山西省賽鴿新城疫抗體水平監(jiān)測與分析

李婷婷，丁樹榮，劉華棟，陸冰洋，唐娟，王彩先

（山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 太原 030032）

鴿新城疫又稱鴿I 型副粘病毒病或鴿瘟，是危害養(yǎng)鴿業(yè)的重要傳染病之一。鴿新城疫的病原體是鴿I 型副粘病毒（Pigeon paramyxovirus 1，PPMV-1），屬于副粘病毒科，禽腮腺炎病毒屬[1]，是新城疫病毒（Newcastle Disease virus，NDV）的變異毒株。該病毒能夠引起鴿的急性、熱性、高度接觸性傳染病，感染病鴿表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、腸炎和下痢，肉鴿、賽鴿和觀賞鴿均易感，發(fā)病率100%，病死率達80%，幼鴿較為嚴(yán)重[2]。1977 年鴿I 型副粘病毒首次在伊拉克被報道[3]，隨后二十世紀(jì)八十年代在世界范圍造成大流行，1985 年經(jīng)香港傳入內(nèi)地[4]。近年來，隨著我國養(yǎng)鴿業(yè)和賽鴿行業(yè)的快速發(fā)展，鴿新城疫在我國多省均廣泛存在并傳播，是養(yǎng)鴿業(yè)重點防控的傳染病。

本研究通過檢測2015—2019 年間山西省部分市縣賽鴿公棚及賽鴿養(yǎng)殖戶的鴿新城疫抗體效價，研究近五年山西地區(qū)賽鴿新城疫免疫狀況，旨在為賽鴿的新城疫免疫防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 抗原與抗體新城疫抗原購自哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司；新城疫病毒陽性血清、陰性血清購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。

1.1.2 血清樣本2015 年1 月至2019 年11 月，在山西省大同、朔州、忻州、太原、晉中、運城地區(qū)的賽鴿公棚和養(yǎng)殖場中，按照鴿群中0.5%～1%的比例隨機抽取賽鴿，通過翼下靜脈采血的方式采集血液，室溫靜置，分離出血清后分置于4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.3 1%雞紅細(xì)胞懸液制備采集成年健康公雞血液3～5mL，置于離心管中加入30mL 滅菌生理鹽水，于1,000r/min 離心10min 后棄去上清液，反復(fù)洗滌三次紅細(xì)胞。吸取1mL 壓積紅細(xì)胞，加入滅菌生理鹽水，配成1%雞紅細(xì)胞懸液，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.4 實驗器材 真空采血管，可調(diào)移液器（200μL，1,000μL），移液器吸頭（200μL，1,000μL），托盤天平，普通離心機，高壓滅菌鍋，96 孔V 型微量血凝反應(yīng)板，微量振蕩器，溫箱。

1.2 方法

血凝（HA）試驗和血凝抑制（HI）試驗操作按《新城疫診斷技術(shù)》（GB/T16550—2008）[5]方法執(zhí)行，檢測待檢賽鴿血清的新城疫抗體效價。HI 抗體效價≥5log2 時免疫效果良好，判定為合格。

表1 山西各地區(qū)不同年份鴿新城疫抗體效價及合格率

2 結(jié)果

2.1 賽鴿ND 抗體監(jiān)測結(jié)果

使用血凝（HA）試驗和血凝抑制（HI）試驗對2015—2019 年間山西省大同、朔州、忻州、太原、晉中、運城地區(qū)的賽鴿場賽鴿進行血清中NDV 抗體監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查，各地區(qū)賽鴿新城疫抗體效價監(jiān)測，結(jié)果見表1。

由表1 可知，2015—2019 年間山西省不同地區(qū)賽鴿的新城疫抗體效價高低不均，差異較大，每年檢測中各地區(qū)都有免疫不合格情況，整體免疫水平偏低。2016 和2019 年新城疫抗體免疫合格率均較高，但是其抗體水平仍然偏低。

2.2 不同年份各地區(qū)賽鴿新城疫抗體效價

2015—2019 年山西省不同年份、不同地區(qū)賽鴿新城疫抗體效價變化情況，結(jié)果見圖1。

圖1 不同年份各地區(qū)賽鴿新城疫抗體效價

由圖1 可見，在五年監(jiān)測中，忻州、太原和晉中地區(qū)賽鴿ND抗體效價平均值相對較高、免疫合格率高；太原地區(qū)抗體效價平均值均合格；大同、臨汾地區(qū)賽鴿ND 免疫合格率均較低。2016—2019 年間，臨汾地區(qū)賽鴿ND 抗體效價均≤5log2，免疫不合格。同一地區(qū)、不同年份的賽鴿ND 抗體也存在較大差異，朔州、忻州、晉中地區(qū)賽鴿ND 抗體效價呈現(xiàn)波動上升的趨勢。

2.3 不同年份山西地區(qū)賽鴿新城疫平均抗體效價變化圖

2015—2019 年山西省賽鴿新城疫平均抗體效價變化情況，結(jié)果見圖2。

由圖2 可見，在2015—2019 年整個山西地區(qū)賽鴿新城疫抗體效價變化規(guī)律呈現(xiàn)先降低后升高的波動變化。2016 和2017 年賽鴿新城疫效價平均值均不合格，僅為4.95log2 和4.84log2。但平均抗體效價呈現(xiàn)出上升趨勢，在2019 年已達到5.7log2。

圖2 不同年份山西地區(qū)賽鴿新城疫平均抗體效價變化圖

3 討論

近年來，鴿新城疫在全國多地都有流行發(fā)病的報道[6,7]，這使得新城疫的防控工作需要更加重視。而疫苗接種是目前防控新城疫的主要方法，雖然免疫技術(shù)和程序已經(jīng)日趨成熟，但是從山西地區(qū)五年間賽鴿新城疫平均抗體效價結(jié)果可以看出，山西地區(qū)賽鴿新城疫整體免疫水平和合格率均偏低，在不同年份中的一些地區(qū)出現(xiàn)平均抗體效價不合格的情況，這些地區(qū)賽鴿不能獲得有效的保護力，不能保護其免受鴿I 型副粘病毒強毒的攻擊。養(yǎng)殖場重視新城疫免疫后，山西省總體鴿新城疫平均抗體效價從2016—2019年呈現(xiàn)出上升趨勢，在2018 年以后，賽鴿新城疫平均抗體效價均高于《新城疫診斷技術(shù)》（GB/T16550—2008）規(guī)定5log2，可以有效對抗強毒攻擊。

有研究表明，使用鴿源新城疫疫苗相比于雞源新城疫疫苗能使鴿子產(chǎn)生更好的保護力[8]。在采樣的地區(qū)仍然有一些賽鴿公棚和養(yǎng)殖場使用雞新城疫疫苗對鴿群進行免疫的現(xiàn)象。雖然，鴿新城疫和雞新城疫存在著很高的交叉反應(yīng)，但是雞新城疫疫苗株與PPMV-I 的同源性相差較大，說明現(xiàn)有的雞新城疫疫苗不能為鴿群免受PPMV-I 的感染提供堅實的保護力，這是造成鴿新城疫免疫效果差、免疫失敗的原因之一。其他原因還可見于未正確保存和使用疫苗、免疫程序不合理、收購賽鴿新城疫免疫水平參差不齊等。賽鴿預(yù)防新城疫的發(fā)生需要做到：①使用正確的新城疫疫苗；②嚴(yán)格執(zhí)行合理的免疫程序和免疫監(jiān)測制度，定期檢測鴿群的新城疫抗體水平；③及時對新購進賽鴿和比賽后賽鴿進行隔離，并檢測其新城疫抗體水平；④做好日常的衛(wèi)生、消毒和防疫工作。