上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平及其臨床意義

李淼 朱繼紅

摘 要：目的：探討上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA水平與微轉(zhuǎn)移的相關(guān)性。方法：應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT- PCR），檢測(cè)180例上皮性卵巢癌患者外周血中CK19mRNA的表達(dá)。結(jié)果：180例患者外周血中查出CK19陽性表達(dá)106例，陽性率58.9%。CK19陽性檢出與腫瘤病理分化程度和病理類型無關(guān)，而與卵巢癌分期、淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān)。結(jié)論：CK19mRNA可作為檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血中微轉(zhuǎn)移的指標(biāo)，外周血中CK19 mRNA檢測(cè)有助于遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的上皮性卵巢癌病人的早期診斷。

關(guān)鍵詞：CK19mRNA; 上皮性卵巢癌; 臨床意義

中圖分類號(hào)：R730.43 ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? 文章編號(hào)：1006-3315（2020）8-199-001

卵巢癌是導(dǎo)致女性相關(guān)癌癥的死亡原因和最致命的婦科惡性腫瘤之一[1]。其中85%-90%是上皮性卵巢腫瘤。經(jīng)過手術(shù)和化療90%的卵巢癌患者能達(dá)到完全緩解（CR），但是最終70%的患者在2-5年內(nèi)復(fù)發(fā)。近年來，卵巢癌微轉(zhuǎn)移的研究引起了國內(nèi)外學(xué)者的重視，據(jù)報(bào)道[2]CK19mRNA作為靶基因產(chǎn)物檢測(cè)外周血循環(huán)中的癌細(xì)胞，具有高度敏感性。我院以CK19mRNA為標(biāo)志物，應(yīng)用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR），對(duì)180例卵巢癌患者外周血在術(shù)前或術(shù)后不同時(shí)間分別進(jìn)行檢測(cè)，探討外周血中CK19mRNA陽性表達(dá)與微轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系。為制定有效的綜合治療方案提供客觀依據(jù)。

1.資料與方法

1.1臨床資料

收集保定市第一中心醫(yī)院2017-2019年上皮性卵巢癌患者180例，年齡24～83歲，平均54.6歲。180例均行手術(shù)治療，其中，根治性手術(shù)120例，姑息性切除術(shù)46例，剖腹探查術(shù)14例。180例卵巢癌診斷均經(jīng)病理組織學(xué)證實(shí)為上皮性卵巢癌。癌細(xì)胞分化程度：高分化（G1）26例、中分化（G2）114例、低分化（G3）40例。手術(shù)分期按FIGO（1988）標(biāo)準(zhǔn)，其中Ⅰ期38例、Ⅱ期40例、Ⅲ期80例、Ⅳ期22例。只有原發(fā)灶90例（50%），有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移40例（22.2%）。術(shù)前、術(shù)后3天內(nèi)和術(shù)后早期短程化療結(jié)束后，分別從外周靜脈抽取5mL血液，肝素抗凝。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

參照GenBank，利用Primer Premier5.0引物設(shè)計(jì)軟件。引物由北京賽百盛公司合成。TRIzol試劑為nvitrogen公司， RNA溶液（RNase-free DNase）為Fermentas公司。CDNA合成試劑盒為Fermentas公司，TaqPCRMasterMix為天根公司。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

使用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，相關(guān)數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

180例患者

中，術(shù)前有106例患者外周血中CK19mRNA為陽性表達(dá)，陽性表達(dá)率為58.9%（106/180），CK19mRNA陽性表達(dá)率與病理分化程度及病理類型無關(guān)，與卵巢癌術(shù)后分期、局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移有關(guān)（見表1）

本組患者手術(shù)后3d天內(nèi)外周血CK19 mRNA陽性表達(dá)120例，較術(shù)前的106例多14例;術(shù)后早期短程化療結(jié)束后，CK19 mRNA陽性表達(dá)54例，52例轉(zhuǎn)陰。

3.討論

卵巢癌患者的遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及術(shù)后復(fù)發(fā)嚴(yán)重影響患者的預(yù)后，目前尚無有效的預(yù)防措施，加之目前的臨床監(jiān)測(cè)手段尚不能準(zhǔn)確檢出，以致復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移患者病情不易被察覺。目前普遍認(rèn)為，臨床轉(zhuǎn)移通常由微轉(zhuǎn)移發(fā)現(xiàn)而來，微轉(zhuǎn)移是影響無病生存率和轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)的高危險(xiǎn)因素。盡早發(fā)現(xiàn)微轉(zhuǎn)移灶，及時(shí)指導(dǎo)臨床采取治療措施，消滅血液中的癌細(xì)胞，可改善患者的預(yù)后。

本研究表明，卵巢癌患者有較高的外周血微轉(zhuǎn)移率（58.9%），即使是術(shù)后分期Ⅰ和Ⅱ期患者，微轉(zhuǎn)移率也高達(dá)31.6%，隨著疾病的進(jìn)展，外周血微轉(zhuǎn)移明顯增加。有淋巴轉(zhuǎn)移者，外周血微轉(zhuǎn)移也較多，說明卵巢癌在早期就可能累及全身，本組術(shù)后3天內(nèi)對(duì)患者外周血的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，術(shù)后較術(shù)前陽性檢測(cè)增多14例，表明手術(shù)增加了卵巢癌轉(zhuǎn)移的機(jī)會(huì)。因此，手術(shù)過程中應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無瘤技術(shù)，最大限度地減少因手術(shù)導(dǎo)致癌細(xì)胞醫(yī)源性播散的可能。術(shù)后早期短程化療結(jié)束后，49.1%（52/106）卵巢癌病人外周血中瘤細(xì)胞被消除，表明術(shù)后早期短程化療對(duì)控制卵巢癌微轉(zhuǎn)移具有一定的作用，有助于改善患者預(yù)后，因此，如果患者一般情況允許，化療應(yīng)盡早實(shí)施。

總之，通過CK19RT-PCR方法，檢測(cè)卵巢癌病人術(shù)時(shí)和術(shù)后水平，評(píng)估患者預(yù)后，為輔助治療提供依據(jù)，有較大臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)：

[1]Yildirim M，Demir CB，F(xiàn)iliz AA.Differentiation between benign and malignant ovarian masses in the preoperative period using neutrophil-to-lymphocyte and platelet-to-lymphocyte ratios[J]Mol Clin Oncol，2015，3（2）：317-321

[2]Oloomi M，Bouzari S，Mohagheghi MA，et ai.Molecular Markers in Peripheral Blood of Iranian Women with Breast Cancer[J]Cancer Microoenviron，2013，6（1）：109-116