羧寧液體傷口敷料抑菌活性的研究

楊朝雪，馬 敏，張春陽，侯法利，范建立*

（河南承東生物科技有限公司，河南 鄭州 450000）

羧寧為本公司自主研發(fā)的一款針對表面創(chuàng)傷的液體傷口敷料，其主要成分為聚氨基葡萄糖和有機硅抗菌劑。聚氨基葡萄糖被廣泛應(yīng)用，研究表明聚氨基葡萄糖是殼聚糖的衍生物，對殼聚糖進行季銨化，是殼聚糖化學(xué)改性的主要領(lǐng)域之一，具有良好的溶解性能易溶于水，具有良好的生物相溶性，具有無毒性，抗菌活性高和使用范圍廣，逐漸被醫(yī)藥行業(yè)廣泛應(yīng)用[1]；有機硅抗菌劑是一種新型陽離子表面活性劑，具有耐高溫，持久的效果，抑菌范圍廣，能有效抑制革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和真菌，與聚氨基葡萄糖合用抗菌作用更強，起到雙重抗菌作用?，F(xiàn)對羧寧的抑菌性進行研究，報告如下。

1 儀器與材料

1.1 儀器

FA2004電子天平，上海津平設(shè)備儀器有限公司；XFH-30CA電熱式壓力蒸汽滅菌鍋，浙江新豐醫(yī)療器械有限公司；BCC-1100112-X生物安全柜，山東博科生物產(chǎn)業(yè)有限公司；SHP-80生化培養(yǎng)箱，北京中興偉業(yè)儀器有限公司；XK96-A快速混勻器，江蘇新康醫(yī)療器械有限公司。

1.2 培養(yǎng)基

胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基（TSA）、沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（SDA）均購自北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司產(chǎn)品。

1.3 菌種

大腸埃希菌(Escherichia coli) [CMCC(B)44102]、金黃色葡萄球菌(S t a p h y l o c o c c u s a u r e u s)[CMCC(B)26003]、白色念珠菌(Candida albicns)[CMCC(B)98001]均來源于北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司。

2 實驗內(nèi)容

2.1 菌液的制備

取適量經(jīng)34℃培養(yǎng)24 h的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌和白色念珠菌平板培養(yǎng)物接入1 ml 0.9%無菌NaCl溶液（以下簡稱溶劑）中，用溶劑繼續(xù)稀釋100倍，制成5×105～5×106cfu/ml的菌液，備用。

2.2 方法

取供試品5 ml和對照液（無菌水）5 ml各3瓶，取上述制備好的菌液，分別在每個供試品和對照液中滴加100 μl，均勻混合，開始計時，作用20 min。將作用后的菌液用無菌水進行10倍和20倍稀釋，分別取稀釋后的菌液0.25 ml，均勻涂布在TSA（大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌）和SDA（白色念珠菌）平板上。TSA平板置于34℃，SDA平板置于25℃培養(yǎng)2～3天，對菌落計數(shù)并計算抑菌率。

2.3 計算抑菌率

抑菌率≥50～90%，產(chǎn)品有抑菌作用；抑菌率≥90%，產(chǎn)品有較強的抑菌作用。

3 結(jié) 果

表1顯示，大腸埃希菌10倍稀釋對照組與20倍稀釋對照組菌落數(shù)均為0。金黃色葡萄球菌10倍稀釋對照組與20倍稀釋對照組菌落均為0。白色念珠菌10倍稀釋對照組與20倍稀釋對照組菌落數(shù)均為0；抑菌率≥90%，說明羧寧對大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌均有較強的抑菌作用。

表1 羧寧抑菌性測試結(jié)果

4 討 論

羧寧通過在創(chuàng)面表面形成保護層，起物理屏障作用，對創(chuàng)面有直接的表面性作用。研究表明，殼聚糖衍生物比殼聚糖的抑菌性強，殼聚糖季銨化形成了陽離子型高聚物，通常細菌表面帶負電荷，陽離子性物質(zhì)的加入改變了菌體的pH環(huán)境，改變細菌細胞壁的通透性，破壞細菌的細胞膜，因而產(chǎn)生抑菌作用[5]。周景潤等研究表明，季銨化殼聚糖中帶正電荷的季銨基團能夠明顯的促進殼聚糖分子和菌體細胞壁負離子間的相互結(jié)合，致使菌體死亡。謝瑜等研究表明，有機硅抗菌劑是一種新型的陽離子表面活性劑，它具有耐高溫、耐水洗、持久的效果，抑菌范圍廣，能有效的抑制革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和真菌[7]。目前有機硅抗菌劑已應(yīng)用到醫(yī)療行業(yè)，且對皮膚安全性高，無刺激。本研究結(jié)果顯示，羧寧對大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌均有較強的抑菌作用。

綜上所述，推斷羧寧的抑菌性機理：羧寧對細菌、真菌具有很強的吸附作用，可以改變細胞壁的通透性，破壞細胞膜，使細胞內(nèi)代謝產(chǎn)物流出，從而達到抑菌的作用。