含銀離子寵物香波的抑菌實驗探討

陳榆

（福建晶華生物科技有限公司，福建 福州 350105）

1 前言

隨著寵物進(jìn)入千家萬戶，寵物香波的用量也日益增加，寵物由于自身的厚實毛發(fā)及生活習(xí)慣很容易滋生各種細(xì)菌，有時還會攜帶病毒，這些細(xì)菌和病毒不僅會危害寵物的健康生長，甚至還會引起人畜疾病交叉?zhèn)鞑ズ透腥?。為了達(dá)到消毒的目的，傳統(tǒng)的做法是采用寵物殺蟲劑對寵物的毛皮進(jìn)行噴曬或清理，但這樣去除效果不佳而且還會損傷寵物的皮毛。基于寵物毛皮細(xì)菌的特點，新型功能型的寵物香波在傳統(tǒng)洗浴清潔作用的基礎(chǔ)上，把抑菌劑融入浴液之中，達(dá)到抑菌與洗滌的雙重效果。本文依據(jù)銀離子的抑菌作用，就加入銀離子抑菌劑寵物香波的抑菌效果進(jìn)行了實驗探討。

2 實驗

2.1 實驗材料

寵物香波（福建省輕工業(yè)研究所研制，福建晶華生物科技有限公司生產(chǎn)）；

銀離子抑菌劑：淺黃色液體，銀離子含量1 g/kg，生產(chǎn)用量0.2%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），廣東迪美生物技術(shù)有限公司提供。

2.2 實驗設(shè)備

超凈工作臺、恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、高壓蒸汽滅菌鍋、培養(yǎng)皿、移液槍、試管等。

2.3 試劑和菌種

2.3.1 試劑

0.03 mol/L 磷酸鹽緩沖液（PBS）；營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；沙氏瓊脂培養(yǎng)基。

2.3.2 菌種

大腸埃希氏菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC6538、白色念珠菌ATCC10231：廈門大學(xué)生命與科學(xué)學(xué)院環(huán)境與應(yīng)用微生物研究所提供。

2.4 實驗步驟

2.4.1 用PBS液將大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌各標(biāo)準(zhǔn)菌分別做適當(dāng)稀釋作為實驗菌，要求濃度：0.1 mL滴于5 mL對照樣液（PBS）內(nèi)，回收菌數(shù)在1×104～9×104CFU/mL。

2.4.2 將寵物香波取出5 mL 12支分別編號放入滅菌試管中(20±1)℃恒溫5 min；

2.4.3 吸取各實驗菌種0.1 mL加入到5 mL樣品的已編號試管中，迅速混勻，分別按5、10、15、20 min時間作用，并立即計時，時間到各取實驗菌種與樣品的混合液0.5 mL加入到4.5 mL經(jīng)滅菌的PBS試管中，充分混勻。

2.4.4 放置10 min后，分別吸取液1 mL置于滅菌平皿內(nèi)，每個樣液接種2個皿，分別用恒溫40～45 ℃的營養(yǎng)瓊脂（大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌）、沙氏瓊脂培養(yǎng)基（白色念珠菌）15 mL做培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)動平皿使其充分均勻，瓊脂凝固后翻轉(zhuǎn)平皿，在(35±2)℃培養(yǎng)48 h（大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌）和72 h(白色念珠菌)，做活菌菌落計數(shù)。

2.4.5 每組以PBS代替實驗樣品，按以上步驟操作作為空白對照。

2.4.6 實驗重復(fù)3次，求其平均值算出抑菌率(%)。

2.4.7 計算公式

其中：

Ⅰ——對照組平均菌落數(shù)，CFU／mL

Ⅱ——實驗組平均菌落數(shù)，CFU／mL

3 結(jié)果分析與討論

3.1 結(jié)果分析

抑菌效果評價：抑菌率≥50%有抑菌作用；抑菌率≥90%有較強(qiáng)抑菌作用。

3.1.1 寵物香波對大腸埃希氏菌在不同時間的抑菌率見表1。

表1 銀離子對大腸埃希氏菌的抑菌實驗效果

3.1.2 寵物香波對金黃色葡萄球菌在不同時間的抑菌率見表2。

表2 銀離子對金黃色葡萄球菌的抑菌實驗效果

3.1.3 寵物香波對白色念珠菌在不同時間的抑菌率見表3。

表3 銀離子對白色念珠菌的抑菌實驗效果

3.1.4 該寵物香波與大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌在混合作用5 min后都顯示出一定的抑菌效果，20 min后對3種實驗菌抑菌率均＞99%，其中不同時間抑菌率各不相同，抑菌率,隨著時間的延長而提高，趨勢圖如圖1曲線所示，作用時間（min）與抑菌率（%）成正相關(guān)，可以看出對大腸埃希氏菌（1線）的抑菌過程比金黃色葡萄球菌(3線)和白色念珠菌(2線)較快起作用。

圖1 各實驗菌的抑菌率與時間的關(guān)系

3.2 討論

采用含銀離子抑菌劑的寵物香波對革蘭氏陰性代表菌——大腸埃希氏菌、革蘭氏陽性代表菌——金黃色葡萄球菌以及白色念珠菌進(jìn)行了抑菌實驗，結(jié)果表明該寵物香波在不同時間對這3種實驗菌均有較強(qiáng)的抑菌作用，并且抑菌作用在20 min時抑菌率均達(dá)99%以上，說明該寵物香波成分中銀離子具有良好的抑菌能力。

抑菌主要因為Ag＋帶著活性極強(qiáng)的正電荷陽離子，而細(xì)菌的細(xì)胞壁和細(xì)胞膜由磷脂質(zhì)雙分子膜組成，帶負(fù)電荷，依靠庫侖引力二者產(chǎn)生電吸附作用而牢固結(jié)合，導(dǎo)致銀離子穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。由于Ag＋與蛋白質(zhì)有較強(qiáng)的親和性，能與細(xì)菌蛋白質(zhì)上的硫氨基（-SH）發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，造成蛋白質(zhì)凝固形成不可逆的硫銀化合物，使細(xì)菌合成酶的活性遭到破壞，從而干擾細(xì)菌DNA、RNA的合成以及DNA模板轉(zhuǎn)錄mRNA等，使細(xì)菌喪失分裂增殖能力而死亡。另外Ag＋未飽和的配位能力與菌體表面的N或O作用，凝固核酸，使DNA分子上的化學(xué)鍵斷裂，破壞菌體表面活性結(jié)構(gòu)，從而使菌體因生理變化或活動受阻死亡。正是銀離子具有非常高的生物活性，一定濃度的銀離子就能對病菌、真菌等均有良好的抑制作用。

4 結(jié)論

銀離子的抑菌能力很強(qiáng)，但對人畜無任何傷害，是一種廣譜抑菌劑，有研究表明銀離子能消滅多種敏感細(xì)菌，并且少量的銀離子就有很好的抑菌效果，是目前廣泛使用的抑菌材料，具有廣譜殺菌、無毒無味、無刺激、無污染、無任何交叉藥物感染、不產(chǎn)生耐藥性的特點。在寵物香波中加入銀離子抑菌劑不但能夠高效去污、柔軟皮毛，而且能起抑制細(xì)菌的作用，達(dá)到抑菌與洗滌清潔的二合一，在市場上具有廣闊的應(yīng)用前景。