洋蔥粗提取液對甘藍(lán)枯萎病菌抑制效果初探

魯韻 王一凡 田雪亮 李二峰

摘? ? 要：為了探究洋蔥粗提取液對甘藍(lán)枯萎病菌尖孢鐮孢菌的抑制效果，本研究分析了在不同濃度的洋蔥粗提取液下甘藍(lán)枯萎病菌的生長速率，產(chǎn)孢量，孢子萌發(fā)率的變化以及菌絲顯微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果表明：洋蔥粗提取液對甘藍(lán)枯萎病菌有顯著的抑制作用，當(dāng)固體培養(yǎng)基中洋蔥粗提取液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，病原菌生長抑制率為45%，當(dāng)液體培養(yǎng)基中洋蔥粗提取液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，對病原菌產(chǎn)孢量抑制率達(dá)到98.6%，當(dāng)濃度為0.4 g·mL-1時(shí)，對甘藍(lán)枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制率為92.0%;顯微觀察發(fā)現(xiàn)洋蔥提取液處理下，病原物菌絲結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，當(dāng)濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，菌絲裂解。由此可知，洋蔥粗提取液對甘藍(lán)枯萎病菌存在抑制效果。

關(guān)鍵詞：甘藍(lán)枯萎病;尖孢鐮孢菌;洋蔥粗提物;抑菌效果

Abstract： In order to investigate the inhibitory effect of crude tissue extracts from onion on Fusarium oxysporum f. sp. conglutinans （Foc）， the growth rate， spore yield， spore germination rate and hyphae structure of F. oxysporum f. sp. conglutinans were observed under different concentrations of crude tissue extracts from onion. The results showed that the crude extracts of onion had a significant inhibitory effect on Foc. When the concentration of the crude extract of onion in solid medium was 0.6 g·mL-1， the inhibition rate on growth was 45%. When the concentration of onion in liquid culture medium was 0.6 g·mL-1， the inhibition rate on the amount of conidiophores reached to 98.6%. And when the concentration of onion extract was 0.4 g·mL-1， the inhibition rate on spore germination was 92.0%. Meanwhile， the morphologial structure of mycelia were also changed.

Key words： cabbage fusarium; fusarium oxysporum; extract of onion; inhibitory effect

1899年，Smith在美國紐約發(fā)現(xiàn)甘藍(lán)枯萎病，目前甘藍(lán)枯萎病已經(jīng)在希臘、美國、日本等許多國家都有發(fā)生，危害程度越來越重[1-4]。自2001年北京延慶地區(qū)首次報(bào)道我國甘藍(lán)枯萎病發(fā)生開始，該病害在我國的發(fā)生趨勢為不斷蔓延并加重， 已經(jīng)嚴(yán)重影響了甘藍(lán)生產(chǎn)[5]。甘藍(lán)枯萎病是由尖孢鐮孢菌粘團(tuán)?；停‵usarium oxysporum f. sp. conglutinans）引起的土傳病害在苗期和成熟期均可發(fā)生，通常植株一側(cè)發(fā)病比較嚴(yán)重，由下往上逐漸蔓延，植株維管束組織變褐、阻塞并最終死亡[6-8]。

植物源殺菌劑是一類利用一些植物能夠誘導(dǎo)產(chǎn)生植物防衛(wèi)素或某些抗菌物質(zhì)，殺死或抑制病原菌的生長。近年來，是植物病害生物防治研究熱點(diǎn)之一，其具有低毒或無毒、高效、選擇性高、不產(chǎn)生抗藥和易降解等優(yōu)點(diǎn)。植物是活性化合物的天然寶庫，其可以產(chǎn)生超過40萬種的次生代謝產(chǎn)物，其中許多都具有抑菌生物活性，除了農(nóng)業(yè)外，在其他多項(xiàng)領(lǐng)域中有重要的應(yīng)用價(jià)值[9-10]。豐富的植物資源是開發(fā)植物源殺菌劑的理想來源，具有廣闊的應(yīng)用前景。目前，國內(nèi)外已有很多有關(guān)植物源殺菌劑的報(bào)道，如：葉倩等[11]用韭菜、蔥、姜和蒜的提取物來研究對香蕉枯萎病菌的抑制作用。魏立強(qiáng)等[12]研究表明旱芹粗提物對棉花幼苗的生長具有一定的保護(hù)作用。紀(jì)麗蓮等[13]研究發(fā)現(xiàn)野菊花、艾葉等8種植物對霉菌活性有抑制作用。楊蘇蘇等[14]用22種植物提取物對番茄多種病原菌進(jìn)行生物活性篩選，發(fā)現(xiàn)博落回、木醋酸、八角、丁香、細(xì)辛、石菖蒲對番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌、番茄黑斑病菌、番茄枯萎病菌的菌絲生長均有不同程度的抑制作用。何衍彪等[15]研究發(fā)現(xiàn)丁香對芒果炭疽病菌、香蕉枯萎病菌均具有較好的抑制作用。王強(qiáng)等[16]發(fā)現(xiàn)大蒜水提原液對多種病原菌，如膠孢炭疽菌、荔枝霜疫霉病菌、小核菌等菌絲的生長有較高的抑制作用，同時(shí)發(fā)現(xiàn)黃連水煮液對荔枝霜疫霉病菌菌絲的生長也有很強(qiáng)的抑制作用。Srinivasan等[17]對50種植物的水提物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)36種植物具有抑菌活性，其中還有12種植物具有廣譜抑菌作用。

就目前來說，針對枯萎病的防治方法有抗病育種、物理防治和化學(xué)防治等方法[18-20]。但抗病品種育種時(shí)間太長，成本高;由于土地條件有限，物理輪作方法實(shí)際實(shí)施起來不方便;化學(xué)防治目前仍是植物病害防治的主要措施，但化學(xué)藥劑所引的，如環(huán)境污染、農(nóng)藥殘留、生態(tài)破壞、病原菌抗藥性等問題日益嚴(yán)重[21-22]。所以尋找一種安全有效的防控方法迫在眉睫，其中對植物源殺菌劑的開發(fā)利用就是綠色防控的一個(gè)方向[23-25]。

但有關(guān)植物提取液對甘藍(lán)枯萎病的抑制作用研究較少，本試驗(yàn)把洋蔥粗提取液作為研究對象，初步探究其對甘藍(lán)枯萎病菌的抑制作用，試驗(yàn)結(jié)果可以為甘藍(lán)枯萎病的防治和植物源殺菌劑的開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。

3 討論與結(jié)論

國內(nèi)已有學(xué)者針對洋蔥對植物病原真菌的抑制作用進(jìn)行研究。有文獻(xiàn)報(bào)道，洋蔥粗提取液對蘋果輪紋病病原菌（Physalospora piricola Nose）有抑制作用，濃度為50 g·mL-1時(shí)，對孢子萌發(fā)和菌絲生長的抑制率達(dá)到99.0%和97.5%[28]。杜黎黎等[29]發(fā)現(xiàn)洋蔥粗提取液對西瓜枯萎病病原菌（F. oxysporum f.sp. niveum）菌絲生長、孢子萌發(fā)率、病原菌生物量及產(chǎn)孢量有一定的抑制作用，當(dāng)濃度為1 g·mL-1時(shí)，抑制作用最大，抑菌率為69.21%。本研究中，當(dāng)固體培養(yǎng)基中洋蔥粗提取液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，病原菌生長抑制率為45%，當(dāng)液體培養(yǎng)基中洋蔥粗提取液濃度為0.6 g·mL-1時(shí)，對病原菌產(chǎn)孢量抑制率達(dá)到98.6%，當(dāng)濃度為0.4 g·mL-1時(shí)，對甘藍(lán)枯萎病菌孢子萌發(fā)的抑制率達(dá)到92.0%。由此表明，不同濃度洋蔥粗提物對某些植物病原真菌具有抑制活性，且濃度越高，抑制作用越強(qiáng);洋蔥粗提取液對不同植物病原真菌的最低抑制濃度不同。

我國豐富的植物資源是開發(fā)抑菌成分的寶庫。但大多植物有效成分、作用機(jī)理等研究處于空白狀態(tài)或未能深入研究。隨著人們對環(huán)境保護(hù)和食品安全意識的增加，尋找更加安全有效的植物病害防控方法極其重要，其中對植物源殺菌劑的開發(fā)利用成為關(guān)注熱點(diǎn)。甘藍(lán)枯萎病是一種世界性的土傳病害，連作使其發(fā)病更為嚴(yán)重，防治起來又極其困難。本文的研究結(jié)果表明，洋蔥粗提取液可以使甘藍(lán)枯萎病菌的生長速率減慢，產(chǎn)孢量下降，孢子萌發(fā)率降低，菌絲結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，且培養(yǎng)基中提取物濃度越大，抑制效果越好。洋蔥粗取物作為植物源提取物具有綠色、安全等特點(diǎn)，加之洋蔥來源廣泛，價(jià)格便宜，對枯萎病病原菌具有較好的抑制作用，可為甘藍(lán)枯萎病新型農(nóng)藥研制提供理論依據(jù)和實(shí)踐材料，為甘藍(lán)枯萎病提供新的防控策略。

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