杏仁罐頭不同儲(chǔ)藏時(shí)間本底苯甲酸含量的測(cè)定

李浩哲

（河南省口岸食品檢驗(yàn)檢測(cè)所 河南鄭州 450003）

1 前言

隨著生活水平的不斷提高，人們對(duì)食品安全質(zhì)量問(wèn)題越來(lái)越重視。我國(guó)對(duì)食品添加劑的使用有著嚴(yán)格的規(guī)定，GB 2760—2014《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》[4]作為食品添加劑添加量的重要依據(jù)之一，對(duì)食品檢測(cè)行業(yè)有重要作用。但有些食品添加劑是食品天然產(chǎn)生并非生產(chǎn)廠商添加，這些自帶的添加劑稱(chēng)為本底值，本底值給檢驗(yàn)結(jié)果的判定帶來(lái)了許多干擾[5]。

我國(guó)針對(duì)本底值的研究不多，本底值調(diào)查數(shù)據(jù)和檢測(cè)方法體系很不完整，在此方面的食品安全問(wèn)題時(shí)有發(fā)生，如“苯甲酸牛奶”“魷魚(yú)甲醛超標(biāo)”“硼砂門(mén)毒豆皮”等，這些問(wèn)題說(shuō)明食品中本底值的研究十分必要。

杏仁是薔薇科杏的種子，主要含蛋白質(zhì)、脂肪、糖、微量苦杏仁苷，脂肪組成主要是油酸和亞油酸[6]。正確食用杏仁，能夠生津止渴，潤(rùn)肺定喘，滑腸通便，降低患腸道癌的概率[6]。

苯甲酸（C6H5COOH）是食物中的一種天然成分，存在于自然界許多動(dòng)植物中，李子、紅梅等成熟的漿果中含有約0.05%的C6H5COOH。在新疆紅棗中天然C6H5COOH含量的研究中，蘇敏等[8]研究表明天然C6H5COOH的含量和紅棗的成熟程度有關(guān)。杏仁中的苦杏仁甙在苦杏仁甙酶的作用下遇水分解為氫氰酸（HCN）、C6H5COOH 及葡萄糖，HCN 有劇毒[9]。本文用液相法研究杏仁罐頭中杏仁的本底C6H5COOH的含量與儲(chǔ)藏時(shí)間的關(guān)系。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

儀器:Thermo UltiMate 3000高效液相色譜儀；梅特勒-托利多分析天平；

試劑:甲醇（CH3OH）（色譜純，默克股份兩合公司）；超純水；乙酸銨（CH3COONH4）溶液（0.02 mol/L）:稱(chēng)取1.54g CH3COONH4，加 1000mL 純水溶解，經(jīng) 0.45μm濾膜過(guò)濾；5 mL C6H5COOH 標(biāo)準(zhǔn)品（1.00 mg/mL）（中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院）；其他試劑均為分析純。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（0.2mg/mL）:準(zhǔn)確量取C6H5COOH標(biāo)準(zhǔn)品2 mL定容到10 mL容量瓶，配制成0.2 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

吸取C6H5COOH標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，配制成濃度分別為 0、0.2、0.4、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 μg/mL 的混合標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液。

2.3 色譜分析條件

色譜柱:Thermo Syncronis C18，250 mm×4.6 mm，5 μm；柱溫:28℃；流速:1.0 mL/min；進(jìn)樣量:10 μL；流動(dòng)相比例:0.02 mmol/L CH3COONH4＋CH3OH=（90∶10）；檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器；波長(zhǎng):230 nm。

2.4 樣品處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取約2 g（精確到0.001 g）試樣于50 mL離心管中，加水約25 mL，渦旋混勻，50℃水浴超聲20 min，冷卻至室溫后加亞鐵氰化鉀（K4Fe（CN）6）溶液 2 mL 和乙酸鋅（（CH3COO）2Zn）溶液 2 mL，混勻，離心5 min，將水相轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，在殘?jiān)屑铀?0 mL渦旋混勻后超聲5 min，離心5 min，將水相轉(zhuǎn)移到同一個(gè)50 mL容量瓶中，并用純化水定容至刻度線，混勻。取適量上清液過(guò)0.22 μm濾膜，待液相色譜測(cè)定。

3 結(jié)果與討論

3.1 流動(dòng)相的比例及色譜峰保留時(shí)間

流動(dòng)相比例為0.02 mmol/L CH3COONH4+CH3OH=90∶10時(shí)，譜峰分離效果良好，可滿足分離要求，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的色譜峰保留時(shí)間及光譜圖，詳見(jiàn)圖1。

圖1 標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的色譜峰保留時(shí)間及光譜圖

3.2 線性和回收

測(cè)定3次后數(shù)據(jù)顯示，標(biāo)準(zhǔn)曲線在0.4～20 μg/mL線性良好，線性相關(guān)系數(shù)（r）分別為 0.999 6、0.999 5、0.999 8，精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性試驗(yàn)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）均小于2%，平均加樣回收率，詳見(jiàn)表1。

表1 樣品的加標(biāo)回收率

3.3 精密度試驗(yàn)

取同一供試品溶液，連續(xù)測(cè)定5次，計(jì)算得到C6H5COOH的RSD值為1.8%。

3.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取同一供試品溶液，分別于 1、2、4、8、12 h，測(cè)定C6H5COOH的峰面積。計(jì)算得出C6H5COOH的RSD是1.66%，表明所制供試品溶液在12 h以?xún)?nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。

3.5 儲(chǔ)藏時(shí)間分析

同一批次的杏仁罐頭儲(chǔ)藏不同時(shí)間后，苯甲酸的含量測(cè)定結(jié)果詳見(jiàn)表2。

表2 杏仁罐頭中本底C6H5COOH的含量

4 結(jié)果與討論

C6H5COOH是一種常用的食品添加劑，其含量是判定食品合格與否的重要標(biāo)準(zhǔn)[10]。GB 2760—2014作為食品添加劑添加量的重要依據(jù)之一，對(duì)食品檢測(cè)行業(yè)具有重要的指導(dǎo)作用，該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定杏仁罐頭添加劑中不得使用C6H5COOH。但C6H5COOH是食品自帶的天然添加劑（本底）[11]，其含量對(duì)C6H5COOH的測(cè)定有很大影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，同一批次杏仁罐頭杏仁中本底C6H5COOH的含量與儲(chǔ)藏時(shí)間的關(guān)系為1個(gè)月＜2個(gè)月＜3個(gè)月。

杏仁罐頭杏仁中本底C6H5COOH含量隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的增長(zhǎng)而增加，在檢測(cè)杏仁罐頭中C6H5COOH的含量時(shí)要考慮C6H5COOH本底值的帶入，謹(jǐn)慎對(duì)待測(cè)量結(jié)果。