ATP 生物熒光檢測在重復使用器械清洗效果評價中的應用

王嘉，楊婧，畢麟

（吉林省通化市中心醫(yī)院，吉林 通化）

0 引言

重復使用醫(yī)療器械清洗效果的好壞直接關(guān)系到醫(yī)療安全，為此需要加強對器械清洗效果的評價，其中ATP 熒光檢測法為一種十分有效的評價方法。該方法具有操作簡便、快捷、靈敏度高等諸多優(yōu)點，使其在各醫(yī)療機構(gòu)中得到廣泛應用。ATP 生物熒光檢測法是通過細胞內(nèi)ATP 與熒光素酶反應發(fā)光的原理，進行光照值的測量，從而對微生物污染、有機物殘留程度等進行檢測[1]。ATP 在所有生物細胞中均有存在，為一種基本能量分子。該檢測技術(shù)利用熒光素酶-ATP 反應體系可將化學能轉(zhuǎn)化為光能。檢測時充分混合樣品以及提取劑，細胞壁或細胞膜裂解，釋放ATP，熒光素-熒光素酶與ATP 發(fā)生反應，ATP 釋放磷酸基團，熒光素發(fā)出熒光，用熒光檢測儀檢測熒光強度，并用相對發(fā)光單位來顯示結(jié)果，由此測出ATP 的含量，將微生物污染、血液及體液等有機物殘留程度反映出來，以此檢測器械或內(nèi)鏡管腔的清潔效果。

醫(yī)療器械清洗質(zhì)量直接關(guān)系到消毒滅菌效果。目前各大醫(yī)院紛紛使用全自動器械清洗機進行各種重復使用器械的清洗，大大減少手工清洗的工作量，但需要做好清洗效果評價工作。目前國內(nèi)評價重復使用器械清洗效果的方法主要有如下幾種：目測法、ATP 生物熒光檢測法、光源放大鏡檢測法、細菌計數(shù)法、鱟實驗法等。其中最后兩種方法操作復雜且需要較長時間，不適宜進行快速評價工作。目測法（肉眼裸視法和光源放大鏡觀察法）是消毒供應中心（central sterile supply department，CSSD）現(xiàn)場檢測方法中應用比較普遍的，但是效果不如ATP 生物熒光檢測法好。本研究以某三甲醫(yī)院為例，分析探討了ATP 生物熒光檢測法在重復使用醫(yī)療器械清洗效果評價中的應用效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗材料

醫(yī)院消毒供應中心中經(jīng)過全自動器械清洗機清洗后的醫(yī)用剪刀、鑷子、止血鉗、持針器以及各種其他重復使用醫(yī)療器械，清洗消毒后，待其溫度為常溫狀態(tài)之后隨機取樣進行檢測。

1.1.2 儀器與試劑

3MTMClean-TraceTMATP 生物熒光檢測儀，ATP 生物熒光采樣棒，均為進口產(chǎn)品。

1.2 檢測方法

1.2.1 目測法

由2 名工作人員分別通過肉眼裸視法、光源放大鏡觀察法（工具為帶光源的10 倍放大鏡）進行獨立觀察，并進行結(jié)果的記錄。肉眼裸視法合格標準：器械表面清潔光亮，無血跡、污物殘留；光源放大鏡觀察法合格標準：檢查過程中加強對器械關(guān)節(jié)部位、止血鉗齒部、管腔等處的觀察，器械無血跡、污染物殘留視為合格，否則為不合格。如果2 名工作人員的檢查結(jié)果均為合格，則視為合格，否則認定為不合格。

1.2.2 ATP 生物熒光檢測法

采用專用拭子涂抹采樣。按照采樣操作規(guī)程，采集樣品后，將采樣管放入到檢測槽中進行讀數(shù)，得到檢測結(jié)果。按照ATP 生物熒光檢測儀與采樣棒的推薦標準，ATP200RLU為合格。

1.3 統(tǒng)計學方法

建立數(shù)據(jù)庫的軟件工具為Execl2003, 進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，比較不同檢測法下醫(yī)療器械清洗合格率，兩種目測法和ATP 生物熒光法的檢測結(jié)果進行配對χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 檢測結(jié)果

本文共有440 份重復使用器械接受了目測法檢測，其中肉眼裸視法種共有97.27% 的器械清洗效果合格，放大鏡法共有95.45% 合格。共有320 份重復使用器械同時接受了ATP 生物熒光法檢測，共有91.25%合格。各類醫(yī)療器械清洗合格率在不同檢測法下存在差異，合格率范圍為50%-100%(表1）。

表1 不同方法檢測各類醫(yī)療器械的清洗效果

2.2 ATP 生物熒光檢測法與兩種目測法檢測結(jié)果比較

有320 份重復使用器械均接受了三種方法的檢測，其中ATP 生物熒光檢測，合格率為91.25%，顯著低于另外2 種檢測法，說明該方法檢測效果更好。

3 討論

重復使用醫(yī)療器械清洗消毒效果的好壞直接關(guān)系到醫(yī)院感染發(fā)生風險的高低，因此做好重復使用器械的清洗消毒具有至關(guān)重要的意義。美國AMMI ST79 要求[2]“重復使用醫(yī)療器械，第一步工作至關(guān)重要，即對器械進行徹底清潔、漂洗；醫(yī)務(wù)人員可以通過驗證手段對清潔效果進行考核評價，從而對該項工作質(zhì)量提供保障”。我國《消毒技術(shù)規(guī)范》[3]也明確指出“清洗徹底是保證消毒或滅菌成功的關(guān)鍵”。醫(yī)院消毒供應中心衛(wèi)生標準WA310.3 指出應當嚴格監(jiān)測器械清洗質(zhì)量，通過監(jiān)測結(jié)果對清洗消毒機的工作效果進行測試[4]。國內(nèi)外普遍使用的評價方法主要是進行有機污染物、微生物的檢測。消毒供應中心中現(xiàn)場檢測方法普遍應用目測法，快速便捷，但是效果有待提升。而ATP 生物熒光法能夠?qū)τ袡C污染物、微生物進行更加有效的檢測，并能夠使用客觀數(shù)字反映清洗質(zhì)量，該方法快捷、簡單、有效，值得推廣。

本研究顯示，不同器械在清洗合格率方面存在一定差異，分析原因為止血鉗、剪刀、管腔器械在手術(shù)中與患者的血液、肌肉組織直接接觸，因此有機物殘留更多；鑷子接觸肌肉組織、血液等有機物的機會少，因此殘留較少。

另外，消毒供應中心有比較完善的照明設(shè)施，光線充足，使得肉眼裸視效果接近于帶光源的放大鏡目測效果。而受到器械功能、與機體組織接受程度、殘留有機物量等因素的影響，清洗消毒效果也不同。相較于兩種目測法，ATP 生物熒光法檢測結(jié)果中的合格率更低，而兩種目測法無差異，與Lipscomb[5]的報導具有一致性。ATP 生物熒光檢測法檢出的不合格率更高，原因可能是目測法只能觀察到＞50μm 的污染物質(zhì)[6]，而ATP 生物熒光檢測法則不受污染物大小的影響，能夠更好的檢測出微生物殘留以及肉眼看不到的殘留物。目測法操作簡單，容易執(zhí)行，但與檢測人員的視力、細心程度等也有關(guān)系。ATP 生物熒光法則具有簡便、快捷、客觀、效果確切等多種優(yōu)點，工作人員經(jīng)過簡單培訓即可操作，且檢測儀器便于攜帶，適宜進行現(xiàn)場檢查，能夠快速發(fā)現(xiàn)清洗質(zhì)量問題，并積極采取措施改進工作質(zhì)量[7,8]。