血漿和肽素、MMP-9水平對輕型腦外傷的診斷價值*

楊以平，曹冠柏，黎勇夫，馮 鈴

重慶市九龍坡區(qū)人民醫(yī)院創(chuàng)傷外科,重慶 400050

腦外傷(TBI)是一常見疾病，傷情輕重不一，大多數(shù)情況下(70%～90%)為輕型腦外傷(MTBI)[1]。腦震蕩是MTBI中的一種，MTBI可能出現(xiàn)長期癥狀，如認知功能障礙，增加神經退行性疾病發(fā)生的風險[2]。MTBI診斷主要依據(jù)患者自我報告的傷后癥狀[3]，包括短暫的意識喪失、短暫失憶或短暫的精神狀態(tài)改變，然而，這些癥狀有時可能無法準確獲得，例如精神錯亂的老年人、醉酒患者，多發(fā)性創(chuàng)傷患者主訴癥狀可能不可靠。此外，一些患者可能故意誤報傷情。為避免誤診，MTBI診斷需要客觀的輔助檢查指標。MTBI后進入血循環(huán)的腦相關蛋白質可以作為客觀的輔助診斷指標[4]。本研究探討血漿和肽素聯(lián)合基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)對MTBI診斷的準確度。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2016年6月至2018年10月在重慶市九龍坡區(qū)人民醫(yī)院診治的資料完整的MTBI患者69例(觀察組)和同期健康體檢者62例(對照組)。納入標準：頭部外傷后8 h內就診；符合MTBI的診斷；傷后8 h內采集靜脈血測定血漿和肽素、MMP-9；傷后8 h內行頭顱CT掃描；無凝血功能障礙。排除標準：年齡18周歲以下；既往有中樞神經系統(tǒng)疾病史；中型及重型顱腦外傷患者；多發(fā)性或復合性損傷患者。觀察組患者損傷原因分別為交通事故31例，跌倒傷21例，運動傷10例，擊傷7 例。格拉斯哥昏迷評分(GCS)評分15分61例，14分6 例，13分2 例。觀察組與對照組臨床特征比較，年齡、性別間差異無統(tǒng)計學意義(P=0.258，P=0.770)，具有可比性。見表1。

表1 兩組臨床特征比較

1.2MTBI診斷標準 有明確的頭部外傷史；輕度意識障礙，GCS 13～15分，昏迷不超過20 min[4]；近事遺忘；頭痛、頭暈、疲勞等；情緒不穩(wěn)、易激動、欣快、憂郁或淡漠等精神狀態(tài)改變；偏癱、復視或癲癇發(fā)作；頭顱CT掃描異常(如硬膜下血腫、硬膜外血腫、蛛網膜下腔出血、腦水腫、腦挫傷、彌漫性軸索損傷、顱骨骨折)。

1.3血液標本的采集及測定 觀察組腦外傷后8 h內采用負壓真空抽取靜脈血5 mL，在60 min內，將血液標本進行離心，以3 000 r/min離心10 min，分離血漿后放置于-70 ℃低溫冰箱保存，批量測定血漿和肽素、MMP-9。對照組采用相同的方法采集血液標本。采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)定量分析測定血漿和肽素、MMP-9水平，檢測試劑由上海高創(chuàng)化學科技有限公司生產，檢測儀器用BIO-RAD 680酶標儀，嚴格按試劑盒說明書操作方法進行測定。

2 結 果

2.1頭顱CT掃描結果 觀察組頭顱CT掃描正常56例，異常13例(蛛網膜下腔出血5例，腦挫傷3例，硬腦膜下血腫2例，硬腦膜外血腫1例，腦室出血1例，顱骨骨折1例)。

2.2兩組血漿和肽素、MMP-9水平比較 兩組血漿和肽素、MMP-9水平比較，觀察組顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表2。

表2 兩組血漿和肽素、MMP-9水平比較

2.3MTBI患者血漿和肽素、MMP-9單獨及聯(lián)合檢測的ROC曲線分析 圖1和表3顯示，和肽素診斷MTBI的AUC為0.708(95%CI：0.68～0.73)高于MMP-9 單獨檢測的AUC(0.645，95%CI：0.61～0.68,P=0.004)。和肽素、MMP-9聯(lián)合檢測的AUC為0.738(95%CI：0.71～0.77)顯著高于和肽素和MMP-9單獨檢測的AUC(P=0.001，P<0.001)。聯(lián)合檢測的靈敏度和特異度最高。

注：和肽素為實線;MMP-9為虛線;和肽素+MMP-9為點線。

圖1和肽素、MMP-9聯(lián)合檢測MTBI的ROC曲線

表3 MTBI患者血漿和肽素、MMP-9單獨及聯(lián)合檢測的ROC曲線結果分析

3 討 論

腦外傷的傷情輕重不一，目前，國際上通用GCS評分對傷情進行評估。MTBI：GCS 13～15分、傷后昏迷時間<2 min；中型TBI：GCS 9～12分、傷后昏迷時間20 min～6 h；重型TBI：GCS 3～8分，傷后昏迷時間>6 h，或在傷后24 h內意識惡化并昏迷時間>6 h。

和肽素是前精氨酸加壓素(AVP)原C末端的一部分，由39個氨基酸殘基組成，包括1個富含亮氨酸的核心片段。作為下丘腦-垂體-腎上腺軸活動應激反應的一部分，AVP是由下丘腦產生的活性肽，具有調節(jié)滲透壓維持血流動力學穩(wěn)定及調節(jié)中樞神經系統(tǒng)的作用，是體內最重要的應激激素之一[5]。由于AVP以脈沖形式釋放入血，在體內極不穩(wěn)定，生物半衰期10～20 min，體外測定相當困難，從而限制了AVP的臨床應用。和肽素與AVP有共同的前體，在體內與AVP等摩爾量釋放，且穩(wěn)定性好、檢測方便，因此，檢測和肽素可取代對AVP的直接測量[6-7]。VEISANI等[6]報道，和肽素已經成為TBI的一個新標志物，早期測定血漿和肽素水平可以提供更好的信息。CASTELLO等[8]報道，MTBI患者與非MTBI患者相比，MTBI患者血漿和肽素水平明顯增高,分別為29.89 pmol/L和7.05 pmol/L(P=0.000 8)。RONGZI等[9]報道，血漿和肽素是MTBI最好的生物標志物，其血漿水平不僅在MTBI后早期顯著變化，而且至少可維持24 h。

MMP-9是基質金屬蛋白酶家族中的重要一員，是鋅離子依賴的細胞外基質的主要降解酶，通過調控基質膠原成分的合成和降解，影響細胞的結構和功能，可參與多種疾病的病理過程。MMP-9主要通過降解Ⅳ、Ⅴ型膠原，破壞細胞外基質和基底膜，造成血管損傷。血腦屏障的完整性對于限制TBI后的血管源性水腫至關重要，MMP-9通過攻擊基底固有層蛋白，降解緊密連接復合物的組成部分而破壞血腦屏障，導致血管源性腦水腫等一系列腦損傷[10-11]。莫云芳等[12]報道，腦震蕩患者血漿MMP-9水平明顯增高，以血漿MMP-9水平41 ng/mL為臨界值,其AUC為0.836，鑒別腦震蕩與健康對照組的靈敏度和特異度分別為68.3%和87.9%。

本研究結果發(fā)現(xiàn)，觀察組與對照組相比，血漿和肽素、MMP-9水平明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；和肽素、MMP-9聯(lián)合檢測對MTBI的準確度，顯著高于單獨檢測和肽素的準確度，AUC分別為0.738、0.708(P=0.001)，也高于單獨檢測MMP-9的AUC(0.645，P<0.001)。本研究血漿標本雖然在-70 ℃低溫冰箱保存，但保存時間較長(6個月左右)，可能會因為蛋白質降解，影響檢測結果。

本研究證實血漿和肽素、MMP-9可作為MTBI的標志物，聯(lián)合檢測MTBI患者血漿和肽素、MMP-9水平具有較高的診斷價值，可以作為MTBI診斷的新輔助檢查指標。