氣相色譜法測(cè)定蘋果中的有機(jī)磷

陳懇

摘 要：通過(guò)實(shí)驗(yàn)，建立了測(cè)定蘋果中敵敵畏、三唑磷、樂(lè)果等8種有機(jī)磷的氣相色譜法。蘋果樣品用乙腈提取，水浴旋蒸至近干，用丙酮溶解，氣相色譜火焰光度檢測(cè)器（GC-FPD）檢測(cè)，外標(biāo)法定量。在0.01～0.15 mg/kg的添加水平，8種農(nóng)藥的回收率在81.8%～118.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在1.4%～9.8%，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761-2008，該方法的檢出限為0.01～0.05 mg/kg。該方法的靈敏度、準(zhǔn)確度和精密度均符合農(nóng)藥殘留測(cè)定的要求，可以對(duì)蘋果中這8種有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量進(jìn)行有效監(jiān)控。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法;蘋果;有機(jī)磷

1 食品安全現(xiàn)狀

民以食為天，食品質(zhì)量是決定人生存質(zhì)量最重要的因素之一。歷史上曾發(fā)生多次令人震驚的食品污染事件，如日本鎘米引起的“痛痛病”事件，多氯聯(lián)苯污染造成的“米糠油”事件，甲基汞污染魚(yú)導(dǎo)致的“水俁病”事件等，都曾對(duì)受害人群的生命和健康造成了嚴(yán)重的后果。比利時(shí)肉雞中二噁英污染事件的發(fā)生再次引起人們對(duì)食品污染問(wèn)題的關(guān)注。我國(guó)人口眾多，人均可耕地面積0.08 hm2，為世界人均的1/3。改革開(kāi)放以來(lái)，中國(guó)人經(jīng)過(guò)自己的努力，用全球7%的耕地養(yǎng)活了世界22%的人口，取得了舉世矚目的巨大成就。在基本解決了溫飽問(wèn)題之后，人們已經(jīng)注意食品的質(zhì)量問(wèn)題，不但食品的營(yíng)養(yǎng)成分受到關(guān)注，其可能存在的污染更被越來(lái)越多的人們所重視[1]。

隨著科技的進(jìn)步，人們對(duì)于食品安全日益看重。在崇明島定位為“世界級(jí)生態(tài)島”之后，怎樣才能吃得安心，吃得放心，成為了該地區(qū)家家戶戶關(guān)注的熱點(diǎn)。由于崇明區(qū)地理氣候條件適宜，蔬菜水果生產(chǎn)中的病蟲(chóng)草害較多，再加上部分農(nóng)民缺乏科學(xué)使用農(nóng)藥的意識(shí)，導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境污染問(wèn)題較為突出[2]，存在為了追求產(chǎn)量而濫用農(nóng)藥的情況。就如同任何事物都有兩面性一樣，農(nóng)藥的發(fā)明和使用無(wú)疑大大提高了農(nóng)作物的產(chǎn)量，但隨著農(nóng)藥的大量和不合理使用，食品中的農(nóng)藥殘留對(duì)人類健康造成的負(fù)面影響也日益顯露[3-4]。因此，農(nóng)藥殘留檢測(cè)就成了監(jiān)管方識(shí)別水果蔬菜安全與否的有利依據(jù)。其中，氣相色譜法是農(nóng)藥殘留檢測(cè)不可或缺的重要方法之一。

2 實(shí)驗(yàn)部分

2.1 儀器和試劑

安捷倫7890B氣相色譜儀，自動(dòng)進(jìn)樣器7693，附FPD檢測(cè)器（美國(guó)Agilent公司）;HP-5色譜柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm，美國(guó)Agilent公司）;分析天平（MTTTLER TOLEDO MS205DU）;英國(guó)Parker Domnick Hunter高純氫氣發(fā)生器（UHP-35ZA-S）;美國(guó)JUN-AIR靜音空壓機(jī)（OF302-4M）;真空泵（瑞士步琦有限公司，R-100）;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（瑞士步琦有限公司，R-100）;水浴鍋（瑞士步琦有限公司，R-100）;移液槍（1～10 μL，100～1000 μL，芬蘭Thermo公司），各種玻璃儀器若干。

有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品詳細(xì)信息如表1。

2.2 色譜條件

HP-5石英毛細(xì)管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm）;載氣（N2，純度≥99.999%），氫氣流速75 mL/min;空氣流速100 mL/min;柱氣流+尾吹氣為60 mL/min;不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量1 μL;進(jìn)樣口溫度：220 ℃;檢測(cè)器溫度280 ℃。程序升溫：60℃150℃（保持2min）270℃（保持12min）。

2.3 分析步驟

標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：分別吸取

100 ?g/mL的敵敵畏、三唑磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 μL，樂(lè)果、毒死蜱（先吸取0.1 mL的毒死蜱標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 μg/mL）于棕色小瓶中，加入0.9 mL丙酮，混勻，即可得到100 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)使用液）標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液2 μL，水胺硫磷標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液3 μL，丙溴磷、磷胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液4 μL，伏殺硫磷5 μL于10 mL容量瓶中，加丙酮定容，混勻，得到0.01 ?g/mL敵敵畏、三唑磷;0.02 ?g/mL樂(lè)果、毒死蜱;0.03 ?g/mL水胺硫磷;0.04 ?g/mL丙溴磷、磷胺;0.05 ?g/mL伏殺硫磷的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將混標(biāo)一式三份，將其分別注入氣相色譜儀中測(cè)定。得到3條標(biāo)準(zhǔn)曲線，以峰面積的平均值建立校正曲線。

樣品處理：準(zhǔn)確稱取25.00 g，加入50.0 mL乙腈，在勻漿機(jī)中高速勻漿2 min后，用濾紙過(guò)濾，濾液收集到裝有5～7 g氯化鈉的100 mL比色管中，收集濾液40～50 mL，劇烈震蕩1 min，靜置30 min。從比色管中吸取10.00 mL乙腈，放入梨形瓶中，以80 ℃水浴旋蒸至近干，加入2.0 mL丙酮，將其完全轉(zhuǎn)移至15 mL刻度離心管，再用約3 mL丙酮分3次沖洗梨形瓶，轉(zhuǎn)移至離心管，最后定容至5 mL，用0.2 μm濾膜過(guò)濾后移入自動(dòng)進(jìn)樣器樣品瓶，供色譜測(cè)定。

2.4 色譜測(cè)定

依據(jù)上述色譜條件，分別測(cè)定各標(biāo)準(zhǔn)溶液（平行測(cè)定3次）、混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（平行測(cè)定3次）及樣品溶液（2個(gè)樣品空白，檢出限加標(biāo)平行測(cè)定6次，3倍檢出限平行測(cè)定6次），自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣1 μL，以保留時(shí)間定性，外標(biāo)法定量。

3 結(jié)果與討論

3.1 混標(biāo)溶液色譜圖

依據(jù)NY/T 761-2008的標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行色譜條件優(yōu)化，這8種有機(jī)磷都得到了很好的分離?；鞓?biāo)圖譜見(jiàn)圖1。其中，5.384 min出的峰是敵敵畏，5.923 min出的峰是丙溴磷，11.162 min出的峰是樂(lè)果，13.049 min及14.430 min出的峰是磷胺，14.594 min出的峰是毒死蜱，16.519 min出的峰是水胺硫磷，17.979 min出的峰是三唑磷，20.300 min出的峰是伏殺硫磷。

3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制的優(yōu)化

直接用丙酮配制標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液，校正樣品時(shí)，發(fā)現(xiàn)蘋果中的檢出限加標(biāo)回收率都在200%左右，整整高出了1倍，查找相關(guān)文獻(xiàn)[5-6]后發(fā)現(xiàn)，存在“生物富集現(xiàn)象”，即：通過(guò)生態(tài)系統(tǒng)中食物鏈或食物網(wǎng)的各營(yíng)養(yǎng)級(jí)，使某些污染物，如放射性化學(xué)物質(zhì)和合成農(nóng)藥等，在生物體內(nèi)逐步濃集增大。蘋果中也發(fā)生了這一現(xiàn)象。

優(yōu)化措施為：將標(biāo)準(zhǔn)曲線改為隨行標(biāo)曲，即：將8種有機(jī)磷農(nóng)藥混標(biāo)加入蘋果基質(zhì)中同時(shí)處理，校正時(shí)以3條標(biāo)準(zhǔn)曲線的峰面積的平均值建立校正曲線。3倍檢出限的加標(biāo)回收率實(shí)驗(yàn)與上述方法一致。

3.3 線性測(cè)定結(jié)果

按照標(biāo)準(zhǔn)NY/T 761-2008，敵敵畏、三唑磷的檢出限為0.01 mg/kg，樂(lè)果、毒死蜱的檢出限為0.02 mg/kg，水胺硫磷的檢出限為0.03 mg/kg，丙溴磷、磷胺的檢出限為0.04 mg/kg，伏殺硫磷的檢出限為0.05 mg/kg。上述8種有機(jī)磷農(nóng)藥的檢出限校正曲線及其相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表2，3倍檢出限的校正曲線及相關(guān)系數(shù)見(jiàn)表3。

3.4 加標(biāo)回收率和精密度

檢出限的回收率和3倍檢出限的回收率見(jiàn)表4和表5。

優(yōu)化方法，富集現(xiàn)象消除，1倍檢出限、3倍檢出限的加標(biāo)回收均符合回收率要求（60%～120%）。

4 結(jié)論

有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑的優(yōu)點(diǎn)可概括為：品種多，藥效高;防治對(duì)象多，應(yīng)用范圍廣;作用方式多，藥害輕;在環(huán)境中降解快、殘毒低。由于這些特點(diǎn)，有機(jī)磷農(nóng)藥在殺蟲(chóng)劑中占據(jù)了相當(dāng)重要的地位，至今仍是世界上生產(chǎn)和使用最多的農(nóng)藥品種。我國(guó)使用有機(jī)磷農(nóng)藥的歷史已有30余年，生產(chǎn)的品種將近40個(gè)[7]。

隨著分析技術(shù)的發(fā)展，有機(jī)磷農(nóng)藥殘留分析方法的靈敏度和簡(jiǎn)便性不斷提高，本實(shí)驗(yàn)建立的分析方法簡(jiǎn)便快捷，以乙腈為提取液，氣相色譜火焰光度檢測(cè)器測(cè)定，21 min內(nèi)8種有機(jī)磷農(nóng)藥完全分開(kāi)，方法回收率81.8%～118.3%，最低檢出限0.01～0.05 mg/kg，精密度1.4%～9.8%。滿足農(nóng)藥殘留分析檢測(cè)的要求。

參考文獻(xiàn)

[1]仲維科，郝戩，孫梅心，等.我國(guó)食品的農(nóng)藥污染問(wèn)題[J].農(nóng)藥，2000（7）：1-4.

[2]張曉笑.上海崇明區(qū)蔬菜農(nóng)藥殘留安全調(diào)查研究[J].上海農(nóng)業(yè)科技，2019（3）：31-32，83.

[3]科納徹，梅斯.人體暴露于食品中化學(xué)污染物的評(píng)估[J].食品添加劑和污染物，1993，10（1）：5-15.

[4]王緒卿，林媛真，陳惠京.稻米中殺蟲(chóng)雙殘留量測(cè)定方法——Ⅱ.氣相色譜法[J].衛(wèi)生研究，1986（04）：31-34.

[5]郜紅建，蔣新.有機(jī)氯農(nóng)藥在南京市郊蔬菜中的生物富集與質(zhì)量安全[J].環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2005，25（1）：90-93.

[6]南淑清，多克辛，李紅亮，等.兩種有機(jī)氯農(nóng)藥在污水灌溉區(qū)蔬菜中的殘留及生物富集[J].中國(guó)環(huán)境監(jiān)測(cè)，2007（5）：59-62.

[7]華小梅，單正軍.我國(guó)農(nóng)藥的生產(chǎn)，使用狀況及其污染環(huán)境因子分析[J].環(huán)境科學(xué)進(jìn)展，1996（2）：33-45.