金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在肺炎支原體檢測(cè)中的作用分析

何倚力 林偉尚 陳尚琳

廣州市番禺區(qū)第五人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東廣州 511495

臨床研究表明，肺炎支原體肺炎具有病程遷延、病情嚴(yán)重、并發(fā)癥多等特點(diǎn)，可并發(fā)關(guān)節(jié)炎、腦膜炎、脊髓炎等，增加患者不良預(yù)后的風(fēng)險(xiǎn)[1]。因此，對(duì)肺炎支原體肺炎患者應(yīng)及早診斷和治療，以免病情加重、出現(xiàn)各種嚴(yán)重并發(fā)癥等。目前，肺炎支原體肺炎的臨床診斷檢測(cè)方法較多，其中以金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)為主[2]，但二者在肺炎病原體感染早期診斷中準(zhǔn)確性如何？各自有何優(yōu)勢(shì)？有待驗(yàn)證。本研究對(duì)我院2018年6～9月診治的91例疑似肺炎支原體感染患者的金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回顧性分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6～9月我院就診疑似肺炎支原體感染患者91例，男50例，女41例；年齡19～82歲，平均（52.7±13.4）歲；經(jīng)呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)分離出肺炎支原體者79例。（1）納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者均存在咽痛、胸痛、咳痰、氣喘、氣促、發(fā)熱等呼吸系統(tǒng)臨床癥狀，肺部體征以胸片炎癥為主，X線片下可見云霧狀大片陰影，白細(xì)胞計(jì)數(shù)正?；蛘咴龈?；②患者臨床資料以及實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)等均完整無(wú)缺；③患者在檢測(cè)過(guò)程中主動(dòng)配合；（2）排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并老年癡呆等精神障礙者；②合并其他呼吸系統(tǒng)疾病患者；③檢測(cè)前服用過(guò)影響檢測(cè)結(jié)果的藥物者。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過(guò)并監(jiān)督進(jìn)行。

1.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

肺炎支原體肺炎診斷標(biāo)準(zhǔn)[3-5]：（1）老年人或者青少年在發(fā)病季節(jié)出現(xiàn)頑固刺激性干咳，發(fā)熱體征不甚明顯，常規(guī)使用頭孢菌素、青霉素等β-內(nèi)酰胺類抗生素治療無(wú)效，考慮為肺炎支原體肺炎；（2）自限性疾病，多數(shù)不經(jīng)治療即可自愈，臨床癥狀比較輕微，影像學(xué)表現(xiàn)較重；（3）血清肺炎支原體抗體檢查有助于進(jìn)一步診斷；（4）呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)分離出肺炎支原體為臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)，然而檢出率較低，技術(shù)條件較高，耗時(shí)長(zhǎng)；（5）應(yīng)與肺炎球菌肺炎、病毒性肺炎、真菌性肺炎等并疾病鑒別。

1.3 方法

患者入院后均采集其血清標(biāo)本，所用儀器和試劑如下：深圳雷杜公司提供的Rayto RT-6100 酶標(biāo)儀；珠海麗珠公司提供的肺炎支原體-IgM 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)試劑；州雅華生物技術(shù)有限公司提供的肺炎支原體-IgM 抗體金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)檢測(cè)試劑。同時(shí)應(yīng)用金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)方法進(jìn)行肺炎支原體-IgM抗體血清平行檢測(cè)，嚴(yán)格根據(jù)試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行檢測(cè)。

1.4 觀察指標(biāo)

以呼吸道標(biāo)本培養(yǎng)分離出肺炎支原體為臨床診斷金標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)肺炎支原體-IgM 抗體檢測(cè)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)兩種檢查方法的診斷準(zhǔn)確度、敏感度、特異度。其中，準(zhǔn)確度、特異度和敏感度的計(jì)算公式為：準(zhǔn)確度=（真陽(yáng)性+真陰性）例數(shù)/總例數(shù)×100%；特異度=真陰性/（真陰性+假陽(yáng)性）×100%；敏感度=真陽(yáng)性/（真陽(yáng)性+假陰性）×100%。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析。無(wú)序分類資料的樣本容量n＞40，理論頻數(shù)T＞5，采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩種檢查方法對(duì)肺炎支原體感染的診斷準(zhǔn)確度、敏感度、特異度比較如下。

金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度為92.31%（84/91），敏 感 度 為 94.94%（75/79），特 異 度 為75.00%（9/12）；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度為 94.51%（86/91），敏 感 度 為 98.73%（78/79），特異度為66.67%（8/12）；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度、敏感度均高于金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)（χ2=0.357，P=0.550；χ2=1.859，P=0.173），而診斷特異度低于金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)（χ2=0.202，P=0.653），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組檢查方法對(duì)本組肺炎支原體肺炎患者的診斷準(zhǔn)確度、敏感度、特異度比較

3 討論

肺炎支原體是一種可引起人類原發(fā)性非典型肺炎的病原體，在非細(xì)菌性肺炎中約占50%[6]。肺炎支原體感染者、攜帶者是主要傳染源，在潛伏期就具備傳染性，在患病初期感染性可進(jìn)一步加強(qiáng)，可通過(guò)感染者鼻咽喉、氣管分泌物排出并傳播[7]。而肺炎支原體可通過(guò)直接接觸或者經(jīng)口、鼻咽喉分泌物、痰液飛沫等傳播，人群普遍易感，尤其是免疫低下者、兒童等，更容易感染[6]。據(jù)報(bào)道，肺炎支原體肺炎在美國(guó)每年發(fā)病率為1/1000，大約有兩百萬(wàn)人感染，社區(qū)獲得性肺炎住院患者中大約有20%系肺炎支原體感染所致[8-9]。另有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，肺炎支原體肺炎和人體某些組織存在部分相同抗原，感染后可形成自身抗體，引起全身多器官損傷，誘發(fā)血液系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重時(shí)可危及生命安全[10-11]。因此，應(yīng)對(duì)肺炎支原體肺炎予以高度重視，早期診斷，及時(shí)進(jìn)行合理治療，才能夠更加有效地控制病情，避免出現(xiàn)不良預(yù)后。

但由于肺炎支原體肺炎的臨床表現(xiàn)具有多樣化特點(diǎn)，極難同病原微生物所致疾病互相區(qū)別，因而有必要探索敏感的早期診斷方法。據(jù)既往研究報(bào)道發(fā)現(xiàn)，肺炎支原體感染的臨床癥狀存在一周左右，血清內(nèi)特異性IgM抗體可被檢測(cè)出，在10～30d內(nèi)達(dá)到高峰期，并持續(xù)12～16周消退[12-13]。因而，早期檢測(cè)肺炎支原體肺炎IgM抗體有一定診斷價(jià)值。本研究中對(duì)2018年6～9月診治的91例疑似肺炎支原體感染患者應(yīng)用金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)進(jìn)行了平行檢測(cè)，結(jié)果提示：金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度分別為92.31%、94.51%，可見兩種檢測(cè)方法的診斷準(zhǔn)確性均較高。其中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的診斷敏感度為98.73%，稍高于的金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)的94.94%，但比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，推測(cè)與納入樣本量較小有關(guān)。筆者根據(jù)長(zhǎng)期臨床實(shí)踐研究發(fā)現(xiàn)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)對(duì)肺炎支原體肺炎的診斷敏感度相對(duì)較高，但操作繁瑣，耗時(shí)久。相比之下，金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)的診斷準(zhǔn)確度可媲美酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，且操作簡(jiǎn)單、快捷，一般能一步完成，可適用于任意場(chǎng)所，保存試劑方面比較方便，適宜單人份檢測(cè)[14-16]。

綜上所述，金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)與酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)在肺炎支原體檢測(cè)中的診斷準(zhǔn)確度均較高，但金標(biāo)免疫層析試驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快，建議在單人份檢測(cè)中應(yīng)用。