注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者基質(zhì)金屬蛋白酶水平的影響

胡江輝， 吳春麗， 吳麗華

蘭溪市人民醫(yī)院婦產(chǎn)科(浙江蘭溪 321100)

子宮內(nèi)膜異位癥是一種臨床較為常見(jiàn)的婦科疾病，處于生育年齡的女性為高發(fā)群體，發(fā)病主要原因是子宮內(nèi)膜組織發(fā)生病變，子宮腔被覆黏膜[1-2]。子宮內(nèi)膜異位癥患者主要臨床表現(xiàn)為痛經(jīng)、不孕、月經(jīng)異常、尿頻腹瀉等，對(duì)患者的身體健康以及生活質(zhì)量造成嚴(yán)重的影響。據(jù)相關(guān)流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)病率一直居高不下，并呈現(xiàn)逐年上升趨勢(shì)，對(duì)患者的妊娠率以及生育能力造成嚴(yán)重的影響，因此對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥進(jìn)行及時(shí)有效的治療具有重要意義[3]。注射用醋酸曲普瑞林是一種廣譜的GnRH-a藥物，對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者具有一定的治療效果[4]，丹那唑也常應(yīng)用于子宮內(nèi)膜異位癥的臨床治療[5]，但是關(guān)于兩者聯(lián)合應(yīng)用的研究還相對(duì)較少，本研究中使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，旨在探究?jī)烧呗?lián)合的治療效果及對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶水平的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年7月至2018年7月于我院接受治療的子宮內(nèi)膜異位癥患者110例，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為丹那唑組、聯(lián)合用藥組各55例。丹那唑組患者年齡23～30歲，平均(26.7±2.5)歲，聯(lián)合用藥組患者年齡23～29歲，平均(26.3±2.4)歲，兩組患者年齡比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均經(jīng)B超以及腹腔鏡檢查，取組織活檢，確診為子宮內(nèi)膜異位癥。排除標(biāo)準(zhǔn)：病歷資料不全患者；對(duì)本研究所用藥物過(guò)敏患者；生殖道畸形患者；心、肺、腎等重要器官衰竭或功能不全患者。所有患者及家屬對(duì)本研究均知情，簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 丹那唑組患者使用丹那唑進(jìn)行治療：從月經(jīng)周期第1～3天開(kāi)始服用，200 mg/次，2次/d，于早晚飯后使用溫水吞服，連續(xù)服用3個(gè)月。聯(lián)合用藥組患者使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑進(jìn)行治療：于患者月經(jīng)第1～3天使用注射用醋酸曲普瑞林對(duì)患者進(jìn)行皮下注射，1次/28 d，1支/次，共注射3次，丹那唑用法用量與丹那唑組保持一致。

1.2.2 免疫透射比濁法檢測(cè)血清糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)、子宮內(nèi)膜抗體(endometrial antibody，EMAb)水平 取3個(gè)試管，分別標(biāo)記為空白管、標(biāo)準(zhǔn)管以及測(cè)定管。空白管中加入15 μL生理鹽水和350 μL Tris緩沖液，標(biāo)準(zhǔn)管中加入15 μL 定標(biāo)液和350 μL Tris緩沖液，測(cè)定管中加入15 μL待測(cè)標(biāo)本和350 μL Tris緩沖液，對(duì)3個(gè)試管分別搖晃混勻后，在37℃的環(huán)境中保存5 min，在波長(zhǎng)340～700 nm處讀各管吸光度。之后在3個(gè)試管中分別加入羊抗人CRP抗血清，分別搖晃混勻后在37℃的環(huán)境中保存5 min，在波長(zhǎng)340～700 nm處讀各管吸光度，并對(duì)CA125、EMAb水平進(jìn)行計(jì)算。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法檢測(cè)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2、MMP-3、MMP-9水平 采用50 mmol/L碳酸鹽包被緩沖液將抗原進(jìn)行溶解，濃度為10～20 μg/mL，在96孔酶標(biāo)板中加入100 μL/孔，4℃過(guò)夜保存。第2天舍棄包被液，采用PBST洗滌3次，每孔中加入1%的150 μL BSA，在37℃環(huán)境中封閉1 h。之后采用PBST洗滌3次，在每孔中加入100 μL不同倍比稀釋度的血清，加入對(duì)照樣品，37℃孵育2 h。采用PBST洗滌5次，加入100 μL,稀釋后的HRP標(biāo)記的二抗，37℃孵育1 h。PBST洗滌5次，之后，使用顯色劑顯色20 min后，在酶標(biāo)儀上讀取A405吸收值。

1.2.4 子宮內(nèi)膜壁的厚度檢測(cè) 所有患者治療后陰道均采用超聲檢測(cè)，嚴(yán)格按照彩色多勒普超聲儀說(shuō)明書進(jìn)行操作，使用5.0 MHz的頻率來(lái)檢測(cè)，記錄子宮內(nèi)膜壁的厚度。正常子宮內(nèi)膜壁厚度參考值為7 mm。觀察顯示器上顯示的患者舒張末期峰值、搏動(dòng)指數(shù)、阻力指數(shù)，并進(jìn)行分析。

1.2.5 妊娠情況統(tǒng)計(jì) 通過(guò)電話隨訪或家庭訪問(wèn)等形式，對(duì)患者治療后12個(gè)月的妊娠情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和對(duì)比。

1.2.6 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 將兩組患者接受治療后的效果分為顯效、有效和無(wú)效3個(gè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)。顯效：患者痛經(jīng)、盆腔痛、性交痛等臨床癥狀消失，CA125、EMAb、MMP-2、MMP-3、MMP-9水平恢復(fù)正常；有效：患者痛經(jīng)、盆腔痛、性交痛等癥狀得到明顯緩解，血清CA125、EMAb、MMP-2、MMP-3、MMP-9水平得到明顯改善；無(wú)效：患者痛經(jīng)、盆腔痛、性交痛等癥狀無(wú)改善甚至加重?？傆行?(顯效+有效)/總例數(shù)×100%。

1.2.7 不良反應(yīng)觀察 對(duì)兩組患者在治療過(guò)程中出現(xiàn)的陰道干燥、性欲下降、腹痛等不良反應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并進(jìn)行組間比較。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件，組間比較進(jìn)行獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，治療前后進(jìn)行重復(fù)測(cè)量的方差分析；計(jì)數(shù)資料組間比較進(jìn)行2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后CA125、EMAb水平對(duì)比 丹那唑組和聯(lián)合用藥組患者治療前CA125、EMAb水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者CA125、EMAb水平均出現(xiàn)下降，且聯(lián)合用藥組患者CA125、EMAb水平均明顯低于丹那唑組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1兩組患者治療前后CA125、EMAb水平對(duì)比

項(xiàng)目例數(shù)CA125(U/mL)EMAb治療前治療后治療前治療后丹那唑組5546.55±4.2323.87±3.250.58±0.070.38±0.05聯(lián)合用藥組5546.61±4.1916.74±3.110.56±0.080.29±0.04t值0.0711.761.4010.42P值>0.05<0.05>0.05<0.05

2.2 兩組患者治療前后基質(zhì)金屬蛋白酶水平比較 治療前兩組患者M(jìn)MP-2、MMP-3、MMP-9水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；治療后，兩組患者M(jìn)MP-2、MMP-3、MMP-9水平均出現(xiàn)下降，且聯(lián)合用藥組患者M(jìn)MP-2、MMP-3、MMP-9水平均低于丹那唑組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.3 治療對(duì)兩組患者子宮內(nèi)膜壁的影響 治療后，聯(lián)合用藥組患者子宮內(nèi)膜壁厚度、舒張末期峰值、搏動(dòng)指數(shù)、阻力指數(shù)均顯著低于丹那唑組患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

2.4 兩組患者治療后妊娠情況對(duì)比 聯(lián)合用藥組患者治療后妊娠率為83.64%，顯著高于丹那唑組患者63.64%的妊娠率，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=5.67，P<0.05)。見(jiàn)表4。

2.5 兩組患者治療效果對(duì)比 聯(lián)合用藥組患者治療總有效率顯著高于丹那唑組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=4.27，P<0.05)。見(jiàn)表5。

表2兩組患者治療前后基質(zhì)金屬蛋白酶水平比較

項(xiàng)目例數(shù)MMP-2(ng/mL)MMP-3(ng/mL)MMP-9(μg/L)治療前治療后治療前治療后治療前治療后丹那唑組557.29±1.524.75±0.858.32±1.645.11±0.93158.65±25.6465.87±7.58聯(lián)合用藥組557.26±1.473.21±0.688.29±1.623.46±0.87156.33±25.3752.33±6.15t值0.1110.490.109.610.4710.29P值>0.05<0.05>0.05<0.05>0.05<0.05

表3治療對(duì)兩組患者子宮內(nèi)膜壁的影響

項(xiàng)目例數(shù)子宮內(nèi)膜壁厚度(mm)舒張末期峰值(cm/s)搏動(dòng)指數(shù)阻力指數(shù)丹那唑組5512.41±2.572.53±0.360.83±0.160.65±0.23聯(lián)合用藥組557.82±2.062.11±0.230.70±0.110.13±0.06t值10.337.294.9716.22P值<0.05<0.05<0.05<0.05

表4 兩組患者治療后妊娠情況對(duì)比 例

表5 兩組患者治療效果對(duì)比 例

2.6 兩組患者治療過(guò)程中不良反應(yīng)發(fā)生情況對(duì)比 聯(lián)合用藥組患者治療過(guò)程中不良反應(yīng)發(fā)生率略高于丹那唑組，但兩組對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(2=0.33，P>0.05)。見(jiàn)表6。

表6兩組患者治療過(guò)程中不良反應(yīng)發(fā)生情況對(duì)比

例

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥患者多處于生育年齡，普遍具有生育要求，因此大多會(huì)選擇藥物治療[6-8]。丹那唑是一種合成雄激素，具有弱雄性激素的活性，并且有蛋白同化的效果以及抗孕激素的作用，但是不具有孕激素和雌激素的活性，臨床常應(yīng)用于子宮內(nèi)膜異位癥的治療。注射用醋酸曲普瑞林是一種廣譜的GnRH-a藥物，有學(xué)者在研究中表示，注射用醋酸曲普瑞林能夠調(diào)控子宮內(nèi)膜異位癥患者雌激素水平，從而達(dá)到異位內(nèi)膜組織退化的目的[9-10]。本研究中使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，觀察效果。

有學(xué)者在研究中表示，對(duì)CA125、EMAb水平進(jìn)行檢測(cè)，能夠?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥的診斷以及治療效果評(píng)價(jià)提供幫助[11-12]。CA125作為一種糖蛋白，主要存在于胚胎發(fā)育時(shí)體腔的上排組織中，在無(wú)妊娠的婦女卵巢中并不存在，根據(jù)其較高的敏感性，常作為腫瘤標(biāo)志物用于診斷病情以及患者治療效果的評(píng)估[13-14]。EMAb作為一種人體的自身抗體，能夠與人體子宮內(nèi)膜抗原相結(jié)合，從而引起免疫反應(yīng)，是子宮內(nèi)膜異位癥的標(biāo)志性抗體[15-16]。本研究中對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者CA125、EMAb水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療后，患者CA125、EMAb水平出現(xiàn)明顯下降，并且使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑進(jìn)行治療的患者CA125、EMAb水平下降更加明顯，說(shuō)明使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，能夠通過(guò)調(diào)控CA125、EMAb水平而達(dá)到治療目的。

目前臨床醫(yī)學(xué)尚未將子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)病機(jī)制研究透徹，有學(xué)者在研究中表示，基質(zhì)金屬蛋白酶的異常高表達(dá)會(huì)引起機(jī)體氧化應(yīng)激反應(yīng)，還有可能會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞外基質(zhì)成分降解異常情況，從而造成機(jī)體組織損傷，與子宮內(nèi)膜組織的異位生長(zhǎng)具有密切聯(lián)系[17-18]。針對(duì)這一觀點(diǎn)，本研究中對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者M(jìn)MP-2、MMP-3、MMP-9水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療后，MMP-2、MMP-3、MMP-9水平出現(xiàn)下降，使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑進(jìn)行治療的患者M(jìn)MP-2、MMP-3、MMP-9水平下降幅度更大，說(shuō)明使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，能夠抑制MMP-2、MMP-3、MMP-9的表達(dá)水平，從而起到治療效果。

有學(xué)者在研究中表示，相比正常人，子宮內(nèi)膜異位癥患者的子宮內(nèi)膜厚度有明顯異常，通過(guò)有效治療能夠使子宮內(nèi)膜厚度恢復(fù)正常水平[19]。本研究中對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者的子宮內(nèi)膜厚度進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示，使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，患者子宮內(nèi)膜厚度恢復(fù)正常水平。還有學(xué)者在研究中表示，子宮內(nèi)膜組織的功能狀態(tài)與血流灌注有著緊密關(guān)聯(lián)，舒張末期峰值、搏動(dòng)指數(shù)與阻力指數(shù)能夠直觀地反映出人體子宮血液循環(huán)狀況[20]。本研究結(jié)果顯示，使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，患者的舒張末期峰值、搏動(dòng)指數(shù)、阻力指數(shù)得到了較為明顯的改善，說(shuō)明兩者聯(lián)合能夠改善子宮內(nèi)膜異位癥患者的子宮血液供給情況，使患者子宮內(nèi)膜的血液灌流量上升，進(jìn)而使患者子宮內(nèi)膜的耐受性增強(qiáng)。

本研究中對(duì)子宮內(nèi)膜異位癥患者治療效果、治療后妊娠情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果顯示，使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑進(jìn)行治療的患者治療有效率以及治療后妊娠率較高，進(jìn)一步說(shuō)明兩者聯(lián)合治療的應(yīng)用價(jià)值。

綜上所述，使用注射用醋酸曲普瑞林聯(lián)合丹那唑?qū)ψ訉m內(nèi)膜異位癥患者進(jìn)行治療，能夠明顯改善患者血清CA125、EMAb水平以及MMP-2、MMP-3、MMP-9水平，降低患者子宮內(nèi)膜壁厚度，提高患者妊娠率，治療效果顯著，具有一定臨床應(yīng)用價(jià)值。