羅氏Cobas c702全自動生化分析儀檢測項目性能驗證*

郭東月，覃俊龍，劉小柳，張秀明△

1.廣東省深圳市羅湖區(qū)婦幼保健院檢驗科，廣東深圳 518019；2.廣東省深圳市 羅湖區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學檢驗科，廣東深圳 518001

隨著醫(yī)學檢驗技術(shù)的快速發(fā)展，全自動生化分析儀已成為臨床生化檢驗的主要儀器之一。儀器性能的優(yōu)劣直接關(guān)系檢驗質(zhì)量。為配合實驗室申請ISO15189認證[1]，同時也為了驗證2018年新購入的羅氏 Cobas c702全自動生化分析儀檢測性能，本實驗室依據(jù)美國臨床和實驗室標準協(xié)會(CLSI) EP15-A3[2]、美國臨床實驗室標準化委員會(NCCLS)EP6[3]、NCCLS C28-A2[4]和CLSI EP15-A2[5]文件要求并結(jié)合實驗室實際情況對Cobas c702檢測的共計41個項目的精密度、分析測量范圍(AMR)、臨床可報告范圍(CRR)、參考區(qū)間驗證及比對試驗進行性能驗證[6-8]。本文選擇天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、α-羥丁酸脫氫酶(α-HBDH)、尿素(Urea)、肌酐(CREA)、尿酸(UA)、胱抑素C(CysC)9個項目為例，概述其具體驗證過程，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取來自深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院體檢中心的體檢者和患者的新鮮血清標本。

1.2儀器與試劑 羅氏公司生產(chǎn)的Cobas c702全自動生化分析儀及配套試劑，所有試劑均在有效期內(nèi)使用。AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA和CysC檢測試劑盒批號分別為350647、362473、373994、353486、357224、265554、370063、370063、354311。

校準品與質(zhì)控品 Cobas c702全自動生化分析儀檢測AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA和CysC均采用羅氏原裝試劑配套的校準品，批號分別為305596、305596、305596、305624、305596、305596、305596、305596、277906。低、中、高值質(zhì)控品由伯樂公司提供，批號分別為45801、45802、45803。所有校準品及質(zhì)控品均在有效期內(nèi)使用。

1.3方法 檢測日當天先進行室內(nèi)質(zhì)控，只有在室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下方進行后續(xù)的試驗。

1.3.1精密度驗證 按操作說明書對儀器進行維護保養(yǎng)、校準和質(zhì)控檢測。按照CLSI EP15-A3標準：使用2個水平質(zhì)控品，每一水平每天做一批，每批每個水平重復(fù)測定5次，連續(xù)檢測5天。計算批內(nèi)精密度標準差(Sr)、總精密度標準差(S1)、變異系數(shù)(CV)。批內(nèi)精密度值的確定：計算值Sr小于等于實驗室質(zhì)量目標設(shè)定的標準差，表明核實批內(nèi)精密度與實驗室質(zhì)量目標一致，如大于實驗室質(zhì)量目標，則使用驗證值核實實驗室的批內(nèi)精密度?？偩芏戎档拇_定：計算值S1小于等于實驗室質(zhì)量目標的標準差，表明核實總精密度與實驗室質(zhì)量目標一致，如大于實驗室質(zhì)量目標，則使用驗證值核實實驗室的總精密度。

1.3.2AMR驗證 按操作說明書對儀器進行維護保養(yǎng)、校準和質(zhì)控檢測。按照CLSI EP6文件標準[9-11]：選取接近AMR下限及上限的個體樣本各1個，確保每個個體樣本量接近1.5 mL，分別對這兩樣本進行2次測量，取平均值作為預(yù)期值，然后對兩樣本按水平梯度進行稀釋，配制成5L、4L+1H、3L+2H、2L+3H、1L+4H、5H共6個水平梯度的樣本，分別進行2次重復(fù)測量，計算各水平的均值并與其對應(yīng)的預(yù)期值進行線性回歸分析，判斷標準為R2>0.95，b要求在0.97～1.03范圍內(nèi)[3]。根據(jù)相關(guān)系數(shù)及隨機誤差的不精密度判斷是否呈線性[12-15]，從而核實此項目的AMR是否與廠商聲明一致。

1.3.3CRR驗證 按操作說明書對儀器進行維護保養(yǎng)、校準和質(zhì)控檢測。選取兩例接近AMR上限的患者樣本重復(fù)測量2次，并將樣本稀釋3、5、10倍(確保稀釋后的水平在AMR內(nèi))后上機檢測，每個稀釋樣本重復(fù)測量2次，通過其均值計算樣本的回收率，回收率在90%～110%，且稀釋的水平在AMR內(nèi)則稀釋倍數(shù)即為可接受。CRR=AMR的上限×最大可稀釋倍數(shù)。

1.3.4參考區(qū)間驗證 參考NCCLS C28-A2[4]文件，選擇20份體檢合格的健康人標本進行測定，對結(jié)果進行統(tǒng)計并對儀器說明書提供的參考區(qū)間進行驗證，若20份標本的檢測結(jié)果均在儀器說明書提供的參考區(qū)間內(nèi)或超出給定參考區(qū)間的標本數(shù)量≤2，則驗證通過，否則進行參考區(qū)間確立試驗。

1.3.5比對試驗驗證 選取20例涵蓋整個AMR的患者樣本，水平覆蓋試驗系統(tǒng)的AMR，樣本選取滿足參考區(qū)間內(nèi)、外所占比例相近。20例樣本分別在羅氏 Cobas c702全自動生化分析儀及已有貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀兩個不同檢測系統(tǒng)各進行1次檢測，比對試驗在3 d內(nèi)完成，評估兩儀器間的相對偏倚或者絕對偏倚，如偏倚在1/2的實驗室質(zhì)量目標內(nèi)，或偏倚大于1/2實驗室質(zhì)量目標但小于偏倚驗證值，視為比對試驗通過，否則為比對試驗未通過。

2 結(jié) 果

2.1批內(nèi)精密度驗證結(jié)果 AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC的批內(nèi)精密度計算值Sr均小于實驗室質(zhì)量目標設(shè)定的標準差，表明核實批內(nèi)精密度與實驗室質(zhì)量目標一致； AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC的總精密度計算值S1小于實驗室質(zhì)量目標的標準差，表明核實總精密度與實驗室質(zhì)量目標一致。見表1。

2.2AMR Cobas c702檢測 AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC線性回歸分析呈線性，結(jié)果均符合NCCLS EP6[3]的要求，見表2。

表1 精密度驗證結(jié)果

表2 AMR驗證結(jié)果

注：*表示結(jié)論根據(jù)NCCLS EP6[3]的要求進行判斷。

2.3CRR驗證結(jié)果 結(jié)果見表3。

表3 CRR驗證結(jié)果

2.4參考區(qū)間 20份體檢合格的健康人標本AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC參考區(qū)間驗證通過率均≥90%，驗證通過。見表4。

表4 參考區(qū)間驗證結(jié)果

2.5比對試驗 結(jié)果見表5。

表5 比對試驗驗證結(jié)果

3 討 論

AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC各項目的批內(nèi)精密度計算值Sr均小于性能要求的標準差，總精密度計算值S1均小于性能要求的標準差可認為精密度驗證通過。在確認檢測系統(tǒng)精密度符合要求的基礎(chǔ)上，進行AMR及CRR驗證，結(jié)果顯示，該儀器各項目檢測線性范圍較寬，線性范圍基本涵蓋了臨床標本分布的水平范圍，線性范圍符合要求。AST、LDH、CK、CKMB、α-HBDH、Urea、CREA、UA、CysC的R2均大于0.95，線性驗證符合NCCLS EP6-A[3]文件的要求。選擇接近線性范圍上限的高值標本作最大稀釋度驗證，因為在實際臨床工作中經(jīng)常會遇到檢測結(jié)果超過該項目線性范圍的情況，需要稀釋標本獲得檢測結(jié)果，本試驗以AMR的上限乘以最大的可稀釋倍數(shù)作為CRR。該范圍內(nèi)的標本稀釋后檢驗結(jié)果可靠，符合臨床要求。驗證羅氏原裝配套試劑的參考區(qū)間是否適用于本實驗室，經(jīng)驗證均適用。通過與參比系統(tǒng)的比對，相對或者絕對偏倚均小于1/2實驗室質(zhì)量目標，比對通過。

綜上所述，羅氏Cobas c702全自動生化儀檢測項目的精密度、AMR、CCR、參考區(qū)間驗證和比對試驗均通過驗證，儀器能夠滿足醫(yī)院臨床檢測需求。