采血管敞口時間對血清二氧化碳濃度的影響

沈建江，朱小飛，王 瑤，趙 春

江蘇省南京中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院/江蘇省中醫(yī)院檢驗科，江蘇 南京 210029

血清二氧化碳(CO2)檢測是臨床實驗室開展的常規(guī)項目，也是臨床評估酸堿平衡的重要指標[1],體內存在形式主要是碳酸氫根(HCO3-),以及其他形式的CO2，碳酸(H2CO3),游離的CO2等。在人體中，酸堿平衡對體內細胞平衡至關重要。在許多炎癥過程中觀察到酸中毒，主要是急性病癥如敗血癥，外傷或急性呼吸窘迫[2]；在一些慢性腎臟疾病也可發(fā)現(xiàn)血清碳酸氫鹽水平降低[3]；還有文獻報道，在急性心力衰竭患者中，酸堿平衡的變化與預后密切相關[4]。因此，檢測血清CO2水平對臨床意義重大。臨床醫(yī)生經(jīng)常反映血清CO2與實際情況不符，與預期相比偏低，近來也有文獻報道，其主要是通過實驗原理進行分析[5]，本研究發(fā)現(xiàn)，分析前的血清處理方式也有可能對檢測結果產(chǎn)生影響，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集江蘇省中醫(yī)院門診患者2018年6-12月無黃疸、溶血、脂血的血清標本180例。本實驗室CO2參考范圍22～29 mmol/L，故按照低濃度水平<22 mmol/L，中濃度水平22～29 mmol/L，高濃度水平>29 mmol/L分為低、中、高濃度3組，每組60例。平均濃度依次為(16.19±2.64) mmol/L、(25.38±2.18) mmol/L、(34.59±4.88) mmol/L。

1.2方法 收集CO2低、中、高濃度血清各60例，每例5 mL，分為敞口、閉蓋2管。在室溫條件下，測定0 h閉蓋血清CO2濃度，同時將血清保存于儀器樣本待檢區(qū)，避開風口，隨后1、1.5、2 h分別測定敞口、閉蓋血清的CO2濃度，每例血清均檢測3次，求其平均濃度，避免隨機誤差。

1.3儀器與試劑 采用Beckman Coulter公司AU5800型全自動生化分析儀進行標本檢測，低、高濃度水平質控品為美國伯樂公司產(chǎn)品(批號26420)，CO2測定試劑盒(酶法，批號1216071)、校準品(批號0417021)均由四川邁克生物科技股份有限公司提供。

1.4CO2精密度驗證 根據(jù)美國臨床實驗室標準化協(xié)會(CLSI)EP15-A2文件的要求[6]，每天一個批次，每批次對兩個濃度水平質控品重復測量3次，連續(xù)進行5 d，計算重復性標準差(Sr)、批間方差(Sb2)和實驗室內標準差(SL)，驗證能否達到廠家的給定標準，以確保檢測質量。

1.4.1精密度驗證公式

1.4.2結果判讀 重復性標準差(Sr)和實驗室室內標準差(SL)均小于廠家提供的指標，則驗證通過。

2 結 果

2.1精密度試驗驗證結果表明，CO2精密度達到廠家給定標準，數(shù)據(jù)見表1。

表1 低、高水平的CO2標本精密度驗證結果

2.2低、中、高水平血清CO2濃度隨時間變化情況 低、中、高血清CO2濃度隨時間延長，水平略有下降，但相差不大。敞口情況下，低、中、高血清CO2濃度隨時間的延長，1 h以內濃度下降相對較少，1.5、2 h濃度下降明顯增大，見圖1～3。

圖1 敞口、閉蓋情況下高水平血清CO2均值變化趨勢

2.3敞口、閉蓋情況下低、中、高濃度血清CO2均值比較 CO2濃度檢測顯示，閉蓋情況下，低、中、高血清CO2濃度1、1.5、2 h與0 h比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。敞口情況下，低、中、高血清CO2濃度1 h與0 h比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。敞口情況下，低、中、高血清CO2濃度1.5、2 h與0 h比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

圖2 敞口、閉蓋情況下中水平血清CO2均值變化趨勢

圖3 敞口、閉蓋情況下低水平血清CO2均值變化趨勢

表2 低、中、高濃度敞口、閉蓋血清均值

注：與敞口0 h檢測結果比較，*P<0.05；與敞口0 h檢測結果比較，#P<0.01。

2.4低、中、高敞口血清CO21.5、2 h濃度變化率比較 計算低、中、高敞口血清CO21.5、2 h的濃度變化率，組間比較顯示差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 敞口1.5 h、2 h血清CO2濃度變化率

3 討 論

在臨床工作中，經(jīng)常有醫(yī)生反饋CO2濃度與臨床不符合，結果相對偏低，檢驗人員通過實驗室室內質控和實驗室間比對，結果顯示均滿足要求，這時候考慮可能為血清前處理過程的問題。由于血清CO2濃度檢測是常規(guī)項目，大多數(shù)患者都會檢查，本院檢驗科能夠保證血清的及時離心，但是由于標本量太大，血清大部分時間處于儀器的待檢區(qū)，CO2濃度隨時間的延長而降低。實驗結果表明，血清閉蓋保存能較好防止CO2揮發(fā)，至少2 h內結果不會有太大偏差[7-8]。敞口血清在1 h內的濃度差異無統(tǒng)計學意義，但隨著時間的延長，CO2濃度逐漸降低，表2數(shù)據(jù)表明其降低的速率與濃度無關，只與血清敞口的時間相關，敞口時間越長，濃度偏低越嚴重，從而容易給臨床造成誤判[9-10]。所有臨床血清在1 h內檢測完畢很難實現(xiàn)，因此根據(jù)上述實驗結果，筆者建議：(1)血清及時離心，不開試管蓋子，放于室溫保存，且盡量避免陽光直射。(2)AU5821檢測速度為4 900次/小時，根據(jù)測試速度，合理安排上機樣本，盡量在開蓋后1 h內檢測完畢。(3)血清檢測完畢后及時蓋上蓋子，避免血清與空氣的直接接觸，導致CO2的揮發(fā)。