金絲李果實(shí)化學(xué)成分的研究

譚雪　甘飛　陳玉　劉新橋　楊光忠

摘要：采用溶劑提取法、正反相硅膠柱、半制備高效液相等多種色譜技術(shù)對(duì)金絲李果實(shí)的化學(xué)成分進(jìn)行了分離純化，得到了一個(gè)新化合物和一個(gè)已知化合物，并根據(jù)理化性質(zhì)和現(xiàn)代波譜技術(shù)進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，分別鑒定為金絲李內(nèi)酯甲（2）和7- epi- isogarcinol（1）。

關(guān)鍵詞：金絲李果實(shí);化學(xué)成分;多環(huán)異戊烯基間苯三酚類化合物

中圖分類號(hào)：R29 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-9944（ 2020） 2-0185-03

1 引言

藤黃屬植物多為喬木或灌木，全世界約有450種，主要分布于亞洲熱帶地區(qū)、非洲南部和波利尼西亞西部[1]。金絲李（Garcinia paucineru13）屬于藤黃科藤黃屬植物，為我國(guó)傳統(tǒng)壯藥，自然生長(zhǎng)僅見于石灰?guī)r山地森林中，主要分布在廣西和云南部分地區(qū)，具有治療胃病、燒傷、消腫、清熱解毒等作用[2，3]。目前對(duì)金絲李的化學(xué)成分研究主要集中在其葉和莖皮等部位，分離得到的多環(huán)異戊烯基間苯三酚類化合物（ PPAPs）和口山酮對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制活性[4]，而對(duì)金絲李果實(shí)的相關(guān)化學(xué)成分和藥理活性研究較少，且藤黃屬植物的果實(shí)是PPAPs的重要來源[5]。為了進(jìn)一步尋找該植物抗癌作用的活性成分，擴(kuò)大該藥用植物的藥用部位，本文對(duì)金絲李果實(shí)的化學(xué)成分進(jìn)行了研究，從石油醚提取物分離得到一個(gè)新化合物金絲李內(nèi)酯甲（2），一個(gè)已知化合物7- epi-isogarcinol（1）。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

金絲李果實(shí)采自廣西壯族自治區(qū)靖西縣邦亮保護(hù)區(qū)，經(jīng)中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所韓春艷博士鑒定為藤黃科藤黃屬金絲李植物果實(shí)（Garcinia paucinervis Chun&F.C.How）.

核磁共振波譜儀（Bruker AVANCEIII- 500 MHz和Bruker AVANCEIIITM-600Hz全數(shù)字化超導(dǎo)核磁共振儀，布魯克公司），高效液相色譜儀（ Ultimate 3000半制備型，美國(guó)戴安公司，VWD，DAD檢測(cè)器），半制備型色譜柱為YMC - Pack ODS -A column（ 250×10mm，5μm），硅膠（200～300，300～400目，青島海洋化工廠），薄層色譜硅膠（青島海洋化工廠產(chǎn)品），ODS硅膠（50 μm，日本YMC公司），石油醚、乙酸乙酯、甲醇（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），甲醇、乙腈（色譜純，昌泰興業(yè)有限公司）。

2.2 提取與分離

金絲李干燥果實(shí)11.2kg粉碎后用95%乙醇室溫浸泡三次，每次24 h，減壓濃縮提取液，得乙醇提取物2.9 kg。乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，得到石油醚提取物（750 g），乙酸乙酯提取物（1450 g）。將石油醚提取物（750 g）經(jīng)正相硅膠柱色譜（300～400目）分離，石油醚一乙酸乙酯（體積比49：1一0：1）梯度洗脫，TLC檢測(cè)后合并相同組分，共收集到10個(gè)組分（Fr. 1—Fr. 10）. Fr. 7（26.8 9）經(jīng)過反復(fù)的正、反相硅膠柱色譜分離和半制備HPLC得到化合物1（17.Omg），F(xiàn)r. 4（9. 58 9）經(jīng)過反復(fù)的正相硅膠柱色譜分離和半制備HPLC得到化合物2（1. 86 mg）.

3 結(jié)構(gòu)鑒定結(jié)果

化合物1：黃色粉末，由HR- ESI- MS得到準(zhǔn)分子離子峰m/z：625. 3502 [M+Na]+（計(jì)算值625. 3505），推斷化合物l的分子式為C38 Hs。06，不飽和度為14。由IH NMR圖譜可知，化合物1具有一個(gè)1，3，4-三取代的苯環(huán)[δH8.14 （IH，s），7.29（1H，d，J=8.O Hz），7.76（IH，d，J=8.O Hz）]，三個(gè)烯氫質(zhì)子[8H5. 11（2H，br s），5.39 （1H，br s）]，十個(gè)單峰甲基（8H1. 72～0. 82）。由13C NMR圖譜和DEPT圖譜可知化合物1存在一個(gè)非共軛的羰基碳信號(hào)[δc 207. 3（s）]，一個(gè)共軛的羰基碳信號(hào)[δc 195.0（s）]，一個(gè)3，4-二羥基苯甲?；盘?hào)[δc 193. 2（s），130. 8（s），116. 8（d），147.9（s），153. 7（s），116. 4（d），123. 4（d）]，五個(gè)亞甲基信號(hào)[δc 42.9（t），25. 9（t）， 28.3 （t）， 28.5（t），30. 2（ t）]。由以上NMR數(shù)據(jù)推測(cè)化合物1是具有雙環(huán)[3.3.1]壬烷骨架的B型PPAPs[6]。將化合物1的NMR數(shù)據(jù)同化合物isogarcinol[7]對(duì)比發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)大致相同，唯一的區(qū)別是兩者M(jìn)e-22的化學(xué)位移差異較大，化合物1的C-22化學(xué)位移為16.5 ppm，而7- epi- isogarcinol為26.1 ppm.相差9.6 ppm，推測(cè)化合物1是isogarcinol的C-7位差向異構(gòu)體，當(dāng)化合物1的7位異戊烯基處于e鍵，與同處于a鍵的Me- 22產(chǎn)生γ- gauche效應(yīng)，使Me- 22的化學(xué)位移值向高場(chǎng)發(fā)生顯著移動(dòng)，由'H-NMR和'3C_NMR圖譜給出化合物1的C-7的化學(xué)位移為43.7 ppm，H2 -8兩個(gè)H的化學(xué)位移相差0.68ppm，可以確定C-7位上的異戊烯基為β構(gòu)型[6]。綜合以上數(shù)據(jù)，化合物1的結(jié)構(gòu)鑒定如圖l所示，鑒定為7 - epi- isogarcinol，具體NMR數(shù)據(jù)見表1。

化合物2：無色油狀，由HR- ESI- MS得到準(zhǔn)分子離子峰m/z 319. 26315[M+Na]+（計(jì)算值319. 26316），推斷化合物2的分子式為C21H34O2，不飽和度為5。NMR數(shù)據(jù)顯示化合物2含有一個(gè)法呢基[δH5. 10（3H， t，J=6.6 Hz），1.69（ 3H，s），1.61 （3H，s） ，1. 60（3H，s），1. 62（3H，s），2.43（ 2H， m） ，1. 99（4H，m） ，2. 07 （4H， m）;δc136.3（s），135.3（s），131.5（s），22.7（t），39.9（t），26.7（t），39.8（t），26.9（t），25.9（q），17. 9（q）.16. 2（q），16.2（q）]和一個(gè)單峰甲基[8H1. 41（3H，s）;δc 25.8（C-22）]。除去上述信號(hào)以外，還有一個(gè)羰基信號(hào)[δc 177. 0]，一個(gè)連氧季碳信號(hào)[ac 86.9]，三個(gè)亞甲基[δc 33.2，29.3，41.1]。由'H-1H COSY和HSQC圖譜（圖2）可推出- CH2CH2_和一CH2CH2CH=結(jié)構(gòu)片段，可分別歸屬δc33.2，29.3，41.1為C-3、C-4和C-6的信號(hào)。除去3個(gè)雙鍵和1個(gè)羰基，化合物2還需要一個(gè)不飽和度，由HMBC圖譜（圖2）可以觀察到H-4與δc177.O（C-o），86.9（C-2）相關(guān)以及CH。-22與δc41.1（C-6），86.9（C-2）相關(guān)，說明C-2，C-3，C-4和C-5構(gòu)建一個(gè)五元內(nèi)酯環(huán)，同時(shí)22位的甲基和C-6到C-21的長(zhǎng)鏈多烯片段連接在C-2位上，因此可以鑒定化合物2的結(jié)構(gòu)如圖1所示，命名為金絲李內(nèi)酯甲，具體NMR數(shù)據(jù)見表2。

4 結(jié)語(yǔ)

迄今為止，關(guān)于藤黃屬果實(shí)的化學(xué)成分研究多集中于大苞藤黃，多花山竹子，人面果等植物[9-13]，其中對(duì)于金絲李果實(shí)的探討，化學(xué)成分分離純化研究的文獻(xiàn)較少。本實(shí)驗(yàn)對(duì)金絲李果實(shí)石油醚提取物進(jìn)行了化學(xué)成分的研究，得二個(gè)化合物，運(yùn)用NMR、MS等波譜技術(shù)鑒定結(jié)構(gòu)為7 - epi - isogarcinol（1）和金絲李內(nèi)酯甲（2）。本文首次報(bào)道了金絲李果實(shí)的化學(xué)成分，這為擴(kuò)大該植物的藥用部位提供了一定的理論依據(jù)。

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作者簡(jiǎn)介：譚雪（1995-），女，中南民族大學(xué)藥學(xué)院碩士研究生。

通訊作者：楊光忠（1968-），男，博士，教授，主要從事天然產(chǎn)物化學(xué)的研究工作。