色記0分，著色呈淡黃色記1分、呈棕黃色記2分、呈棕褐色記3分。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 組織中MAP2K3、PKG1、ZIC1表達(dá)

MAP2K3、PKG1及ZIC1表達(dá)評(píng)分觀察組高于對(duì)照組(P<0.05)，觀察組中死亡患者各水平均高于存活者(P<0.05)，見表1和圖1(見封三)。

表1 兩組組織中MAP2K3、PKG1及ZIC1水平表達(dá)(分，

2.2 MAP2K3、PKG1及ZIC1表達(dá)與患者生存期

觀察組中，MAP2K3、PKG1及ZIC1低表達(dá)患者生存期高于高表達(dá)組(P<0.05)，見圖2。

圖2 不同MAP2K3、PKG1及ZIC1表達(dá)水平患者生存期(A：MAP2K3 B：PKG1 C：ZIC1)

2.3 MAP2K3、PKG1及ZIC1水平與預(yù)后相關(guān)性

MAP2K3、PKG1及ZIC1是影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后的獨(dú)立影響因素(P<0.05)，見表2。

表2 MAP2K3、PKG1及ZIC1水平與預(yù)后相關(guān)性

2.4 各指標(biāo)預(yù)測(cè)患者預(yù)后價(jià)值

MAP2K3、PKG1及ZIC1預(yù)測(cè)患者預(yù)后的敏感度(87.2%、84.6%、89.7%)及特異度(86.3%、89.0%、90.4%)均>80.0%，且ROC曲線下面積AUC(0.919、0.930、0.935)均>0.9。

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是臨床較常見的女性惡性腫瘤，屬子宮內(nèi)膜上皮性惡性腫瘤，且呈年輕化趨勢(shì)[7]。有研究結(jié)果顯示，子宮內(nèi)膜癌的臨床發(fā)病率約占全部女性生殖道惡性腫瘤的20%，我國每年子宮內(nèi)膜癌的臨床新發(fā)病例高達(dá)5萬以上，且每年死亡1.8萬人以上，對(duì)女性生命健康安全造成嚴(yán)重威脅[8]。一般情況下早期子宮內(nèi)膜癌患者多無明顯癥狀，確診后多已發(fā)展晚期，如何有效評(píng)估患者預(yù)后質(zhì)量具有十分重要意義[9]。

MAP2K4基因在人上皮性腫瘤中呈明顯高表達(dá)狀態(tài)，且在乳腺癌及卵巢癌中高表達(dá)狀態(tài)最為明顯。有研究指出，MAP2K4蛋白表達(dá)對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展有一定促進(jìn)作用，如乳腺癌、皮膚癌、胃癌、前列腺癌、喉鱗狀細(xì)胞癌、胰腺癌等[10]。PGK1與多種腫瘤的組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān)關(guān)系，且在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起十分重要作用[11]。高活躍的糖酵解代謝與惡性腫瘤的生存、增殖及侵襲能力密切相關(guān)，而PGK1是調(diào)節(jié)有氧糖酵解的重要蛋白分子，因而評(píng)估病灶組織中PGK1水平可有效評(píng)估病情[12]。ZIC1蛋白在人體生長(zhǎng)發(fā)育過程中起到十分重要作用。有研究指出，包括間葉組織腫瘤、成髓細(xì)胞瘤、子宮內(nèi)膜癌及胃腸腫瘤等發(fā)生發(fā)展過程中均與ZIC1密切相關(guān)，ZIC1蛋白表達(dá)異常與胃粘膜惡性腫瘤及肝細(xì)胞腫瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)[13]。

本組研究結(jié)果顯示，觀察組患者M(jìn)AP2K3、PKG1及ZIC1表達(dá)高于對(duì)照組，且死亡患者高于存活患者；均是影響子宮內(nèi)膜癌患者預(yù)后獨(dú)立影響因素，預(yù)測(cè)患者預(yù)后的敏感度及特異度均>80.0%，且AUC均>0.9。提示，MAP2K3、PKG1及ZIC1異常高表達(dá)可提示患者預(yù)后不佳。分析認(rèn)為，腫瘤細(xì)胞由于增殖迅速常導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞處于局部缺氧缺血環(huán)境，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞調(diào)控細(xì)胞內(nèi)激酶及糖酵解等水平異常增高，進(jìn)而導(dǎo)致MAP2K3、PKG1及ZIC1調(diào)控蛋白表達(dá)水平異常；隨著患者病情加重導(dǎo)致病灶組織內(nèi)MAP2K3、PKG1及ZIC1異常狀態(tài)更加明顯，因而MAP2K3、PKG1及ZIC1有望作為評(píng)估患者預(yù)后質(zhì)量的重要指標(biāo)。

綜上所述，子宮內(nèi)膜癌患者病灶組織中MAP2K4、PKG1及ZlC1呈現(xiàn)異常高表達(dá)狀態(tài)，可能作為評(píng)估患者病情預(yù)后指標(biāo)。但本研究為單中心小樣本分析，仍有待后續(xù)深入分析驗(yàn)證此結(jié)論。