• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    低共熔溶液提取鐵觀音茶多酚工藝的響應(yīng)面法優(yōu)化

    2020-06-19 07:47:36阮懌航吳亮宇魯靜黃秀紅劉麗辰林金科
    關(guān)鍵詞:成分分析抗氧化活性鐵觀音

    阮懌航 吳亮宇 魯靜 黃秀紅 劉麗辰 林金科

    摘要:[目的]探索一種綠色、環(huán)保、安全、高效的鐵觀音茶多酚提取新方法,為茶多酚綠色提取提供新的技術(shù)參考。[方法]以鐵觀音成品茶為原料,采用新型綠色溶劑——低共熔溶液提取茶多酚;首先篩選出最優(yōu)的低共熔溶液提取體系,然后在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過(guò)響應(yīng)面法優(yōu)化,研究時(shí)間、溫度、溶液含水率對(duì)提取率的影響,得出最佳提取條件并分析其主要成分;最后通過(guò)測(cè)定DPPH自由基清除率分析茶多酚的抗氧化能力。[結(jié)果]篩選出最適的茶多酚低共熔溶液提取體系為:乳酸一甜菜堿,其次得到最佳單因素提取條件為提取時(shí)間40min、提取溫度60℃、含水率30%、摩爾比2:1、固液比1:40(g:mL);響應(yīng)面優(yōu)化分析得到最佳提取條件為:時(shí)間46.79min、溫度62.48℃、溶液含水率32.15%,在此條件下茶多酚提取率為15.42%。通過(guò)高效液相色譜分析茶多酚組分,其中沒(méi)食子酸含量占1.40%,兒茶素類物質(zhì)占84.99%,其他組分占13.61%。低共熔溶液法提取的茶多酚DPPH自由基半清除濃度(IC50)值73.89ug·mL-1,比抗壞血酸提高了37.80%。[結(jié)論]采用響應(yīng)面法優(yōu)化得出的低共熔溶液提取茶多酚最佳工藝條件,可有效提高鐵觀音茶多酚提取率。

    關(guān)鍵詞:低共熔溶液;鐵觀音;茶多酚;抗氧化活性;成分分析

    中圖分類號(hào):TS 201.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A 文章編號(hào):1008-0384(2020)02-0217-09

    0 引言

    (研究意義)鐵觀音原產(chǎn)于福建安溪,屬于烏龍茶類,具有滋味醇厚、花香顯的品質(zhì)特點(diǎn),深受消費(fèi)者喜愛(ài)。茶多酚作為鐵觀音烏龍茶的主要天然活性產(chǎn)物,是茶葉中主要的功能成分,是一種天然抗氧化劑。茶多酚具有抗氧化、抗誘變、抗輻射、抗菌、清除自由基、吸收紫外線等多種生物活性。因此利用低檔茶和茶葉生產(chǎn)過(guò)程中的廢料提取茶多酚,已然成為近些年國(guó)內(nèi)外“綠色工程”的熱門研究項(xiàng)目,在提高茶葉利用率和茶產(chǎn)業(yè)附加價(jià)值方面具有重要意義。(前人研究進(jìn)展)目前,茶多酚主要的提取方法有:有機(jī)溶劑萃取法、逆流提取法、離子沉淀法、大孔樹(shù)脂吸附分離法、微波輔助浸提法、超聲波輔助浸提法、超臨界CO2萃取法等。這些方法中,有的方法提取率較低,有的方法耗能大、成本高,無(wú)法投入大規(guī)模生產(chǎn)。低共熔溶液是一種綠色溶劑,通過(guò)有機(jī)化合物和離子型化合物以氫鍵形式結(jié)合形成;其具有無(wú)毒性,可生物降解,相對(duì)較低的蒸汽壓,高導(dǎo)電性,化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,零飽和蒸汽壓力,在室溫下是液體,表面張力小,擴(kuò)散系數(shù)較大,室溫下電導(dǎo)率高等特點(diǎn),且制備過(guò)程簡(jiǎn)單,原料易得,毒性較低,污染較少,原料充足且價(jià)格低廉等優(yōu)點(diǎn)。近年來(lái),隨著材料科學(xué)的發(fā)展,低共熔溶液在材料科學(xué)領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景,成為材料科學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)研究?jī)?nèi)容之一。崔琦的研究表明采用微波輔助低共熔溶液在提取沙棘中的黃酮物質(zhì)提取率可達(dá)到20.82mg·g-1;OzturkB采用乙二醇和氯化膽堿的低共熔溶液體系從廢橘皮中提取橘皮多酚,提取率為3.16mg·g-1;李婷婷采用微波輔助低共熔溶液法提取黃芩中的黃酮物質(zhì),研究結(jié)果表明黃酮物質(zhì)的提取率為52.27mg·g-1。(本研究切入點(diǎn))但目前關(guān)于低共熔溶液在茶葉內(nèi)含活性成分的提取研究國(guó)內(nèi)未見(jiàn)報(bào)道。(擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題)本研究通過(guò)對(duì)比不同體系的低共熔溶液和傳統(tǒng)水提取方法的茶多酚提取率,篩選適合的茶多酚提取體系,通過(guò)單因素和響應(yīng)面法,優(yōu)化茶多酚提取條件,并測(cè)定茶多酚的抗氧化活性,為提高茶多酚工業(yè)提取效率提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1試驗(yàn)材料與試劑

    鐵觀音成品茶購(gòu)于惜緣茶葉有限公司,粉碎后過(guò)60目篩,密封備用。

    DPPH試劑購(gòu)于東京化成工業(yè)株式會(huì)社;乳酸、無(wú)水乙醇、無(wú)水碳酸鈉、檸檬酸、果糖購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán);蘋果酸、氯化膽堿、甜菜堿、沒(méi)食子酸購(gòu)于麥克林公司;福林酚試劑購(gòu)于索萊寶公司;乙腈(色譜純),德國(guó)Merck公司;冰醋酸(AR)、抗壞血酸(AR)、甲醇(色譜純),美國(guó)Sigma-Aldrich公司。

    1.2儀器與設(shè)備

    712N可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海精密科學(xué)儀器廠);艾本德5424R高速離心機(jī)(德國(guó)制造);HH-6恒溫水浴鍋(國(guó)華電器公司);高效液相色譜儀(美國(guó)Waters公司);SY-2230恒溫水域搖床(美國(guó)精騏公司);超純水機(jī)(成都艾柯公司);高速多功能粉碎機(jī)(永康市鉑歐五金制品有限公司)。

    1.3 試驗(yàn)方法

    1.3.1低共熔溶液制備 采用水浴加熱攪拌的方法制備低共熔溶液,將氯化膽堿/果糖、氯化膽堿/乳酸、甜菜堿/蘋果酸、甜菜堿/檸檬酸、甜菜堿/乳酸5種雙組分按摩爾比1:2各放人燒杯中,在85℃水浴中攪拌為均一的液體(約60~80min)。

    1.3.2低共熔溶液的篩選 準(zhǔn)確稱取鐵觀音茶粉(2.00±0.05)g于50mL離心管中,各加入30%含水率的5種自制低共熔溶液,混勻后置于恒溫水浴搖床中。提取條件為時(shí)間60min、固液比為1:20(g:mL)、溫度為60℃,轉(zhuǎn)速為100r·min-1。提取后趁熱抽濾,濾液于4℃保藏待測(cè)。

    1.3.3茶多酚提取的單因素試驗(yàn) 考察不同因素對(duì)茶多酚提取的影響。設(shè)置的單因素分別是:提取時(shí)間(20、40、60、80、100min);提取溫度(40、50、60、70、80℃);固液比[1:20、1:30、1:40、1:50(g:mL)];低共熔溶液含水率(10%、20%、30%、40%、50%);低共熔溶液中氫鍵受體(HBA)與供體(HBD)的摩爾比(1:1、1:2、1:3、2:1、3:1)。

    1.3.4響應(yīng)面優(yōu)化茶多酚工藝 在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,選取連續(xù)變量時(shí)間(A)、溫度(B)、低共熔溶液的含水率(C)為自變量,茶多酚的提取率(Y)為響應(yīng)值,根據(jù)Box-Behnken中心組合實(shí)驗(yàn)原理,設(shè)計(jì)三因素三水平響應(yīng)面分析試驗(yàn)。各因素水平設(shè)定參見(jiàn)表1.

    1.3.5茶多酚含量的測(cè)定 鐵觀音提取液的茶多酚含量測(cè)定參照GB/T 8313-2018,略作改動(dòng)。將提取液稀釋200倍后,吸取1mL稀釋液于刻度試管中,加入10%的福林酚試劑反應(yīng)5min后再加入7.5%的碳酸鈉溶液,搖勻;室溫下反應(yīng)60min,于765nm波長(zhǎng)測(cè)定各吸光值。提取率計(jì)算參照公式(1)。

    提取率=C×V/M×l00% (1)

    式中,C為樣品中溶液的濃度(mg·L-1),V為提取液體積(mL),M為茶粉質(zhì)量(g)。

    1.3.6茶多酚類物質(zhì)HPLC分析

    (1)待測(cè)液制備

    將25mL EDTA(10mg·mL-1)+0.2g抗壞血酸+50mL乙腈加入500mL容量瓶,用水定容至刻度,制得穩(wěn)定溶液;茶多酚提取液用穩(wěn)定溶液稀釋10倍后過(guò)0.45um膜,制成待測(cè)液。

    (2)HPLC條件

    采用WatersAcquity UPLC HSS T3色譜柱(2.1mm×100mm,RPl81.7um),Acquuy UPLC柱在線過(guò)濾器,以色譜圖中峰不出現(xiàn)拖尾、基線不漂移和分離度為依據(jù)對(duì)流動(dòng)相體系和梯度洗脫設(shè)計(jì)、分析參數(shù)進(jìn)行評(píng)定,流動(dòng)相條件:A相為9.5%乙腈+0.02%EDTA-2Na+2%冰醋酸,流動(dòng)相B為80%乙腈+0.02%EDTA-2Na+2%冰醋酸。柱溫箱溫度:35℃,PDA檢測(cè)條件:掃描范圍200~400mm,特征檢測(cè)波長(zhǎng):278nm,掃描時(shí)間:9min;進(jìn)樣量:2ul.

    (3)兒茶素組分含量的計(jì)算

    通過(guò)積分HPLC色譜圖中的各組分峰面積,可計(jì)算出各個(gè)組分的濃度,再乘以相應(yīng)的稀釋系數(shù)和體積從而得到兒茶素各個(gè)組分的含量。

    1.3.7鐵觀音茶多酚提取液的抗氧化能力測(cè)定 采用DPPH自由基清除率評(píng)價(jià)茶多酚提取液的抗氧化能力。DPPH自由基測(cè)定方法參照Xu等的方法,略作改動(dòng)。將茶多酚提取液稀釋成不同的質(zhì)量濃度梯度(50、100、200、400、800ug·mL-1);各取0.2mL稀釋液于刻度試管中,以超純水為空白對(duì)照,以不同質(zhì)量濃度梯度(50、100、200、400、800ug·mL-1)的抗壞血酸溶液為陽(yáng)性對(duì)照,再加入4.8mL 0.01mmol·mL-1的DPPH自由基溶液,搖勻后于室溫下避光反應(yīng)30min,在517nnl波長(zhǎng)下測(cè)定吸光值。按公式(2)計(jì)算DPPH自由基的清除率,通過(guò)SPSs.17軟件計(jì)算IC50值。

    DPPH自由基清除率/%=1-As/Ac(2)

    式中:Ac為空白樣品的吸光度值,As為加入不同濃度樣品后的吸光度值。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    采用Excel 2007,SPSSl7.0及Design-Expertl0.0.7進(jìn)行分析處理,數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的方式表示,試驗(yàn)均設(shè)3次重復(fù)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 低共熔溶液體系篩選

    由表2可知,低共熔溶液的茶多酚提取率高于超純水且在統(tǒng)計(jì)學(xué)上具有極顯著差異(P<0.01);其中乳酸與甜菜堿組成的低共熔溶液體系多酚提取率最高,為(14.40±0.53)%,相比于傳統(tǒng)水提取方法提高了67.29%,且對(duì)比其他低共熔溶液體系在統(tǒng)計(jì)學(xué)上表現(xiàn)為極顯著差異(P<0.01)。因此選擇乳酸和甜菜堿體系作為后續(xù)試驗(yàn)的低共熔溶液體系。

    2.2 茶多酚提取的單因素試驗(yàn)

    2.2.1提取時(shí)間對(duì)茶多酚提取率的影響 由圖1可知,茶多酚的提取時(shí)間在20~40min時(shí)提取率呈現(xiàn)上升趨勢(shì);在40min之后提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì);40min時(shí)提取率達(dá)到最大,為15.23%,且顯著高于(戶<0.05)其他提取時(shí)間的提取率。綜合考慮提取成本和效率,確認(rèn)最佳提取時(shí)間為40min.

    2.2.2溫度對(duì)茶多酚提取率的影響 由圖2可知,當(dāng)溫度為40℃~60℃時(shí),提取率隨著溫度的增加而增加,溫度為60℃時(shí)提取率達(dá)到最大,為(15.27±0.72)%且顯著高于其他溫度處理的茶多酚提取率(P<0.05);當(dāng)溫度進(jìn)一步增加,提取率隨之下降。因此,選擇溫度60℃為最佳提取條件。

    2.2.3低共熔溶液組成摩爾比對(duì)茶多酚提取率的影響

    由圖3可知,當(dāng)氫鍵供體(HBD)和氫鍵受體(HBA)的摩爾比為2:1時(shí)提取率最佳為14.67%;而1:2時(shí)提取率最低,為(13.81±0.02)%。因此,選取低共熔溶液組成摩爾比2:1為最佳摩爾比條件。

    2.2.4低共熔溶液含水率對(duì)茶多酚提取率的影響由圖4可知,當(dāng)溶液的含水率為10%~30%,茶多酚的提取率隨著含水率提高逐漸增加;當(dāng)含水率為30%時(shí)提取率達(dá)到最大,為14.78%,且顯著高于其他處理的提取率(P<0.05),當(dāng)含水率大于30%提取率下降。因此,選擇含水率為30%的低共熔溶液進(jìn)行后續(xù)試驗(yàn)。

    2.2.5固液比對(duì)茶多酚提取率的影響 由圖5可知,當(dāng)固液比為1:20~1:40(g:mL)時(shí),提取率隨著固液比的增加而增加;當(dāng)固液比為1:40(g:mL)時(shí)提取率達(dá)到最大,為14.74%;當(dāng)固液比大于1:40(g:mE)時(shí),提取率有所下降。故選取1:40(g:mL)可作為低共熔溶液提取茶多酚的最優(yōu)固液比。

    2.3 鐵觀音茶多酚提取工藝響應(yīng)面優(yōu)化

    2.3.1響應(yīng)面優(yōu)化方案及結(jié)果分析 根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,固液比和低共熔組分摩爾比這2個(gè)因素的變化對(duì)茶多酚提取率的影響不具有顯著性,故選取提取時(shí)間A、提取溫度B、低共熔溶液含水率C為自變量,茶多酚的提取率Y為因變量,根據(jù)Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)原理進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化,具體方案和結(jié)果見(jiàn)表3.

    利用Design-Expertl0.0.7軟件中的Box-Behnken模型對(duì)表3中的數(shù)據(jù)進(jìn)行多元擬合分析,從而獲得茶多酚提取率Y對(duì)自變量提取時(shí)間A、提取溫度B、低共熔溶液含水率C的二次項(xiàng)多元統(tǒng)計(jì)分析,建立的二元回歸方程為:Y=15.37+0.20A+0.24B+0.32C0.040AB-0.093AC-0.21BC-0.25A2-0.36B2-0.55C2。

    通過(guò)分析回歸方程模型與響應(yīng)面值之間的關(guān)聯(lián),其中模型戶<0.0001,失擬項(xiàng)的P>0.05,說(shuō)明模型的預(yù)測(cè)值和試驗(yàn)數(shù)據(jù)具有高度的吻合度;相關(guān)系數(shù)r=0.9841,說(shuō)明回歸方程能夠很好地模擬實(shí)際曲面;調(diào)整系數(shù)R2=0.9636,說(shuō)明有96.36%的響應(yīng)值變化可以通過(guò)該模型來(lái)解釋。由此可以認(rèn)為模型與實(shí)際有高度的契合度,以此方程為基礎(chǔ)的數(shù)學(xué)模型能夠充分反映茶多酚提取率與各個(gè)提取工藝參數(shù)之間的相關(guān)關(guān)系。

    對(duì)模型的二次回歸方程進(jìn)行方差分析,結(jié)果見(jiàn)表4.由表4可知,回歸方程的一次項(xiàng)A、B、C為顯著影響因素且表現(xiàn)為極顯著性;二次項(xiàng)A2、B2、C2均表現(xiàn)為極顯著性;交互項(xiàng)BC具有極顯著性。以鐵觀音茶多酚提取率為響應(yīng)值建立的模型具有極顯著性(P<0.0001),而誤差項(xiàng)不顯著,說(shuō)明模型高度契合,回歸方程成立,可以較準(zhǔn)確表明各因素與響應(yīng)值之間的函數(shù)關(guān)系,因此利用該方程可以對(duì)茶多酚提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。

    2.3.2鐵觀音茶多酚提取的最佳條件確定及驗(yàn)證通過(guò)繪制響應(yīng)面圖可以更加深入直觀地探討相關(guān)變量之間的交互關(guān)系以及變量對(duì)響應(yīng)值的影響趨勢(shì)。模型的響應(yīng)曲面圖如圖6,等高線的形狀能表示兩個(gè)因素之間的相互作用情況。若等高線呈現(xiàn)橢圓形,則兩個(gè)因素之間存在顯著交互作用;若等高線呈現(xiàn)圓形,則兩個(gè)因素之間的交互作用無(wú)顯著性。由圖6可知,含水率和提取溫度對(duì)茶多酚的提取率具有顯著交互影響;提取時(shí)間和提取溫度對(duì)茶多酚的提取率的交互作用無(wú)顯著相關(guān)。當(dāng)提取溫度、提取時(shí)間、含水率增加時(shí),響應(yīng)值呈現(xiàn)出先增加后減少的趨勢(shì)。這與單因素試驗(yàn)結(jié)果相吻合。

    在響應(yīng)面設(shè)計(jì)的因素范圍內(nèi),按照回歸模型利用Design-Expert 10.0.7軟件分析得出的茶多酚提取最佳條件是:提取時(shí)間46.8min,提取溫度62.5℃,低共熔溶液含水率32.2%,模型預(yù)測(cè)最佳提取率為15.46%。為證實(shí)預(yù)測(cè)結(jié)果,采用最后確定的提取條件進(jìn)行3次重復(fù)驗(yàn)證,得到實(shí)際茶多酚提取率為(15.42±0.20)%,與模型預(yù)測(cè)相差0.04%。由此可見(jiàn),應(yīng)用響應(yīng)面優(yōu)化法確定的茶多酚提取條件具有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

    2.4 茶多酚提取物主要化學(xué)成分分析

    采用HPLC分析茶多酚提取物中的各組分物質(zhì)及其含量,生成的色譜圖如圖7所示。茶多酚提取液中的主要組分分別是沒(méi)食子酸(GA)和兒茶素類物質(zhì),其中GA占1.40%,兒茶素類物質(zhì)占84.99%。如圖8所示,在兒茶素的7種組分中,EGCG的含量最高,其占兒茶素含量的46.29%,是茶多酚的主要活性成分物質(zhì)。兒茶素類物質(zhì)組分的比例:表沒(méi)食子兒茶素(EGC):兒茶素(C):表兒茶素(EC):表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(EGCG):沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(GCG):表兒茶素沒(méi)食子酸酯(ECG):兒茶素沒(méi)食子酸酯(CG)為0.796:0.304:0.393:1.517:0.226:0.034:0.007.

    2.5 茶多酚提取液的抗氧化活性

    對(duì)茶多酚提取液進(jìn)行DPPH自由基清除率能力測(cè)定。如圖9所示,當(dāng)質(zhì)量濃度為50~200ug·mL-1時(shí),隨著質(zhì)量濃度的增加,應(yīng)用水提法和低共熔溶液法提取的茶多酚提取液的DPPH自由基清除率也相應(yīng)增加,當(dāng)質(zhì)量濃度大于200ug·mL-1之后清除率達(dá)到一個(gè)平衡狀態(tài)。兩種提取方法得到的多酚提取液的最大清除率基本一致,且僅在800ug·mL-1比陽(yáng)性對(duì)照Vc略低一些。

    IC50值表示DPPH清除率為50%時(shí)抗氧化劑的濃度;IC50值越大,表明抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力越低。通過(guò)計(jì)算分析得出IC50值為:鐵觀音水提?。?4.63ug·mL-1)<鐵觀音低共熔溶液提取(73.89ug·mL-1)-1),由此可知兩種提取方法得到的茶多酚提取物的抗氧化能力均強(qiáng)于陽(yáng)性對(duì)照Vc,其中水提取的茶多酚抗氧化能力最強(qiáng),低共熔溶液提取的茶多酚抗氧化能力較水提取的多酚弱一些。由此表明,低共熔溶液提取的茶多酚具有較強(qiáng)的抗氧化能力,可以通過(guò)后續(xù)的分離純化方法制成天然抗氧化產(chǎn)品。

    3討論與結(jié)論

    茶多酚是茶葉中的主要功能成分,也是茶葉發(fā)揮其保健功效的重要成分之一。本研究采用低共熔溶液提取茶葉中的多酚類物質(zhì),探討了不同的低共熔溶液體系、提取時(shí)間、提取溫度、固液比、低共熔組分的摩爾比對(duì)茶多酚提取率的影響。

    研究結(jié)果表明,不同的低共熔溶液均能提高茶多酚的提取率,但低共熔溶液的體系差異導(dǎo)致提取率的增幅也有所差異。其中,以乳酸-甜菜堿為體系的低共熔溶液的提取率最高(14.40±0.53)%,相比常規(guī)提取法提高了67.29%。其主要原因是低共熔溶液對(duì)植物細(xì)胞壁具有較強(qiáng)的破壞作用,且乳酸一甜菜堿體系的流動(dòng)性優(yōu)于其他低共熔體系,能促進(jìn)茶葉內(nèi)含物質(zhì)的溶出;茶多酚的最佳提取pH值為4.5,而以乳酸一甜菜堿組成的低共熔溶液能夠?yàn)椴瓒喾犹峁┮粋€(gè)酸性的提取環(huán)境,從而提高提取率。在單因素試驗(yàn)中,隨著時(shí)間和溫度的增加,茶多酚提取率呈現(xiàn)出先增加后減少的變化趨勢(shì),其中最佳提取時(shí)間和溫度分別是40min和60℃,說(shuō)明在一定的范圍內(nèi),茶多酚的提取率與時(shí)間和溫度呈正相關(guān)關(guān)系,但長(zhǎng)時(shí)間和高溫度的條件會(huì)導(dǎo)致茶多酚類物質(zhì)的氧化,從而降低其提取的效率;在一定范圍內(nèi),隨著溶劑的增加,茶多酚的溶出率也有所增加,但溶劑持續(xù)增加,會(huì)引起部分雜質(zhì)溶出,導(dǎo)致提取率有所下降,同時(shí)持續(xù)增加投液量還會(huì)造成溶液的浪費(fèi)和提取成本的增加,故選擇最佳固液比1:40(g:mL);當(dāng)提取體系中含水率較低時(shí),溶液較為粘稠,不利于溶液和茶粉之間進(jìn)行接觸;而含水率過(guò)高,則低共熔溶液體系中的極性增強(qiáng),破壞了低共熔溶液體系中的化學(xué)鍵,導(dǎo)致提取率呈現(xiàn)下降趨勢(shì),因此最佳溶液含水率為30%;隨著低共熔溶液體系中甜菜堿摩爾量的增加,溶液的黏稠度和pH值也增加,不利于茶多酚的提取,故最適摩爾比HBA:HBD為2:1.

    在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,利用Design-Expert 10.0.7軟件,應(yīng)用Box-Behnken設(shè)計(jì)及響應(yīng)面分析法對(duì)此工藝進(jìn)行優(yōu)化分析,建立了低共熔溶液提取茶多酚工藝的三元二次多項(xiàng)式回歸模型,該模型擬合度高、重現(xiàn)性好;分析得出3個(gè)因素對(duì)茶多酚提取率的影響具有極顯著性(P<0.01)且他們對(duì)茶多酚提取率的影響次序依次為:含水率>溫度>時(shí)間。通過(guò)該模型得出的優(yōu)化提取工藝條件為:提取時(shí)間46.8min,提取溫度62.5℃,低共熔溶液含水率32.2%、固液比1:40(g:mL)、低共熔溶液組分摩爾比2:1.此時(shí),通過(guò)模型計(jì)算得出的提取率為15.46%,驗(yàn)證的提取率為(15.42±0.20)%,與模型得到的提取率高度吻合,表明模型準(zhǔn)確、可靠,具有實(shí)際參考意義。

    通過(guò)HPLC分析可知,茶多酚的主要成分是兒茶素類物質(zhì),占總含量的84.99%,是茶多酚中的主要功能成分;兒茶素中含量最高的是EGCG,占兒茶素總量的46.29%,高出其他組分含量2-9倍不等;EGCG基團(tuán)上有著豐富的羥基,有著較強(qiáng)的氧自由基結(jié)合的能力,同時(shí)兒茶素之間在茶葉加工過(guò)程中發(fā)生集合反應(yīng)形成二聚體,因此兒茶素具有很好的抗氧化能力。

    DPPH自由基作為一種人工合成的自由基分子,能夠高效、穩(wěn)定地定量分析一種物質(zhì)的抗氧化能力。茶多酚類物質(zhì)是天然的抗氧化物,因此探索不同提取方式對(duì)抗氧化活性的影響,對(duì)之后解決實(shí)際生產(chǎn)過(guò)程中茶多酚活性的保留問(wèn)題具有重要的指導(dǎo)意義。對(duì)茶多酚提取物進(jìn)行DPPH自由基清除試驗(yàn),結(jié)果表明在一定濃度下清除率均能達(dá)到90%,表明高濃度的茶多酚能夠有效清除自由基,具有抗氧化能力;當(dāng)茶多酚質(zhì)量濃度為50~200mg·mL-1時(shí),自由基的清除率呈現(xiàn)快速增長(zhǎng)的趨勢(shì);當(dāng)茶多酚濃度大于200g·mL-1時(shí),自由基的清除率維持在穩(wěn)定的水平上。由此可見(jiàn),茶多酚的最佳抗氧化濃度為200g·mL-1。IC50值體現(xiàn)的是當(dāng)自由基濃度下降一半時(shí)所需的茶多酚濃度,IC50值越小表明抗氧化劑的抗氧化活性越強(qiáng);對(duì)比其IC50值,鐵觀音水提取<鐵觀音低共熔溶液提取

    綜上所述,采用低共熔溶液提取的茶多酚可以顯著提高茶多酚的提取率且能夠有效保持其抗氧化活性;該研究成果能為茶多酚在食品、保健品等領(lǐng)域的深度開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

    猜你喜歡
    成分分析抗氧化活性鐵觀音
    有一種好茶叫“鐵觀音 秋茶”
    木柵鐵觀音 百年閩臺(tái)緣
    海峽姐妹(2019年11期)2019-12-23 08:42:12
    蛋白酶種類及水解時(shí)間對(duì)豬血漿蛋白水解物抗氧化性和乳化性的影響
    肉類研究(2016年12期)2017-01-12 17:20:01
    雞骨草葉總生物堿的含量測(cè)定及其體外抗氧化活性研究
    保守主義視角下的《蝙蝠俠:黑暗騎士》
    麒麟尾總黃酮提取及其抗氧化作用研究
    心血管保護(hù)中藥川芎顆粒質(zhì)量差異分析
    訪鐵觀音博物館
    海洋藥物
    纖維成分定量分析用二甲基甲酰胺回收利用可行性初探
    国产成人av激情在线播放| 男女下面插进去视频免费观看| 亚洲国产精品国产精品| 久久国产精品影院| www日本在线高清视频| 久久久久久久精品精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| svipshipincom国产片| 成人国产av品久久久| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 校园人妻丝袜中文字幕| 欧美日韩成人在线一区二区| 天堂俺去俺来也www色官网| 飞空精品影院首页| 少妇精品久久久久久久| 亚洲,欧美精品.| www.999成人在线观看| 亚洲欧美一区二区三区国产| 亚洲,欧美精品.| 久久亚洲精品不卡| 欧美激情极品国产一区二区三区| 美女高潮到喷水免费观看| 看十八女毛片水多多多| 亚洲九九香蕉| 又大又爽又粗| 国产精品国产三级专区第一集| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产免费福利视频在线观看| 视频区欧美日本亚洲| 久久精品国产亚洲av涩爱| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产真人三级小视频在线观看| 亚洲国产看品久久| 三上悠亚av全集在线观看| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | svipshipincom国产片| 国产精品免费大片| 美女扒开内裤让男人捅视频| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 波多野结衣一区麻豆| 国产成人精品久久久久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产精品av久久久久免费| 最近最新中文字幕大全免费视频 | 成年女人毛片免费观看观看9 | 久久久久久久国产电影| 亚洲一区中文字幕在线| 婷婷色av中文字幕| 999久久久国产精品视频| 久久精品国产a三级三级三级| 午夜免费成人在线视频| 久热这里只有精品99| 巨乳人妻的诱惑在线观看| avwww免费| 亚洲人成77777在线视频| 欧美精品一区二区大全| 黄频高清免费视频| 成人亚洲欧美一区二区av| 国产精品一区二区在线观看99| 国产精品九九99| 精品国产乱码久久久久久男人| 亚洲美女黄色视频免费看| 久久九九热精品免费| 麻豆国产av国片精品| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 女性被躁到高潮视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 狂野欧美激情性bbbbbb| 麻豆乱淫一区二区| 妹子高潮喷水视频| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 男人舔女人的私密视频| 亚洲国产看品久久| 赤兔流量卡办理| 久久亚洲精品不卡| 在线观看一区二区三区激情| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产成人精品久久二区二区免费| www日本在线高清视频| 亚洲成国产人片在线观看| 只有这里有精品99| 一级,二级,三级黄色视频| 国产欧美日韩精品亚洲av| 咕卡用的链子| av国产精品久久久久影院| 高清不卡的av网站| 午夜91福利影院| av电影中文网址| a 毛片基地| 又黄又粗又硬又大视频| 久久99一区二区三区| 香蕉丝袜av| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 51午夜福利影视在线观看| 欧美精品一区二区免费开放| 日韩制服骚丝袜av| 免费不卡黄色视频| 99热网站在线观看| 在线观看国产h片| 色播在线永久视频| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| av天堂在线播放| 国产一卡二卡三卡精品| 国产欧美日韩精品亚洲av| 午夜福利视频在线观看免费| 多毛熟女@视频| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 日本91视频免费播放| 免费看不卡的av| 午夜福利在线免费观看网站| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲精品国产av蜜桃| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产又爽黄色视频| 久久亚洲精品不卡| kizo精华| 人体艺术视频欧美日本| 高清黄色对白视频在线免费看| 亚洲人成电影观看| 美女扒开内裤让男人捅视频| 99久久综合免费| 超碰97精品在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 宅男免费午夜| 国产一区二区 视频在线| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 国产xxxxx性猛交| 成在线人永久免费视频| av福利片在线| 国产人伦9x9x在线观看| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲欧美色中文字幕在线| 久久精品人人爽人人爽视色| 亚洲av国产av综合av卡| 伦理电影免费视频| 性高湖久久久久久久久免费观看| 最近中文字幕2019免费版| 男女之事视频高清在线观看 | 大片电影免费在线观看免费| 高清欧美精品videossex| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲天堂av无毛| 爱豆传媒免费全集在线观看| 精品少妇内射三级| av国产久精品久网站免费入址| 99久久人妻综合| 五月开心婷婷网| 观看av在线不卡| 精品一区二区三区av网在线观看 | 亚洲,欧美,日韩| 免费观看人在逋| 一级,二级,三级黄色视频| 少妇人妻 视频| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 亚洲,欧美精品.| 国产在线一区二区三区精| 午夜福利乱码中文字幕| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 在线看a的网站| 亚洲av成人精品一二三区| av网站在线播放免费| 欧美大码av| 精品少妇内射三级| 一级毛片女人18水好多 | 国产免费视频播放在线视频| 久久国产精品影院| 午夜免费成人在线视频| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲七黄色美女视频| 国产精品一国产av| 又大又黄又爽视频免费| 午夜激情久久久久久久| 亚洲久久久国产精品| 精品亚洲成a人片在线观看| 大片免费播放器 马上看| 成年人午夜在线观看视频| 免费看av在线观看网站| 无遮挡黄片免费观看| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产精品一区二区在线观看99| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 嫩草影视91久久| 久久天堂一区二区三区四区| 久久国产精品大桥未久av| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲 国产 在线| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 亚洲成人国产一区在线观看 | 精品一区在线观看国产| 亚洲国产成人一精品久久久| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 十分钟在线观看高清视频www| 亚洲欧美清纯卡通| 老汉色∧v一级毛片| 国产成人一区二区在线| 久久这里只有精品19| 国产免费视频播放在线视频| 欧美av亚洲av综合av国产av| 亚洲九九香蕉| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 青春草亚洲视频在线观看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 久久久久网色| 国产又色又爽无遮挡免| 国产色视频综合| 久久99热这里只频精品6学生| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 亚洲av电影在线进入| 国产精品亚洲av一区麻豆| 99国产精品一区二区三区| 亚洲精品一二三| 国产黄频视频在线观看| 99国产精品99久久久久| 久久久久久人人人人人| 日韩电影二区| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 精品一区二区三区四区五区乱码 | 国产爽快片一区二区三区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产男女内射视频| 婷婷成人精品国产| 欧美黄色片欧美黄色片| 国产成人一区二区三区免费视频网站 | 精品一区在线观看国产| 亚洲av美国av| 国产色视频综合| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品一区二区三卡| 亚洲av国产av综合av卡| 9色porny在线观看| 亚洲图色成人| 久久人妻熟女aⅴ| 国产精品免费大片| 亚洲中文字幕日韩| 亚洲男人天堂网一区| 日本午夜av视频| 美女福利国产在线| 精品人妻1区二区| 国产在线免费精品| 一区二区av电影网| 国产av国产精品国产| 另类精品久久| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 色视频在线一区二区三区| 久久久久久久国产电影| 99国产综合亚洲精品| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 国产精品久久久久久精品古装| 色94色欧美一区二区| 少妇的丰满在线观看| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 又黄又粗又硬又大视频| 中文字幕人妻熟女乱码| 国产成人啪精品午夜网站| 丝袜脚勾引网站| 精品国产一区二区三区四区第35| 国产精品av久久久久免费| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 久久精品久久精品一区二区三区| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 午夜福利一区二区在线看| 90打野战视频偷拍视频| 日本av免费视频播放| 国产视频首页在线观看| 国产黄色视频一区二区在线观看| 无遮挡黄片免费观看| 国产精品.久久久| 爱豆传媒免费全集在线观看| 一区二区三区激情视频| videosex国产| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 国产1区2区3区精品| 91成人精品电影| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| av国产久精品久网站免费入址| 男女午夜视频在线观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 久久国产精品人妻蜜桃| 韩国精品一区二区三区| 亚洲七黄色美女视频| 搡老乐熟女国产| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 欧美日本中文国产一区发布| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美精品高潮呻吟av久久| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 波多野结衣一区麻豆| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 飞空精品影院首页| 国产三级黄色录像| av片东京热男人的天堂| 欧美乱码精品一区二区三区| 日本91视频免费播放| 色94色欧美一区二区| 亚洲欧美色中文字幕在线| 91成人精品电影| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 亚洲国产中文字幕在线视频| 手机成人av网站| 黄片小视频在线播放| 视频区图区小说| av国产久精品久网站免费入址| 男女午夜视频在线观看| 国产成人精品在线电影| 女警被强在线播放| 一本大道久久a久久精品| 青春草视频在线免费观看| 另类精品久久| 欧美人与性动交α欧美软件| 亚洲国产看品久久| 18在线观看网站| 免费在线观看日本一区| 欧美av亚洲av综合av国产av| 1024视频免费在线观看| 91老司机精品| 18禁观看日本| 在线看a的网站| 亚洲国产精品一区三区| 亚洲精品国产区一区二| av欧美777| 男女午夜视频在线观看| 男女免费视频国产| 国产一区亚洲一区在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 国产精品久久久久成人av| 丝瓜视频免费看黄片| 国产淫语在线视频| 午夜福利视频在线观看免费| 人成视频在线观看免费观看| 青青草视频在线视频观看| 国产爽快片一区二区三区| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 国产成人影院久久av| 亚洲人成77777在线视频| 久久久久视频综合| 老汉色∧v一级毛片| 成年美女黄网站色视频大全免费| 亚洲精品国产一区二区精华液| 欧美日韩黄片免| 久热这里只有精品99| 午夜激情av网站| 国产精品久久久av美女十八| 最新的欧美精品一区二区| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 两个人免费观看高清视频| 欧美日韩福利视频一区二区| 久久精品亚洲熟妇少妇任你| 午夜福利乱码中文字幕| 看十八女毛片水多多多| 亚洲av欧美aⅴ国产| 午夜91福利影院| 国产99久久九九免费精品| 午夜福利视频精品| 97人妻天天添夜夜摸| 丝瓜视频免费看黄片| 1024视频免费在线观看| 中文字幕精品免费在线观看视频| 久久久久精品人妻al黑| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产精品一国产av| 少妇 在线观看| 久久精品国产亚洲av高清一级| 日日摸夜夜添夜夜爱| 成年动漫av网址| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 国产在线一区二区三区精| 69精品国产乱码久久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 欧美国产精品va在线观看不卡| 日韩视频在线欧美| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 午夜福利在线免费观看网站| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久天堂一区二区三区四区| 一边亲一边摸免费视频| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美日韩福利视频一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| 在线看a的网站| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 岛国毛片在线播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 亚洲专区中文字幕在线| 亚洲人成电影观看| 老司机影院成人| 亚洲久久久国产精品| 国产精品三级大全| 999久久久国产精品视频| 丝袜人妻中文字幕| 最近手机中文字幕大全| 亚洲第一青青草原| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 一本综合久久免费| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 少妇的丰满在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 免费一级毛片在线播放高清视频 | av片东京热男人的天堂| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 亚洲九九香蕉| 国产精品三级大全| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o | 啦啦啦 在线观看视频| 亚洲综合色网址| 老司机靠b影院| 国产免费福利视频在线观看| 一区二区三区四区激情视频| 成人午夜精彩视频在线观看| 最新在线观看一区二区三区 | 国产熟女欧美一区二区| 啦啦啦在线免费观看视频4| 精品视频人人做人人爽| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久久国产精品麻豆| 亚洲综合色网址| 国产视频一区二区在线看| 成年美女黄网站色视频大全免费| 校园人妻丝袜中文字幕| 国产主播在线观看一区二区 | 国产福利在线免费观看视频| 久久天堂一区二区三区四区| 欧美在线一区亚洲| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 777米奇影视久久| 国产黄频视频在线观看| 天天躁日日躁夜夜躁夜夜| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 夫妻午夜视频| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲av男天堂| 成人国产一区最新在线观看 | 99国产精品99久久久久| 欧美人与善性xxx| 亚洲精品国产一区二区精华液| videos熟女内射| 99热国产这里只有精品6| 亚洲专区国产一区二区| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 深夜精品福利| 国产亚洲精品第一综合不卡| 亚洲av国产av综合av卡| 一二三四在线观看免费中文在| 久久人妻福利社区极品人妻图片 | 国产一区二区激情短视频 | 国产视频首页在线观看| 美女午夜性视频免费| 女警被强在线播放| 美女视频免费永久观看网站| 国产成人影院久久av| 黄色视频在线播放观看不卡| 男女免费视频国产| 99久久99久久久精品蜜桃| 看免费成人av毛片| 国产精品一区二区免费欧美 | 在线观看免费视频网站a站| 国产国语露脸激情在线看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 久久精品国产亚洲av高清一级| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久亚洲国产成人精品v| av天堂久久9| 蜜桃在线观看..| 国产高清videossex| avwww免费| 亚洲综合色网址| 丝袜喷水一区| 波多野结衣av一区二区av| 午夜老司机福利片| 91字幕亚洲| 后天国语完整版免费观看| 麻豆乱淫一区二区| 伊人亚洲综合成人网| 高清欧美精品videossex| 成在线人永久免费视频| 精品高清国产在线一区| 亚洲av日韩精品久久久久久密 | 亚洲精品成人av观看孕妇| 女人久久www免费人成看片| 十分钟在线观看高清视频www| 老熟女久久久| 一区二区av电影网| 亚洲 国产 在线| 99精品久久久久人妻精品| 黄色 视频免费看| 后天国语完整版免费观看| 中文字幕制服av| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲av综合色区一区| 欧美日韩成人在线一区二区| 欧美亚洲日本最大视频资源| 69精品国产乱码久久久| 国产精品久久久久久精品古装| 69精品国产乱码久久久| 亚洲精品中文字幕在线视频| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 免费日韩欧美在线观看| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 久久久久网色| 亚洲,欧美精品.| 国产精品欧美亚洲77777| 日本欧美视频一区| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 国产一区有黄有色的免费视频| 成人国语在线视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 少妇人妻 视频| 99久久人妻综合| 欧美日韩一级在线毛片| 国产成人欧美| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 一区二区三区精品91| 一级黄片播放器| 久久亚洲精品不卡| 成年人黄色毛片网站| 日韩中文字幕欧美一区二区 | 久久青草综合色| 国产欧美日韩一区二区三 | 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 黄色视频在线播放观看不卡| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 色婷婷av一区二区三区视频| 午夜久久久在线观看| 丁香六月天网| 一本色道久久久久久精品综合| 免费黄频网站在线观看国产| 国产精品亚洲av一区麻豆| 午夜福利视频在线观看免费| 首页视频小说图片口味搜索 | a级毛片在线看网站| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 母亲3免费完整高清在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 视频在线观看一区二区三区| 99热全是精品| 国产免费现黄频在线看| 久久性视频一级片| 一区二区三区激情视频| 久久九九热精品免费| 飞空精品影院首页| 人人妻人人澡人人看| 国产一区二区在线观看av| 91九色精品人成在线观看| 久久国产精品大桥未久av| av国产久精品久网站免费入址| 国产在线观看jvid| 国产有黄有色有爽视频| 亚洲精品国产av成人精品| 黄频高清免费视频| 亚洲国产精品成人久久小说| a级毛片在线看网站| 国产视频一区二区在线看| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 国产高清视频在线播放一区 | 色视频在线一区二区三区| kizo精华| 看免费av毛片| 成人免费观看视频高清| 精品国产国语对白av| 亚洲七黄色美女视频| 日韩 亚洲 欧美在线| 大香蕉久久成人网| 欧美日韩亚洲高清精品| 亚洲国产av新网站| videos熟女内射| 亚洲国产中文字幕在线视频| 国产午夜精品一二区理论片| av天堂久久9| 国产一区二区三区综合在线观看| 在线观看免费高清a一片| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲欧美一区二区三区国产| 午夜av观看不卡| 亚洲专区中文字幕在线| 最新在线观看一区二区三区 | 国产成人精品久久二区二区免费| 日本欧美国产在线视频| 久久99一区二区三区| 欧美精品亚洲一区二区| 两性夫妻黄色片| 亚洲精品中文字幕在线视频| 国产国语露脸激情在线看| 国产日韩欧美在线精品| 久久ye,这里只有精品| 久久久久精品人妻al黑| 99久久精品国产亚洲精品| 我的亚洲天堂| 欧美激情极品国产一区二区三区| 好男人视频免费观看在线| 男女免费视频国产| 亚洲熟女毛片儿| 黄色片一级片一级黄色片| 丁香六月天网| 国产片内射在线| 国产精品九九99| 午夜福利影视在线免费观看| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产老妇伦熟女老妇高清| 超色免费av| 日本五十路高清| 熟女少妇亚洲综合色aaa.|