艾滋病檢驗中HIV 抗體ELISA 法篩查研究

劉曉云

（內(nèi)蒙古鄂爾多斯市疾病預防控制中心，內(nèi)蒙古 鄂爾多斯 017000）

0 引言

獲得性免疫缺陷綜合征簡稱艾滋?。ˋDIS），引發(fā)艾滋病的主要原因是艾滋病毒也就是人類免疫缺陷病毒（HIV）引起的，同時艾滋病是一種具備較強惡性傳染的疾病，并且有著較高的死亡率。由于受到HIV病毒的侵蝕，造成人體的免疫功能減退，進而各種類型的疾病也隨之爆發(fā)，且并發(fā)癥的發(fā)病率也大幅度上升，嚴重威脅人們的身體狀況。在世界上檢測HIV抗體的方法有很多，其中最主要的檢測方法就是酶聯(lián)免疫吸附試驗簡稱ELISA、明膠顆粒凝集實驗簡稱PA、免疫熒光實驗簡稱IFA、免疫印跡實驗簡稱WB法以及放射免疫沉淀實驗簡稱RIP和斑點免疫膠體金實驗。

1 資料及方法

1.1 一般資料。本次研究選擇我院441名體檢人員進行ADIS檢驗，其中男231名，女210名。另外于2017年4月至2018年4月所采集的標本為220份，2018年5月至2019年4月所采集的標準為221份。

1.2 方法。檢測儀器：本次研究中，艾滋病患者篩查所選用的檢測儀器有：自動洗板機，型號為WD-3009型；酶標儀，型號為WD-9417B型；水浴恒溫箱以及可調(diào)式移液器等等。檢測試劑：在本次研究中選用的主要檢測試劑為人類免疫缺陷病毒診斷試劑盒，所選用的試劑均經(jīng)過國家藥監(jiān)局檢測，且檢測合格，并且在有效期的時間范圍內(nèi)。另外，嚴格按照試劑盒的相關說明來嚴格使用并操作。檢測方法：在對標本檢測過程中，所涉及的全部操作都是在嚴格執(zhí)行相關標準的基礎上進行的，確保操作過程的規(guī)范和標準。同時詳細閱讀試劑的說明書，規(guī)范和標準的使用試劑。標本的檢測過程在根據(jù)試劑說明書以及檢測的相關規(guī)定的基礎上進行嚴格操作，并且在檢測過程中及時規(guī)避交叉污染狀況的發(fā)生。經(jīng)過多次檢查，正確處理檢查檢查結(jié)果，并對檢測過程的質(zhì)量進行評價和測定，在此基礎上創(chuàng)建質(zhì)控圖。采用ELISA法對體檢者的標本進行初次篩查，同時將呈陽性的標本進行是實驗室檢查，再次確認檢測的結(jié)果，并且對于檢測的結(jié)果做好保密工作。

2 結(jié)果

由表1可以看出，通過對441份標本進行ELISA法初次篩查發(fā)現(xiàn)，初次篩查呈陽性的有11例，占比2.4%，同時對這11例標本進行實驗室確認，其中確定陽性的有5例，占比45%，不確定的有1份，占比10%，確定陰性的為5例，占比45%。

表1 2017年4月-2019年4月艾滋病檢測標本與篩檢結(jié)果統(tǒng)計[n（%）]

3 討論

人體免疫缺陷病毒是一種對人們的人體免疫系統(tǒng)造成極大破壞力的病毒，并且也是引起艾滋病的主要原因。倘若HIV病毒侵入人們的機體，并且在體內(nèi)大量繁殖就會引起病變，破壞甚至扼殺人體內(nèi)大量的CD4細胞，CD4細胞是人體免疫系統(tǒng)中最為關鍵的一種的免疫細胞，同時也是HIV病毒侵襲的主要對象。CD4細胞屬于一種特殊的白細胞，在人體免疫系統(tǒng)中起著指揮的重要作用，消滅和控制各種病毒的感染。倘若體內(nèi)的CD4細胞遭到HIV病毒的大肆破壞，就會造成人體免疫功能失調(diào)甚至減退，嚴重影響人們的身體健康和生命安全[1]。鑒于艾滋病的潛伏期長達8-9年，在沒有發(fā)病之前是沒有任何臨床表現(xiàn)和癥狀的。但是患者潛在艾滋病的話在和其他人接觸的時候可以通過性接觸、血液以及母嬰的方式傳播，進而威脅他人的生命?，F(xiàn)階段，艾滋病的不斷滋長已經(jīng)成為國際上最為嚴重的公共衛(wèi)生問題，艾滋病已經(jīng)成為疾病預防控制中心關注的焦點。

酶聯(lián)免疫吸附試驗簡稱ELISA法，主要就是將抗體和酶復合物融合起來，通過顯色的結(jié)果進行檢驗。ELISA法屬于一種特異性基因檢測技術，并且可以快速檢測出人體內(nèi)的HIV病毒，和其他檢測方法相比較ELISA法的準確性更高。并且ELISA法在檢測HIV抗體的時候操作起來非常的簡單快捷，并且成本費用不高，另外這種篩查方法具有較高的靈敏度和特異性[2]。

盡管ELISA法和其他檢測方法相比有很大的優(yōu)勢，但是在操作過程中仍然受到一些因素的影響。在對標本檢測過程中，由于影響結(jié)果的不確定因素有很多，在初次篩查的時候經(jīng)常出現(xiàn)假陽性的狀況，不僅僅要將初次篩查為陽性的患者標本進行實驗室確認，同時還應該對檢測結(jié)果造成影響的因素進行分析，以便提出相應的解決策略，規(guī)避這些因素對檢測結(jié)果造成的影響。在對標本檢測過程中，檢測員未根據(jù)相關規(guī)定及操作規(guī)范進行檢測、試劑和標本的質(zhì)量不合格、加樣控制不合理，洗板不通暢或者檢測過程中洗板等待時間過長以及顯色時間等都會對檢測的結(jié)果產(chǎn)生影響[3]。因此，醫(yī)院在檢測之前第一，對參與標本收集、保存、操作的工作人間定期進行培訓，讓檢測人員深刻意識到自己工作的重要性以及檢測結(jié)果對患者產(chǎn)生的關鍵影響，嚴格執(zhí)行操作規(guī)范和相關章程對標本進行檢測，從標本的收集到最后的檢測整個過程都應該和《全國艾滋病檢測技術規(guī)范》的要求相吻合，盡最大的可能確保檢測結(jié)果的準確性。第二，試劑的質(zhì)量會對檢測的過程和結(jié)果產(chǎn)生直接的影響，是以在檢測之前，應該嚴格甄選試劑，并且所選擇的試劑必須是通過國家藥監(jiān)局檢測的合格產(chǎn)品。第三，確保標本的質(zhì)量，在檢測之間，將等待檢測的標本在自然狀態(tài)下存放1-2個小時，在標本凝固并達到檢測標準之后，進行離心處理，倘若標本為血漿，需要加用一定比例的抗凝劑。假如收集的標本短時間內(nèi)不會檢測，將標本放置在醫(yī)用冰箱當中，將冰箱的溫度控制在2℃-8℃范圍內(nèi)，假設需要儲存，溫度應該保持在-20℃左右。第四，在加樣過程中使用可調(diào)式移液器在短時間內(nèi)完成加樣，倘若加樣量比較多，可以分幾次進行操作，每次加樣都應該間隔一定的時間，避免影響加樣的結(jié)果。第五，在檢測之前首先對洗板機進行檢查，檢測洗板機的管路是否存在堵塞問題。第六，在檢測過程中，要想將標本可以充分的顯色，應該在室溫37℃下半小時之后結(jié)束觀察，倘若時間過長就會影響質(zhì)控圖。是以，在利用ELISA法對HIV抗體進行檢測的時候，應該對實驗室實施科學化管的管理，根據(jù)相關規(guī)定和標準嚴格進行操作，加強對檢測人員的培訓，提高他們專業(yè)水平，確保標本的質(zhì)量，為臨床判斷提供可靠、精準的數(shù)據(jù)信息，另外，選用具備較高靈敏度以及特異性的試劑，根據(jù)試劑說明書以及操作章程嚴格檢測，繼而保障檢測結(jié)果的精確性和可靠性。

本次研究對我院近兩年ADIS體檢患者中的441份標本利用ELISA法對體檢人員的HIV病毒進行初次篩選，并對篩查的記過進行確定和進一步分析。通過研究表示，初次篩查呈陽性的占比2.4%，同時對這些呈陽性標本進行實驗室確認，其中確定陽性的占比45%，不確定占比10%，確定陰性的占比45%。

綜上所述，利用ELISA法來篩查艾滋病患者體內(nèi)的HIV抗體有著良好的成效，但是要想確保此方法檢測結(jié)果的準確性，工作人員嚴格按照相關規(guī)定進行檢測，確保試劑以及標本的質(zhì)量，減少假陽性狀況的發(fā)生。