氯化鉀緩釋片在不同介質(zhì)中溶出曲線的對(duì)比研究

王蓀璇，妙苗，王嫦鶴，劉雪峰，鄧穎鵬

作者單位：陜西省食品藥品監(jiān)督檢驗(yàn)研究院，陜西 西安710065

氯化鉀緩釋片的主成分為氯化鉀（KCl），屬于電解質(zhì)補(bǔ)充藥，主要用于治療各種原因引起的低鉀血癥，如進(jìn)食不足、嘔吐、嚴(yán)重腹瀉、應(yīng)用排鉀利尿藥、低鉀性家族周期性癱瘓、長(zhǎng)期應(yīng)用糖皮質(zhì)激素和補(bǔ)充高滲葡萄糖等［1］；還用于預(yù)防低鉀血癥，如病人存在失鉀的情況，尤其是如果低鉀血癥對(duì)病人危害較大時(shí)（如洋地黃化的病人），需預(yù)防補(bǔ)充鉀鹽［2］。

溶出度試驗(yàn)在評(píng)價(jià)口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)和仿制藥研發(fā)中越來(lái)越發(fā)揮舉足輕重的作用，在多種溶出介質(zhì)中進(jìn)行藥品溶出曲線的測(cè)定，是評(píng)價(jià)口服固體制劑內(nèi)在質(zhì)量的一種重要手段。本研究自2018年6—9月選擇4種不同溶出介質(zhì)測(cè)定不同批次樣品的累積溶出量，繪制體外多條溶出曲線，從而模擬藥物的體內(nèi)釋放行為。國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布的仿制藥參比制劑目錄（第八批）通告中氯化鉀緩釋片參比制劑的規(guī)格分別為600毫克∕片和750毫克∕片，國(guó)內(nèi)仿制藥的規(guī)格為500毫克∕片，因規(guī)格不同，故本研究中未使用參比制劑。

溶出曲線相似性的比較，多采用非模型依賴法中的相似因子（?2）法，計(jì)算?2因子時(shí)，采用互相之間作為參比的計(jì)算方法，通過(guò)?2因子計(jì)算結(jié)果可進(jìn)一步分析出三批樣品之間工藝與釋放情況的差異。

1 儀器與試藥

1.1儀器SOTAX AT.7X溶出儀；METTLER XPE105電子分析天平；METTLER T5電位滴定儀；METTLER 411-SG電極；Thermo ICE 3500原子吸收分光光度計(jì)；天大天發(fā)ZKT-18F真空脫氣儀。

1.2試劑與藥品氯化鉀對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，生產(chǎn)批號(hào)100708-200401）；氯化鉀緩釋片（某企業(yè)提供）3批（生產(chǎn)批號(hào)：S01、S02、S03）；鹽酸（優(yōu)級(jí)純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F(xiàn)＝1.000）；鉻酸鉀（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；磷酸（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；氫氧化鉀（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；磷酸二氫鉀（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；氯化鈉（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；水為自制脫氣純化水。

2 溶出條件的選擇

根據(jù)《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》以及日本橙皮書(shū)相關(guān)內(nèi)容，采用《中國(guó)藥典》2015年版四部通則0931第二法裝置，轉(zhuǎn)速為50r∕min，分別以水、pH 4.5緩沖液、pH 6.8緩沖液和pH 1.2鹽酸溶液為溶出介質(zhì)，介質(zhì)體積為900 mL，取樣時(shí)間為1、2、4、6、8、10 h，取樣體積為10 mL并即時(shí)補(bǔ)充相同體積相同溫度的相同溶出介質(zhì)。

3 累積溶出量測(cè)定

3.1電位滴定法［6］

3.1.1 供試品溶液的制備 取3批樣品各12片，分別在3種溶出介質(zhì)（pH 4.5緩沖液、pH 6.8緩沖液和水）中試驗(yàn)，按“2”項(xiàng)下的溶出條件取不同時(shí)間點(diǎn)的溶出液，用0.45μm濾膜濾過(guò)，分別精密量取續(xù)濾液各5mL，加純化水適量，沒(méi)過(guò)電極，再加入鉻酸鉀指示液4滴。

3.1.2 空白溶液的制備 精密量取溶出介質(zhì)5 mL，按“3.1.1”項(xiàng)下的方法同法制備。

3.1.3 測(cè)定方法 分別取“3.1.1”、“3.1.2”項(xiàng)下供試品溶液、空白溶液，用硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F(xiàn)＝1.000）滴定，使用銀電極滴定至電位突躍點(diǎn)，每1 mL硝酸銀滴定液（0.01 mol∕L，F(xiàn)＝1.000）相當(dāng)于0.745 5 mg的KCl。同步測(cè)定空白，計(jì)算每杯在不同取樣時(shí)間點(diǎn)的累積溶出量。

3.2火焰原子吸收法

3.2.1 供試品溶液的制備 取三批樣品各12片，分別在溶出介質(zhì)（pH 1.2鹽酸溶液）中試驗(yàn)，按“2”項(xiàng)下的溶出條件取不同時(shí)間點(diǎn)的溶出液，用0.45μm濾膜濾過(guò)，分別精密量取1 h時(shí)溶出液600μL；2、4 h時(shí)溶出液各350 μL；6、8、10 h時(shí)溶出液各250μL，分別置50 mL量瓶中，精密加入20%氯化鈉溶液1 mL，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.2 系列對(duì)照品溶液的制備 取氯化鉀對(duì)照品約0.1 g，精密稱定，置100 mL量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL，置100 mL量瓶中，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備液2、3、4、5、6 mL，分別置100 mL量瓶中，各精密加入20%氯化鈉溶液2 mL，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.3 空白溶液 精密量取20%氯化鈉溶液2 mL，置100 mL量瓶中，用鹽酸溶液（2.7→100）稀釋至刻度，搖勻。

3.2.4 測(cè)定方法 分別取“3.2.1”、“3.2.2”、“3.2.3”項(xiàng)下供試品溶液、系列對(duì)照品溶液、空白溶液，采用火焰原子吸收法，計(jì)算每片在不同取樣時(shí)間點(diǎn)的累積溶出量。

4 結(jié)果

4.1累積溶出量相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）分別計(jì)算三批樣品在4種溶出介質(zhì)中各取樣時(shí)間點(diǎn)的12片累積溶出量間的RSD，見(jiàn)表1。

表1 三批樣品在4種溶出介質(zhì)中平均累積溶出量結(jié)果

圖1 4種不同介質(zhì)溶出曲線：A為水中平均累積溶出曲線，B為pH 4.5磷酸鹽緩沖液中平均累積溶出曲線，C為pH 6.8磷酸鹽緩沖液中平均累積溶出曲線，D為pH 1.2鹽酸溶液中平均累積溶出曲線

4.2繪制溶出曲線取三批樣品各12片，按“2”項(xiàng)下的溶出條件取不同時(shí)間點(diǎn)的溶出液，以“3.1”、“3.2”項(xiàng)下的方法計(jì)算累積溶出量，分別以4種溶出介質(zhì)中的取樣時(shí)間為橫坐標(biāo)（X），每批12片的平均累積溶出量為縱坐標(biāo)（Y），繪制溶出曲線，見(jiàn)圖1。

4.3 ?2因子的計(jì)算根據(jù)《普通口服固體制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》，?2因子計(jì)算公式如下：

式中，n為取樣時(shí)間點(diǎn)個(gè)數(shù)，Rt為t時(shí)間參比樣品平均溶出量，Tt為t時(shí)間受試樣品平均溶出量［10］。

4.3.1 相同介質(zhì)不同批次間的?2因子 取三批樣品各12片在同一種溶出介質(zhì)中不同取樣時(shí)間點(diǎn)的平均累積溶出量，計(jì)算互相之間的?2因子，見(jiàn)表2。

表2 相同介質(zhì)不同批次樣品間?2因子計(jì)算結(jié)果

4.3.2 相同批次不同介質(zhì)間的?2因子 取同一批次樣品12片在4種溶出介質(zhì)，不同取樣時(shí)間點(diǎn)的平均累積溶出量，計(jì)算互相之間的?2因子，見(jiàn)表3。

表3 同一批次樣品不同介質(zhì)間?2因子計(jì)算結(jié)果

4.4結(jié)論根據(jù)國(guó)家局發(fā)布的《仿制藥質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)—普通固體口服制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（草案）》可知，“3.1.3”項(xiàng)下除0時(shí)外，選取的第一個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不得過(guò)20%，自第二個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)至最后一個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)溶出結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不得過(guò)10%。由表1結(jié)果可得，三批樣品第一個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)各12片間的累積溶出量的RSD值最大為7.9%，最小為1.9%，均小于20%；自第二個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)至最后一個(gè)取樣時(shí)間點(diǎn)累積溶出量的RSD值最大為5.0%，最小為1.1%，均小于10%。據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明樣品均勻，工藝比較成熟。

根據(jù)國(guó)家局發(fā)布的《仿制藥質(zhì)量一致性評(píng)價(jià)——普通固體口服制劑溶出度試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則（草案）》可知，當(dāng)兩條溶出曲線?2因子數(shù)值不小于50時(shí)，可認(rèn)為兩條溶出曲線具有相似性。由表2結(jié)果可得，相同介質(zhì)不同批次樣品間的?2因子最大值為97.78，最小值為64.41，均大于50；由表3結(jié)果可得，同一批次樣品不同介質(zhì)間的?2因子最大值為95.40，最小值為64.86，均大于50。實(shí)驗(yàn)結(jié)果所得的12條溶出曲線的?2因子均大于50，可認(rèn)為氯化鉀緩釋片溶出曲線均相似。

5 討論

在體外溶出實(shí)驗(yàn)中，溶出介質(zhì)中的氣體會(huì)影響藥品的崩解、溶出和擴(kuò)散，因此本研究中采用了脫氣純化水。每次取出溶出液后都及時(shí)補(bǔ)充了相同溫度相同體積的溶出介質(zhì)［3-5］。

采用電位滴定法測(cè)定氯化鉀溶出量時(shí)，空白溶液會(huì)消耗一定量的滴定液，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響較大，因此在每次測(cè)定樣品溶出量時(shí)同步測(cè)定空白溶液，并扣除空白溶液消耗的滴定液體積。

由表1各批次各時(shí)間點(diǎn)累積溶出量RSD計(jì)算結(jié)果，可以看出每片釋放行為基本一致；由表3?2因子計(jì)算結(jié)果，可看出該企業(yè)氯化鉀緩釋片生產(chǎn)工藝穩(wěn)定，從而進(jìn)一步證明該企業(yè)生產(chǎn)的氯化鉀緩釋片工藝成熟；由表2中?2因子計(jì)算結(jié)果，可看出溶出介質(zhì)對(duì)氯化鉀的溶出影響不大。綜上所述，該企業(yè)生產(chǎn)的氯化鉀緩釋片的體外釋放行為基本不存在問(wèn)題，體內(nèi)生物利用度還有待研究［7-11］。