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    改良鉬銻抗比色法測(cè)定不同谷子材料組織磷含量

    2020-07-09 03:00:06李明明晉敏姍于港華邢國(guó)芳
    激光生物學(xué)報(bào) 2020年3期
    關(guān)鍵詞:比色法蒸餾水谷子

    李 萍,李明明,王 浩,晉敏姍,于港華,邢國(guó)芳

    (山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院, 太谷 030801)

    磷(phosphorus,P)是植物生長(zhǎng)發(fā)育所必須的大量營(yíng)養(yǎng)元素之一,以多種形式參與植物體內(nèi)各類生物的化學(xué)反應(yīng),對(duì)作物產(chǎn)量和品質(zhì)均有至關(guān)重要的影響[1]。已有研究表明,土壤中總磷含量為 500~2 000 mg/kg,但由于磷易被土壤吸附、固定形成難溶性化合物或者以有機(jī)態(tài)的形式存在,使得其在土壤中的移動(dòng)性小,對(duì)作物的生物有效性低,從而不易被植物吸收利用[2-4],導(dǎo)致出現(xiàn)土壤磷素的“遺傳學(xué)缺乏”現(xiàn)象[5]。據(jù)估計(jì),世界上約有30%的農(nóng)業(yè)土壤處于缺磷狀態(tài),缺磷已成為制約作物產(chǎn)量和品質(zhì)提高的重要非生物脅迫之一[6]?;实氖┯糜兄诩Z食產(chǎn)量的提高,隨著世界人口的增加,糧食的需求量也持續(xù)上升,化肥的投入量逐年增加。但磷肥施用過量,不僅會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染,還會(huì)加劇磷礦資源的耗竭。只有準(zhǔn)確掌握植物體內(nèi)的磷狀況,才能指導(dǎo)磷肥的合理施用。

    提高植物的磷素吸收利用效率一直是世界科學(xué)家關(guān)注的熱點(diǎn)。阮文淵等[7]揭示了水稻響應(yīng)外界磷素狀況調(diào)節(jié)葉片直立性的細(xì)胞學(xué)及分子生理學(xué)機(jī)制,為使用分子設(shè)計(jì)培育磷高效水稻種質(zhì)提供了理論依據(jù)。易可可團(tuán)隊(duì)[8]鑒定了陸生植物液泡無機(jī)磷輸出的轉(zhuǎn)運(yùn)體,深化了我們對(duì)植物體內(nèi)磷素平衡機(jī)制的認(rèn)識(shí),同時(shí),在培育磷素高效利用的新品種上有潛在的應(yīng)用價(jià)值。擬南芥中的液泡磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)體1(vacuolar phosphate transporter 1,VPT1)結(jié)構(gòu)域蛋白可將無機(jī)磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)到液泡中,使植物能夠適應(yīng)土壤中可變的無機(jī)磷酸鹽的可用性[9]。谷子(Setariaitalica)作為重要的小雜糧作物,具有耐旱、耐鹽、耐瘠薄、高光合效率等特性[10],是中國(guó)北方地區(qū)最主要的種植作物之一[11]。目前,相關(guān)磷效率研究多集中在玉米、水稻、小麥、大豆等大宗作物或模式植物上[12-15],有關(guān)谷子磷營(yíng)養(yǎng)特性、磷吸收效率及磷含量測(cè)定方法的研究鮮見報(bào)道。

    植物在不同磷水平下的組織器官中磷含量的準(zhǔn)確測(cè)定對(duì)作物的磷素高效利用的研究起著至關(guān)重要的作用。目前,常用的磷含量測(cè)定方法有鉬銻抗比色法和釩鉬黃比色法[16]。鉬銻抗比色法與釩鉬黃比色法相比存在一定的差異。陳瑋[17]采用鉬銻抗比色法測(cè)定了廢水中總磷含量,發(fā)現(xiàn)該方法具有操作簡(jiǎn)單、對(duì)酸度要求不太嚴(yán)格的特點(diǎn),適用于一般的化驗(yàn)室分析。李會(huì)娟[18]分別采用鉬銻抗比色法和釩鉬黃比色法檢測(cè)植物中的磷含量,發(fā)現(xiàn)鉬銻抗比色法適宜檢測(cè)磷含量較低的樣品,如玉米、小麥等作物的秸稈,而釩鉬黃比色法適合測(cè)定磷含量較高的樣品,如花生籽粒。盧超[19]的研究也證實(shí)了這一點(diǎn),其發(fā)現(xiàn)鉬銻抗比色法比磷釩鉬黃比色法能更加準(zhǔn)確地測(cè)定濕地植物中的總磷含量。

    本試驗(yàn)用改良后的鉬銻抗比色法測(cè)定了谷子不同材料組織的磷含量,減少了試驗(yàn)步驟,將繁瑣的消解步驟簡(jiǎn)單化,操作方便,提高了磷含量測(cè)定的靈敏度,測(cè)定結(jié)果線性良好,標(biāo)準(zhǔn)差低,精密度很理想,適合植物中低濃度磷的測(cè)定,可為不同谷子材料總磷含量測(cè)定提供依據(jù)和參考。

    1 材料與方法

    1.1 儀器與試劑

    1.1.1 試驗(yàn)儀器

    UV-1200 型紫外可見分光光度計(jì)(上海美普達(dá)儀器有限公司);LWY84B 型溫控式遠(yuǎn)紅外消煮爐(武漢格萊莫檢測(cè)設(shè)備有限公司);賽多利斯BSA124S電子天平(廣州市深華生物技術(shù)有限公司)。

    1.1.2 試驗(yàn)試劑

    濃硫酸(H2SO4,ρ≈1.84 g/cm3,分析純)。

    300 g/L H2O2。

    2,4-二硝基酚指示劑溶液:將0.25 g二硝基酚溶解于100 mL蒸餾水中,此指示劑的變色點(diǎn)約為pH 3,酸性時(shí)無色,堿性時(shí)呈黃色。

    4 mol/L氫氧化鈉溶液:將16 g NaOH溶解于100 mL蒸餾水中。

    2 mol/L硫酸溶液:吸取濃硫酸6 mL,緩緩加入80 mL蒸餾水中,邊加邊攪動(dòng),冷卻后加蒸餾水至100 mL。

    5.0 g/L酒石酸氧銻鉀溶液:取酒石酸氧銻鉀[K(SbO)C4H4O6] 0.5 g,溶解于100 mL蒸餾水中。

    鉬酸銨-硫酸溶液:稱取鉬酸銨[(NH4)Mo7O24·4H2O] 10 g,溶于450 mL蒸餾水中,緩慢地加入153 mL 濃H2SO4,邊加邊攪動(dòng)。

    鉬銻抗試劑:將上述5.0 g/L酒石酸氧銻鉀溶液加入到鉬酸銨-硫酸溶液中,最后加蒸餾水至1 L,充分搖勻,貯存于棕色瓶中,此為鉬銻混合液。臨用前(當(dāng)天),稱取左旋抗壞血酸(C6H8O5,化學(xué)純)1.5 g,溶于100 mL鉬銻混合液中,混勻,此即鉬銻抗試劑,有效期為24 h,如藏于冰箱中則可延長(zhǎng)有效期。此試劑中的H2SO4濃度為5.5 mol/L(H+),鉬酸銨的質(zhì)量濃度為10.0 g/L,酒石酸氧銻鉀的質(zhì)量濃度為0.5 g/L,抗壞血酸的質(zhì)量濃度為15.0 g/L。

    磷標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:準(zhǔn)確稱取在105 ℃烘箱中烘干的KH2PO4(分析純)0.219 5 g,溶解在400 mL蒸餾水中,加濃H2SO45 mL,轉(zhuǎn)入1 L容量瓶中,加蒸餾水至刻度,此溶液為50 μg/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液。吸取磷標(biāo)準(zhǔn)溶液25 mL,稀釋至250 mL,即為5 μg/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液(此溶液不宜久存)。

    1.2 試驗(yàn)步驟

    1.2.1 樣品處理

    收集不同的谷子材料,包括谷子新鮮幼嫩葉片、幼嫩根系、成熟葉片、成熟根系、新鮮幼穗、成熟莖稈及液氮冷凍后的相應(yīng)組織和谷子籽粒。磷處理材料采用本實(shí)驗(yàn)室前期篩選出來的谷子磷耐受品種公谷71號(hào)和磷敏感品種S1359。材料來源于表1列出,分2個(gè)磷濃度梯度(0.005、0.250 mmol/L)進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)液培養(yǎng),2周后取材。將取到的所有材料于烘箱105 ℃殺青30 min,再 80 ℃烘干,將樣本粉碎后,采用 H2SO4-H2O2消煮,用改良的鉬銻抗比色法測(cè)定磷含量。

    表1 兩種谷子材料的來源Tab.1 Sources of two millet materials

    1.2.2 樣品消解

    稱粉碎烘干的植物樣品約0.3 g,置于100 mL的開氏瓶中,然后加濃H2SO45 mL,輕輕搖勻,瓶口放一個(gè)彎頸漏斗,然后逐滴加300 g/L H2O210滴,待消煮爐溫度升高至370 ℃,將開氏瓶放到消煮爐上進(jìn)行消煮,當(dāng)溶液呈均勻的棕黑色時(shí),從消煮爐上取下開氏瓶,稍冷后,逐滴加300 g/L H2O210滴,并不斷搖動(dòng)開氏瓶,再加熱至微沸10 ~20 min,取下稍冷卻后,再加入H2O25 ~10滴,搖勻后再消煮,如此重復(fù)3 ~5次,直至消煮液呈無色或清亮色后,再加熱約5 ~10 min,以除盡過量的H2O2。將開氏瓶取下冷卻,用少量蒸餾水沖洗小漏斗洗入瓶中,再將消煮液無損地定容到100 mL容量瓶中,取澄清的上清液供磷元素的測(cè)定。消煮時(shí)同時(shí)做空白試驗(yàn),空白試驗(yàn)除不加試樣外,試劑量和操作方法與測(cè)定試樣相同,以校正試劑誤差。

    1.2.3 樣品測(cè)定

    取定容好的5 mL待測(cè)液,注入50 mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至30 mL,加二硝基酚指示劑2滴,再滴加4 mol/L NaOH溶液直至溶液變?yōu)辄S色,再加2 mol/L 硫酸溶液1滴,使溶液的黃色剛剛褪去(調(diào)節(jié)溶液pH為3),然后加鉬銻抗試劑5 mL,再加水定容到50 mL,搖勻,30 min后,選用880 nm波長(zhǎng)進(jìn)行比色。880 nm 的波長(zhǎng),靈敏度較高,空比色皿的吸光度誤差幾乎為零[9]。以空白試驗(yàn)的吸光度調(diào)0為基準(zhǔn),讀出測(cè)定液的透光率或吸光值。

    1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線

    準(zhǔn)確吸取5 μg/mL磷標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1、2、4、6、8、10 mL,分別放入50 mL容量瓶中,加水至約30 mL,再加空白試驗(yàn)定容后的消煮液5 mL,調(diào)節(jié)溶液pH為3,然后加鉬銻抗試劑5 mL,最后用蒸餾水定容至50 mL。30 min后進(jìn)行比色,各瓶比色液磷質(zhì)量濃度分別為0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 μg/mL。

    1.2.5 結(jié)果計(jì)算

    磷含量可按下式進(jìn)行計(jì)算:

    全磷P(%)=ρ·V·ts×10-4/m

    式中:ρ—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得顯色液磷的質(zhì)量濃度(μg/mL);

    V—顯色液體積(mL);

    ts—分取倍數(shù):消煮液定容體積(mL)/吸取消煮液體積(mL);

    m—干樣品質(zhì)量(g)。

    1.3 數(shù)據(jù)處理

    采用DPS7.05[20]數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)測(cè)定的所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,再利用Microsoft Excel 2010軟件整理數(shù)據(jù)并繪制相關(guān)圖表。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線及回歸方程

    通過磷標(biāo)準(zhǔn)溶液梯度的測(cè)定,我們建立了優(yōu)化的采用鉬銻抗比色法測(cè)定磷含量的方法,發(fā)現(xiàn)在磷標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)量濃度0~1.2 μg/mL之間具有良好的線性關(guān)系。改良前的鉬銻抗比色法的相關(guān)系數(shù)為0.953 4,線性方程為y=0.532 9x+0.019 3;而改良后的鉬銻抗比色法的相關(guān)系數(shù)達(dá)0.998 1,線性方程為y=1.060 3x-0.010 3,測(cè)定結(jié)果線性良好。并且分光光度計(jì)儀器本身吸光度在0.2 ~0.8為最優(yōu)區(qū)間,線性范圍相對(duì)較窄,適合植物中低濃度磷的測(cè)定,可為不同谷子材料總磷測(cè)定提供依據(jù)和參考(圖1)。

    圖1 改良前后的鉬銻抗比色法測(cè)定磷含量標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig.1 Standard curve for determination of phosphorus content by molybdenum-antimony anti-colorimetric method before and after improvement(a)未改良的鉬銻抗比色法的標(biāo)準(zhǔn)曲線;(b)改良后的鉬銻抗比色法的標(biāo)準(zhǔn)曲線(a)The standard curve of the unmodified molybdenum-antimony anti-colorimetric method;(b)The standard curve of the modified molybdenum-antimony anti-colorimetric method

    2.2 改良前后的鉬銻抗比色法測(cè)定谷子幼嫩葉片和根系的組織磷含量

    為了對(duì)比改良前后的鉬銻抗比色法在測(cè)定不同谷子材料組織磷含量時(shí)的精密度,我們對(duì)同一谷子材料重復(fù)3次,計(jì)算其平均值、標(biāo)準(zhǔn)偏差及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(relative standard deriation,RSD),以表征該方法的精密度。從表2中可以看出,改良前的鉬銻抗比色法測(cè)定的谷子新鮮幼嫩葉片的磷含量約為0.210 0 μg/g,新鮮幼嫩根系的磷含量約為0.102 0 μg/g,改良后的鉬銻抗比色法測(cè)定的谷子新鮮幼嫩葉片的磷含量約為0.243 0 μg/g,新鮮幼嫩根系的磷含量約為0.059 3 μg/g。改良前的鉬銻抗比色法在測(cè)定谷子葉片及根系組織磷含量時(shí)所得的標(biāo)準(zhǔn)偏差比較大,為0.006 6和0.005 2,RSD值也比較大,為3.140 0%和5.090 0%,而改良后的鉬銻抗比色法在測(cè)定谷子葉片及根系組織磷含量時(shí)所得的標(biāo)準(zhǔn)偏差相對(duì)較小,為0.003 1和0.000 4,RSD值也比較小,為1.270 0%和0.674 0%。以標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍為磷元素的方法檢出限,改良前的鉬銻抗比色法計(jì)算得的檢出限為0.019 8和0.015 6 μg/mL,改良后的鉬銻抗比色法計(jì)算得出的檢出限為0.009 3和0.001 2 μg/mL。通過對(duì)比改良前后的鉬銻抗比色法測(cè)得的谷子葉片及根系的組織磷含量,我們發(fā)現(xiàn)改良后的鉬銻抗比色法所測(cè)得的根系磷含量比改良前少了41.86%,可推測(cè)改良前的鉬銻抗比色法更適合測(cè)定根系的磷含量。改良后的鉬銻抗比色法測(cè)得磷含量的結(jié)果的重復(fù)性較好,并且具有良好的精密度。

    2.3 改良后鉬銻抗比色法測(cè)定不同谷子組織材料磷含量

    為進(jìn)一步證實(shí)改良后的鉬銻抗比色法測(cè)定不同谷子材料組織磷含量時(shí)的靈敏度,我們對(duì)谷子新鮮幼嫩葉片、幼嫩根系、成熟葉片、成熟根系、新鮮幼穗、成熟莖稈及液氮冷凍后的相應(yīng)組織和谷子籽粒進(jìn)行磷含量的測(cè)定。從表3中可以看出,改良后的鉬銻抗比色法測(cè)定的谷子新鮮幼嫩葉片的磷含量約為0.243 0 μg/g,新鮮幼嫩根系的磷含量約為0.059 3 μg/g,新鮮成熟葉片的磷含量約為0.137 0 μg/g,新鮮成熟根系的磷含量約為0.171 0 μg/g,新鮮幼穗的磷含量約為0.297 0 μg/g,新鮮成熟莖稈的磷含量約為0.172 0 μg/g;液氮冷凍后的幼嫩葉片的磷含量約為0.287 0 μg/g,液氮冷凍后的幼嫩根系的磷含量約為0.189 0 μg/g,液氮冷凍后的成熟葉片的磷含量約為0.085 7 μg/g,液氮冷凍后的成熟根系的磷含量約為0.207 0 μg/g,液氮冷凍后的幼穗的磷含量約為0.286 0 μg/g,液氮冷凍后的成熟莖稈的磷含量約為0.163 0 μg/g,谷子籽粒的磷含量約為0.013 1 μg/g。該方法在測(cè)定不同谷子組織材料磷含量時(shí)所得的標(biāo)準(zhǔn)偏差比較小,在0~0.015 8范圍之內(nèi);RSD的范圍在0%~1.81%,以標(biāo)準(zhǔn)偏差的3倍為磷元素的方法檢出限,檢出限范圍在0 ~0.047 4 μg/mL,重復(fù)性較好,說明改良后的鉬銻抗比色法具有良好的精密度,并且該方法可以用于不同谷子材料磷含量的測(cè)定。

    表2 改良前后的鉬銻抗比色法測(cè)定谷子幼嫩葉片及根系磷含量的結(jié)果及精密度Tab.2 Results and precision of determination of phosphorus content in young leaves and roots of millet by modified molybdenum-antimony anti-colorimetric method before and after improvement

    表3 不同谷子組織材料組織磷含量測(cè)定結(jié)果及精密度Tab.3 Determination results and precision of phosphorus content in different millettissue materials

    表3(續(xù))

    2.4 改良后的鉬銻抗比色法測(cè)定不同磷處理下谷子材料的磷含量

    施不同濃度的磷肥可直接影響到植株磷素的含量。缺磷環(huán)境下植株各個(gè)部位的磷含量都比在正常磷水平下低,種植環(huán)境中磷素的缺乏會(huì)直接對(duì)植株的磷效率產(chǎn)生影響,也直接影響到植株的生長(zhǎng)發(fā)育[21]。我們采用改良后的鉬銻抗比色法分析了磷耐受型和磷敏感型谷子品種(表1所示)在低磷與正常磷水平下地上部葉片的組織磷含量,發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)品種在0.005 mmol/L的磷濃度處理下的葉片磷含量低于0.250 mmol/L的磷濃度處理下的葉片磷含量。在0.005 mmol/L的磷濃度下,品種1的葉片磷含量比品種2的葉片磷含量高233.20%,當(dāng)磷濃度上升到0.250 mmol/L時(shí),兩個(gè)品種的葉片磷含量分別上升了39.98%和250.94%,品種2的葉片磷含量的上升達(dá)到了極顯著水平。耐低磷脅迫相對(duì)值指數(shù)為某一性狀低磷脅迫下測(cè)定值與正常條件下該性狀測(cè)定值的比值,相對(duì)指數(shù)越低,品種越敏感,相對(duì)值越高,越耐低磷[22]。我們計(jì)算出品種1的耐低磷脅迫相對(duì)指數(shù)為0.710,品種2的耐低磷脅迫相對(duì)指數(shù)為0.280。由此可知,品種1為磷耐受品種,品種2為磷敏感品種。

    圖2 不同磷濃度處理下的谷子磷含量差異Fig.2 Differences in the content of millet phosphorus under different phosphorus concentrations注:柱上** 表示處理間差異達(dá)0.05顯著水平,柱上*** 表示處理間差異達(dá)0.01顯著水平Note:** on the column indicates that the difference between treatments reaches the significant level of 0.05, and *** on the column indicates that the difference between treatments reaches the significant level of 0.01

    該結(jié)果與我們前期篩選所得結(jié)果[11]是一致的。所以,改良后的鉬銻抗比色法,能有效地檢測(cè)不同磷濃度處理下植物組織磷含量,利用該方法可以有效地篩選具有磷吸收效率差異的作物品種。

    3 討論

    本試驗(yàn)通過改良前后的鉬銻抗比色法測(cè)定谷子新鮮幼嫩葉片和幼嫩根系的組織磷含量,發(fā)現(xiàn)改良后的鉬銻抗比色法所測(cè)的磷含量在一定范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系。用該方法對(duì)谷子新鮮幼嫩葉片、幼嫩根系、成熟葉片、成熟根系、新鮮幼穗、成熟莖稈及液氮冷凍后的相應(yīng)組織和谷子籽粒的磷含量以及不同磷濃度處理下的谷子材料的磷含量進(jìn)行測(cè)定,進(jìn)一步證實(shí)該方法具有良好的靈敏度和精密度。與改良前的鉬銻抗比色法相比,二者都選用H2SO4- H2O2對(duì)烘干的組織材料進(jìn)行消煮,不同點(diǎn)是,改良后的鉬銻抗比色法在消煮時(shí)直接對(duì)置于開氏瓶中的材料加5 mL濃H2SO4進(jìn)行碳化,然后加1 mL H2O2于370 ℃消煮爐上進(jìn)行消煮。先前的方法是先加蒸餾水潤(rùn)濕樣品,再加濃H2SO4進(jìn)行消煮,由于溫度過高,開氏瓶中水沸騰放熱,材料容易外噴沾到開氏瓶壁上,不能完全消煮,而造成材料損失,同時(shí)給試驗(yàn)人員帶來危險(xiǎn),污染了周圍環(huán)境。用改良后的鉬銻抗比色法檢測(cè)谷子不同組織的磷含量,發(fā)現(xiàn)不同谷子組織材料的磷含量存在差異,谷子新鮮幼穗中的磷含量最高達(dá)0.297 0 μg/g,成熟籽粒中的磷含量最低為0.013 1 μg/g。改良后的鉬銻抗比色法還可以有效地檢測(cè)不同磷濃度處理下組織磷含量,利用該方法也可以有效地篩選具有磷吸收效率差異的谷子品種。陳瑋[17]采用優(yōu)化的鉬銻抗比色法對(duì)污水中的總磷含量進(jìn)行了測(cè)定,標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.003 4,RSD為5.63%,大大提高了測(cè)定磷的靈敏度。本研究中的RSD范圍為0%~1.81%,精確度更高。鉬銻抗比色法還廣泛用于土壤、蔬菜及食品等材料的總磷含量的測(cè)定[23,24]??梢娿f銻抗比色法是目前測(cè)定不同材料磷含量最常見的方法,試驗(yàn)人員為探索最佳測(cè)定條件也在對(duì)該方法進(jìn)行不斷的優(yōu)化。

    隨著世界人口的增加,人們對(duì)糧食的需求也逐漸上升,然而在農(nóng)作物生產(chǎn)過程中,為提高糧食產(chǎn)量,普遍存在磷肥過量施用的現(xiàn)象。解決這些問題關(guān)鍵是提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中磷的利用效率,減少農(nóng)業(yè)生產(chǎn)給環(huán)境帶來的不利影響,在保證磷資源可持續(xù)利用的前提下提高世界范圍內(nèi)的糧食產(chǎn)量。因此,如何及時(shí)有效地監(jiān)測(cè)植物體內(nèi)的磷狀況對(duì)指導(dǎo)磷肥的合理施用至關(guān)重要。所以本試驗(yàn)對(duì)鉬銻抗比色法進(jìn)行了改良,提高了磷含量測(cè)定的靈敏度,該方法適合植物中低濃度磷的測(cè)定,可為不同谷子材料總磷含量測(cè)定提供依據(jù)和參考。

    隨著檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)步,X射線熒光光譜分析法、31P-NMR核磁共振測(cè)定植物體內(nèi)磷含量、基于無機(jī)磷熒光指示蛋白測(cè)定植物體內(nèi)磷含量及應(yīng)用葉綠素?zé)晒饧夹g(shù)測(cè)定植物中磷缺乏狀況等方法不斷用于同植物材料組織磷含量的測(cè)定當(dāng)中[16]。國(guó)內(nèi)對(duì)于植物組織磷含量的測(cè)定方法還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn),應(yīng)建立相應(yīng)規(guī)范的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn),以提高植物組織磷含量測(cè)定的精確性和可靠性。未來,更精確、更穩(wěn)定、更靈敏簡(jiǎn)便易行高效的植物組織磷含量測(cè)定方法需要與最新的智能技術(shù)結(jié)合。只有快速、高效、準(zhǔn)確地掌握體內(nèi)的磷狀況,才能減少對(duì)環(huán)境的污染、減緩磷肥的過量施用現(xiàn)象,才能促進(jìn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。

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