內(nèi)窺鏡輔助插管法與透射光插管法在大鼠氣管插管中的應(yīng)用比較

孔敏　姚明　楊茂憲　俞聰聰　周煦燕　袁孝忠　施云超　趙文靜　徐龍生

[摘要] 目的 探討內(nèi)窺鏡輔助插管與透射光插管法兩種直視下氣管插管方法在大鼠插管中的應(yīng)用價值。 方法 40只SD大鼠隨機分為內(nèi)窺鏡輔助插管組（A組）和透射光插管組（B組），每組20只。比較兩組氣管插管操作時間、插管次數(shù)、大鼠麻醉蘇醒首次進食時間、插管一次成功率和大鼠一周存活率。 結(jié)果 A組氣管插管操作時間為（21.25±4.17）s，顯著短于B組（26.25±7.55）s，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.016）;A組插管次數(shù)為（1.05±0.22）次，與B組（1.25±0.55）次比較，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.144）;A組大鼠麻醉蘇醒首次進食時間為（123.85±16.32）min，與B組（147.25±32.69）min比較，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.008）;A組插管一次成功率為95.0%，與B組（80.0%）相比，差異無統(tǒng)計學意義（P=0.342）;兩組大鼠一周存活率均為100.0%。 結(jié)論 內(nèi)窺鏡輔助插管組能夠縮短氣管插管操作時間，改善麻醉蘇醒后首次進食時間。

[關(guān)鍵詞] 大鼠;氣管插管;內(nèi)窺鏡;透射光

[中圖分類號] R-332? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701（2020）14-0038-04

[Abstract] Objective To explore the application value of the 2 methods of tracheal intubation under direct vision in rats， including endoscope-assisted intubation and transmission light intubation. Methods 40 SD rats were randomly divided into endoscope-assisted intubation group （group A） and transmission light intubation group （group B）， with 20 rats in each group. Between the two groups， the tracheal intubation operation duration， number of intubation operations， the first feeding time of rats after awakening from anesthesia， one-time success rate of intubation and the one-week survival rate of rats were compared. Results The tracheal intubation operation duration? in group A was（21.25±4.17）s， which was different from that in group B （26.25±7.55） s， with statistical significance（P=0.016）. The number of intubation operations in group A was（1.05±0.22）， which was different from that in group B（1.25±0.55）， but with no statistical significance（P=0.144）. When the first feeding time of rats after awakening from anesthesia was compared between group A（123.85±16.32） min and group B（147.25±32.69） min， the difference was statistically significant（P=0.008）. When the one-time success rate of intubation in group A（95.0%） was compared with that in group B（80.0%）， the difference was not statistically significant（P=0.342）. The one-week survival rate of rats in both groups was 100.0%. Conclusion Endoscopic assisted intubation group can have the tracheal intubation operation duration shortened and the first feeding time after awakening from anesthesia improved.

[Key words] Rat; Tracheal intubation; Endoscope;Transmission light

氣管插管可能導致喉痙攣、喉頭水腫，甚至誤入食管引起縱隔血腫等，導致機體的高應(yīng)激狀態(tài)[1]。建立急性呼吸窘迫綜合征、肺纖維化等實驗動物模型也需要氣管插管[2]。某些需要大鼠作為研究對象的實驗如心肺復蘇、肺臟缺血再灌注等研究，需要氣管插管后進行呼吸機輔助通氣[3]。大鼠氣管插管前，需進行全身麻醉，麻醉藥物引起氣道分泌物增多，阻塞呼吸道導致動物窒息，降低實驗成功率[4]。可視條件下暴露聲門，可降低氣管插管時的損傷，提高氣管插管成功率[5]。內(nèi)窺鏡輔助插管法與透射光插管法兩種方法均可以顯示聲門，但氣管插管成功率、所用時間等方面在動物實驗中尚未見報道。本文旨在探討內(nèi)窺鏡輔助插管與透射光插管法兩種直視下氣管插管方法在大鼠插管中的應(yīng)用價值，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

SD雄性大鼠40只，體重250～300 g，由南京市青龍山動物繁殖場購買，許可證號：SCXK（蘇）2017-0001。電子內(nèi)窺鏡（深圳浩特爾電子技術(shù)有限公司）、氣管插管（中國新航科技有限公司）、激光筆（深圳晶鼎光電子有限公司）、操作臺（中國新航科技有限公司）、電子秒表計時器（深圳市騰博訊科技有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 動物分組? 按隨機數(shù)字法分為內(nèi)窺鏡輔助插管組（A組）和透射光插管組（B組）兩組，A組為內(nèi)窺鏡輔助插管組，即采用內(nèi)窺鏡輔助插管法氣管插管;B組為透射光插管組，即采用透射光插管法氣管插管，每組20只。

1.2.2 插管前準備? 術(shù)前12 h禁食，不禁飲。戊巴比妥鈉50 mg/kg腹腔注射麻醉3～5 min，大鼠翻正反射消失后，將大鼠仰面固定在手術(shù)操作臺，操作臺與水平面呈45°斜面。用橡皮筋將大鼠上頜門齒向后拉牽引固定，將鼠舌向外拉出口腔。用棉簽清除咽喉部黏液。

1.2.3 操作過程? A組：連接電子內(nèi)窺鏡和電腦，將電子內(nèi)窺鏡放入大鼠口腔中，在電腦顯示屏上可顯示會厭和聲門，在大鼠聲門開啟時將氣管插管插入聲門。B組：將激光筆緊貼大鼠頸部，激光筆的光線穿過頸部皮膚和氣管照亮大鼠喉部，可見大鼠喉部有一亮區(qū)，聲門隨著大鼠呼吸運動開啟和閉合。大鼠吸氣時將氣管導管插入。氣管插管完成后立即判斷氣管插管是否成功。判斷氣管插管成功的標準：連接小動物呼吸機，可見大鼠呼吸頻率、呼吸運動幅度與呼吸機一致。若插管不成功，立即拔除氣管導管。

1.3觀察指標

不同插管方法術(shù)中所見喉部形態(tài)、氣管插管操作時間（A組：打開電子內(nèi)窺鏡到確定插管成功所需時間;B組：激光筆緊貼大鼠頸部到確定插管成功所需時間，以s為單位）、插管次數(shù)、蘇醒首次進食時間（以min為單位）、插管一次成功率、、一周存活率。

1.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件進行分析，計量資料以均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，計數(shù)資料采用Fisher確切概率法檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1兩種插管法觀察大鼠聲門顯露

電子內(nèi)窺鏡法可以清晰觀察到喉咽部會厭、聲門裂（圖1a），聲門隨著呼吸運動周期性開啟和閉合，可觀察到氣管插管進入聲門的過程。透視法可清晰觀察到大鼠聲門口出現(xiàn)的透亮區(qū)（圖1b）。隨著呼吸運動的改變透亮區(qū)范圍周期性變大或變小，插管完成后透亮區(qū)消失。整個插管過程中可感覺導管頭端與氣管環(huán)相互摩擦產(chǎn)生的阻澀感。

2.2 兩組大鼠插管操作時間、插管次數(shù)、蘇醒首次進食時間比較

A組插管操作時間為（21.25±4.17）s，顯著短于B組的（26.25±7.55）s，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.016）;A組插管次數(shù)為（1.05±0.22）次，B組（1.25±0.55）次，兩組插管次數(shù)比較差異無統(tǒng)計學意義（P=0.144）;A組蘇醒首次進食時間為（123.85±16.32）min，顯著短于B組的（147.25±32.69）min，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.008）。見表1。

2.3 兩組大鼠插管一次成功率、一周存活率比較

A組插管一次成功率為95.0%，B組插管一次成功率為80.0%，兩組插管一次成功率比較差異無統(tǒng)計學意義（P=0.342>0.05）;兩組大鼠一周內(nèi)存活率均為100.0%，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

3 討論

隨著建立復雜臨床模型的迫切需求以及實驗過程中更復雜、長時間的處理手段，實驗動物發(fā)生因窒息而死亡導致實驗失敗的保障措施必不可少，氣管切開行機械通氣，創(chuàng)傷大，影響實驗動物恢復，不適合行為學監(jiān)測[6]，實驗動物行氣管插管是創(chuàng)傷小、最有效的方法，本研究比較了兩種插管方式在大鼠中的應(yīng)用，內(nèi)窺鏡輔助插管組大鼠較透射光插管組所用時間更少，進食時間更早。

大鼠氣道口徑大小影響經(jīng)氣管內(nèi)給藥復制動物模型的實施，由于氣管口徑小，在復制動物模型過程中氣道阻塞、引起窒息等導致實驗動物死亡而影響實驗進程及效果。既往的研究表明，大鼠體重在250～300 g，經(jīng)氣管內(nèi)給藥可減少上述并發(fā)癥的發(fā)生[7]。成年大鼠聲門張開時的內(nèi)徑為1.5～2.5 mm。本研究選擇1.7 mm外徑的氣管插管，所有大鼠插管成功，說明該型號的氣管插管適合250～300 g大鼠。由于麻醉藥物會引起氣道分泌物增多，插管前需要及時清理分泌物保證視野清晰，有利于大鼠咽部結(jié)構(gòu)的暴露，便于插管實施。

由于大鼠口腔狹長，其縱軸遠大于口腔橫軸，外來光源進入咽喉部不佳，聲門暴露困難，經(jīng)口插管具有一定的挑戰(zhàn)性[8]。透射光插管法減輕了光線經(jīng)口腔進入聲門的難度，改善了咽喉部亮度[9-11]。電子內(nèi)窺鏡插管法可以通過顯示屏，清晰觀察聲門及其周圍組織，將氣管插管輕柔的插入聲門，完成明視插管[12-15]。透射光插管法能夠觀察到聲門位置，成功完成氣管插管。但對咽喉部結(jié)構(gòu)分辨能力差，不熟練者易會引起咽喉部損傷;電子內(nèi)窺鏡插管法在圖像引導下將插管直接送入氣管，減少對咽喉部周圍組織的損傷，對于新進入實驗室研究人員有很好的輔助幫助作用，可縮短插管時間，大鼠恢復較快，麻醉蘇醒后進食時間明顯縮短。

目前報道的大鼠氣管插管方法包括有創(chuàng)插管法和無創(chuàng)插管法。有創(chuàng)插管法主要包括氣管切開插管法、逆行插管法[16-17]。有創(chuàng)插管法在操作過程中容易引起出血增加窒息風險，甚至引起術(shù)后感染，干擾實驗結(jié)果[18]。無創(chuàng)插管法主要是包括盲探插管法、額鏡、耳鏡輔助插管法、光導纖維輔助插管法等。盲探插管法，需要初學者進行一定程度的訓練，不斷實踐，積累經(jīng)驗，熟練插管技術(shù)[19]。額鏡、耳鏡輔助插管法、光導纖維輔助插管法能夠完成插管，但是需要一定的設(shè)備[20]。采用不同的體位對插管過程產(chǎn)生不同的影響。在操作過程中，保持大鼠口軸線、咽軸線、喉軸線成一條直線，避免氣道牽拉扭曲，能夠降低氣管插管難度。在臨床大力發(fā)展可視化技術(shù)的今天，將可視化技術(shù)應(yīng)用到實驗研究中，能降低對實驗動物的不必要損傷，提高實驗動物在造模過程中的存活率，改善動物的生活質(zhì)量，提高實驗結(jié)果的準確性及可靠性，特別是在一些需要進行行為學測定的實驗中，減少插管損傷，能減少因損傷對行為學測定的干擾。