直接藥敏試驗(yàn)法對(duì)血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌的鑒定及藥敏試驗(yàn)效果分析

顧洪芹

（山東省東營(yíng)市廣饒縣人民醫(yī)院 山東 東營(yíng) 257300）

細(xì)菌感染是我國(guó)臨床較為常見的一種感染疾病，其具有較高的發(fā)病率與致死率[1]。如何快速、準(zhǔn)確的進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)，是臨床微生物學(xué)中急需要解決的重要問題[2]。根據(jù)相關(guān)臨床報(bào)告指出，將直接藥敏試驗(yàn)法應(yīng)用于血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌鑒定中，可獲得滿意的檢驗(yàn)效果，有利于減少檢測(cè)所需時(shí)間，提高相關(guān)疾病的臨床治療效果[3]。但此方面報(bào)道較少，依然缺乏參考依據(jù)。在本次實(shí)驗(yàn)中，對(duì)本院于2017 年9 月—2019 年9月收治的84 例發(fā)熱并全身伴有感染患者的細(xì)菌鑒定效果展開分析，其目的在于觀察直接藥敏試驗(yàn)法對(duì)于血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)的效果，現(xiàn)介紹如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

抽取本院于2017 年9 月—2019 年9 月收治的84 例發(fā)熱并全身伴有感染患者中，將血培養(yǎng)陽性標(biāo)本混合于專用接種水中，并借助鑒定板做好接種工作。全部患者先后采用常規(guī)藥敏試驗(yàn)法和直接藥敏試驗(yàn)法對(duì)血培養(yǎng)陽性標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌鑒定。患者中女性35例，男性49例，年齡范圍19～79歲，中位年齡（43.76±4.59）歲。對(duì)患者的基礎(chǔ)資料通過統(tǒng)計(jì)學(xué)對(duì)比分析后顯示，差異不顯著（P ＞0.05），可進(jìn)行對(duì)比。選擇的所有發(fā)熱并全身伴有感染患者及其家屬皆簽字同意，并自愿參與，同時(shí)經(jīng)由醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)同意。

1.2 主要儀器及試劑

VITEK 2 Compact 全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥物敏感分析儀（梅里埃，法國(guó)）；全自動(dòng)血培養(yǎng)儀；HEAL Force 二氧化碳培養(yǎng)箱（力康，中國(guó)）；生物安全柜；高壓滅菌鍋；血瓊脂平板：

MH 培養(yǎng)基：抗生素紙片：鑒定板。

1.3 方法

常規(guī)藥敏試驗(yàn)法：采用一次性注射器抽取0.2ml 陽性血液樣本，接種于巧克力平板、血平板等，后將其置于濃度為5%二氧化碳，室溫為35℃環(huán)境中，放置20 ～24h。待菌落生成后進(jìn)行革蘭染色、涂片與鏡檢等，根據(jù)血培養(yǎng)陽性標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果采用全自動(dòng)微生物鑒定儀進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。

直接藥敏試驗(yàn)法：采用一次性注射器抽取0.2ml 陽性血液樣本放置在無菌試管中，通過離心機(jī)以1500r/min 的速度進(jìn)行離心處理，保持5min 左右。待吸取上清液后，將離心機(jī)速率調(diào)節(jié)為3000r/min 后，再次進(jìn)行離心處理，保持15min 左右，隨后去除上清液取沉淀物，將濃度為0.9%的生理鹽水加入其中，洗滌2 次。洗滌完成后，收集細(xì)胞黏液進(jìn)行革蘭染色涂片，同時(shí)仔細(xì)觀察細(xì)菌形態(tài)，貼上相應(yīng)抗生素藥敏紙片后進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）記錄兩種細(xì)菌鑒定方式對(duì)于血培養(yǎng)陽性標(biāo)本細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)結(jié)果。病原菌類別包括革蘭陽性球菌（鏈球菌、葡萄球菌、腸球菌），革蘭陰性桿菌（非發(fā)酵菌、腸桿菌）。（2）記錄常規(guī)藥敏試驗(yàn)法和直接藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)時(shí)間。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 84 例患者的藥敏結(jié)果符合率對(duì)比

經(jīng)過對(duì)常規(guī)藥敏試驗(yàn)法和直接藥敏試驗(yàn)法的藥敏結(jié)果符合率進(jìn)行比較，其革蘭陰性菌符合率為96.92%，革蘭陽性球菌符合率為94.74%，細(xì)菌鑒定總符合率為95.24%，直接藥敏試驗(yàn)法與常規(guī)藥敏試驗(yàn)法結(jié)果符合率均較高，詳情如表1 所示。

表1 不同細(xì)菌鑒定方式的符合率對(duì)比（例）

2.2 84 例患者的檢測(cè)時(shí)間對(duì)比

經(jīng)過對(duì)常規(guī)藥敏試驗(yàn)法和直接藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)時(shí)間進(jìn)行比較，常規(guī)藥敏試驗(yàn)法檢測(cè)所需時(shí)間為（50.78±8.13）h，直接藥敏試驗(yàn)法檢測(cè)所需時(shí)間為（16.98 土2.42）h，相較于常規(guī)藥敏試驗(yàn)法，直接藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)所需時(shí)間明顯更短，差異顯著（P ＜0.05），如表2 所示。

表2 2 種藥敏試驗(yàn)法檢測(cè)時(shí)間比較（±s，h）

表2 2 種藥敏試驗(yàn)法檢測(cè)時(shí)間比較（±s，h）

組別 例數(shù) 檢測(cè)時(shí)間直接藥敏試驗(yàn)法 84 16.98 土2.42常規(guī)藥敏試驗(yàn)法 84 50.78±8.13 t-36.520 P-0.001

3.討論

感染已成為我國(guó)人群現(xiàn)如今患病的重要因素之一，在感染的臨床診斷與治療中，最為關(guān)鍵的操作是血培養(yǎng)[4]。我國(guó)各大醫(yī)院均通過全自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)提升血培養(yǎng)的陽性率[5]。然而，運(yùn)用常規(guī)細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)方式，一般需要大概2 ～3d 時(shí)間，對(duì)于一些特殊的細(xì)菌，即便延長(zhǎng)細(xì)菌鑒定時(shí)間，也難以獲得確切的細(xì)菌鑒定結(jié)果[6]。這不但會(huì)為相關(guān)疾病的診斷與治療造成極大的不便，同時(shí)也會(huì)一定程度上延誤患者的治療時(shí)間[7]。鑒于此，臨床微生物學(xué)中亟待解決的重要問題是如何快速、準(zhǔn)確、科學(xué)的進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)[8]。

直接法作為個(gè)性化的發(fā)熱并全身感染等檢驗(yàn)方式[9]。其主要通過直接將血培養(yǎng)陽性標(biāo)本混摻于專用的接種水接種于平板上，并在貼上抗生素藥敏紙片后直接行細(xì)菌鑒定，直接法能夠有效的縮短常規(guī)分離操作時(shí)間與藥敏試驗(yàn)時(shí)間，使得檢驗(yàn)速度得到很大程度的提升[10]。在本次研究中，比較不同細(xì)菌鑒定方式的檢驗(yàn)結(jié)果，符合率均較高，相較于常規(guī)藥敏試驗(yàn)法，直接藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)所需時(shí)間明顯更短。提示直接藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)效果較為理想，有利于減少檢測(cè)所需時(shí)間，提高相關(guān)疾病的臨床治療效果。

研究結(jié)果顯示，直接藥敏試驗(yàn)法效果較為理想，有利于縮短細(xì)菌鑒定時(shí)間，兩種細(xì)菌鑒定方式在臨床中相互促進(jìn)、互為補(bǔ)充，可為早期用藥治療方案的制定提供可靠的參考依據(jù)，值得臨床應(yīng)用。