三種不同規(guī)格大菱鲆血常規(guī)分析

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摘要：通過(guò)人工方法結(jié)合Pentra 120血細(xì)胞分析儀檢測(cè)三種不同規(guī)格大菱鲆（Scophthalmus maximus）重要血液生理指標(biāo)以期探討大菱鲆不同生長(zhǎng)階段血液指標(biāo)特點(diǎn)。結(jié)果顯示：350 g組大菱鲆粒細(xì)胞絕對(duì)值、中間細(xì)胞百分比、粒細(xì)胞百分比顯著高于70 g組（P<0.05）;70 g組大菱鲆淋巴細(xì)胞百分比顯著高于350 g組（P<0.05）;血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積與魚(yú)體規(guī)格正相關(guān)且350 g組與20 g組間紅細(xì)胞壓積差異顯著（P<0.05）、血紅蛋白含量差異極顯著（P<0.01）;三種不同規(guī)格大菱鲆間血栓細(xì)胞系各項(xiàng)指標(biāo)無(wú)顯著性差異。由此可知因大菱鲆紅細(xì)胞系及白細(xì)胞系部分血液指標(biāo)在不同規(guī)格間存在著不同程度的差異難以得出正常參考范圍;血栓細(xì)胞系受魚(yú)體規(guī)格影響較小可作為大菱鲆血液常規(guī)指標(biāo)基礎(chǔ)參考數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：大菱鲆（Scophthalmus maximus）;血液指標(biāo);血常規(guī)分析

大菱鲆（Scophthalmus maximus）屬硬骨魚(yú)綱鰈形目鲆科俗稱(chēng)歐洲比目魚(yú)在中國(guó)又被稱(chēng)為“多寶魚(yú)”[1]。 自1992年被引入我國(guó)以來(lái)因其生長(zhǎng)速度快、易于進(jìn)行大面積工廠(chǎng)化養(yǎng)殖等特點(diǎn)深受我國(guó)北方沿海養(yǎng)殖者的喜愛(ài)并迅速成為主要海水養(yǎng)殖品種[2]。近年來(lái)隨著養(yǎng)殖密度的不斷增大其病害問(wèn)題也越來(lái)越嚴(yán)重為了更準(zhǔn)確地監(jiān)測(cè)魚(yú)類(lèi)的健康狀況對(duì)其血液生理生化指標(biāo)的研究受到廣大學(xué)者的關(guān)注。

血液是人和動(dòng)物機(jī)體中重要的組成部分魚(yú)體血液中各指標(biāo)的動(dòng)態(tài)變化反映著魚(yú)體自身機(jī)能或外界環(huán)境的改變對(duì)評(píng)價(jià)魚(yú)體健康、營(yíng)養(yǎng)狀況及新陳代謝等都具有重要意義[3-4]。當(dāng)魚(yú)體受到外界環(huán)境影響時(shí)其血液生理生化指標(biāo)也會(huì)發(fā)生變化因此血細(xì)胞分析常被用來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)體的健康、營(yíng)養(yǎng)狀況以及魚(yú)體對(duì)環(huán)境的適應(yīng)情況等。近年來(lái)關(guān)于影響?hù)~(yú)類(lèi)血液生理指標(biāo)變化因素的報(bào)道越來(lái)越多[5-6]但尚缺乏對(duì)大菱鲆血常規(guī)指標(biāo)的分析。為了填補(bǔ)該空白本試驗(yàn)針對(duì)三種不同規(guī)格大菱鲆的19項(xiàng)血常規(guī)指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析旨在探討大菱鲆不同生長(zhǎng)階段血液指標(biāo)的特點(diǎn)為其疾病診斷提供參考依據(jù)同時(shí)為魚(yú)類(lèi)血液學(xué)、細(xì)胞學(xué)研究提供基礎(chǔ)資料。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

取健康狀態(tài)下不同規(guī)格大菱鲆（20、70、350 g）各5尾為試驗(yàn)用魚(yú)魚(yú)體規(guī)格分別為：20 g組：全長(zhǎng)約10 cm平均體質(zhì)量20 g;70 g組：全長(zhǎng)約15 cm平均體質(zhì)量70 g;350 g組：全長(zhǎng)約28 cm平均體質(zhì)量350 g。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1血常規(guī)檢測(cè)自每尾試驗(yàn)用魚(yú)尾靜脈各采取血液1 mL分別置于抗凝管中混勻用人工方法[7]結(jié)合Pentra 120血細(xì)胞分析儀檢測(cè)不同規(guī)格大菱鲆的紅細(xì)胞系、白細(xì)胞系、血栓細(xì)胞相關(guān)血常規(guī)指標(biāo)。

1.2.2試驗(yàn)數(shù)據(jù)處理將所測(cè)數(shù)據(jù)歸納整理用SPSS 22.0軟件求其均值和標(biāo)準(zhǔn)差并通過(guò)獨(dú)立性T檢驗(yàn)分析各組間的差異顯著性以探討大菱鲆不同生長(zhǎng)階段血液指標(biāo)特點(diǎn)。

2結(jié)果

2.1三組不同規(guī)格大菱鲆白細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)

由表1可見(jiàn)白細(xì)胞系相關(guān)指標(biāo)中350 g組粒細(xì)胞絕對(duì)值、中間細(xì)胞百分比、粒細(xì)胞百分比均顯著高于70 g組（P<0.05）350 g組淋巴細(xì)胞百分比顯著低于70 g組（P<0.05）其他指標(biāo)組間差異均不顯著（P>0.05）。

2.2三組不同規(guī)格大菱鲆紅細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)

由表2可見(jiàn)350 g組大菱鲆血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積顯著高于20 g組（P<0.05）其中350 g組與20 g組血紅蛋白含量差異極顯著（P<0.01）其余指標(biāo)各組間無(wú)顯著性差異。

2.3三組不同規(guī)格大菱鲆血栓細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)

三組不同規(guī)格大菱鲆血栓細(xì)胞系組間各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著性差異（P>0.05）詳見(jiàn)表3。

3討論

3.1大菱鲆白細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)分析

白細(xì)胞是魚(yú)體主要的免疫細(xì)胞與機(jī)體的防御功能密切相關(guān)隨著魚(yú)體增長(zhǎng)或外界環(huán)境的變化白細(xì)胞數(shù)目也在不斷變化。孟繁伊等[8]研究表明1～4齡花羔紅點(diǎn)鮭體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量逐漸遞增。此外孟繁伊等[8]還發(fā)現(xiàn)1齡鯉血液中首次出現(xiàn)嗜中性粒細(xì)胞而在2齡鯉血液中才出現(xiàn)嗜酸性粒細(xì)胞。周雪瑩等[9]表明大菱鲆的粒細(xì)胞中只含有嗜中性粒細(xì)胞不含有嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞;本次試驗(yàn)結(jié)果顯示350 g組粒細(xì)胞絕對(duì)值、粒細(xì)胞百分比均顯著高于70 g組（P<0.05）而與20 g組無(wú)明顯差異（P>0.05）這可能就是因?yàn)椴煌N類(lèi)的粒細(xì)胞在大菱鲆體內(nèi)出現(xiàn)的時(shí)期不同所致但本次試驗(yàn)所用血細(xì)胞分析儀為三分型未對(duì)粒細(xì)胞進(jìn)行詳細(xì)分類(lèi)因此具體原因仍有待探索。本次檢測(cè)結(jié)果中出現(xiàn)了三組不同規(guī)格大菱鲆淋巴細(xì)胞絕對(duì)值和中間細(xì)胞絕對(duì)值組間差異不顯著（P<0.05）但350 g組與70 g組淋巴細(xì)胞百分比與中間細(xì)胞百分比卻差異顯著的現(xiàn)象（P>0.05）這可能是因?yàn)槭馨准?xì)胞系內(nèi)其它指標(biāo)的影響導(dǎo)致不同組間淋巴細(xì)胞與中間細(xì)胞在所有白細(xì)胞中出現(xiàn)的比列差異顯著也可能是因?yàn)轸~(yú)體尚處于發(fā)育階段機(jī)體還未成熟細(xì)胞受分裂周期的影響在數(shù)量上浮動(dòng)較大所致。

3.2大菱鲆紅細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)分析

紅細(xì)胞是魚(yú)體內(nèi)含量最多的細(xì)胞。臧坤等[10]表明牙鲆體內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)顯著高于白細(xì)胞數(shù)。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示不同規(guī)格大菱鲆體內(nèi)紅細(xì)胞的數(shù)量亦高于血栓細(xì)胞和白細(xì)胞。由此可見(jiàn)不同品種魚(yú)類(lèi)的血常規(guī)指標(biāo)存在相似性。血液中紅細(xì)胞對(duì)氧氣的運(yùn)輸主要依托血紅蛋白來(lái)完成紅細(xì)胞的數(shù)量與血液攜帶氧氣的能力正相關(guān)[11-12]。本次試驗(yàn)結(jié)果顯示350 g組血紅蛋白含量極顯著高于20 g組（P<0.01）這可能是因?yàn)轶w格較大的大菱鲆體內(nèi)氣體交換量也大為了提高載氧效率機(jī)體會(huì)產(chǎn)生相對(duì)較多的紅細(xì)胞和血紅蛋白以保證呼吸運(yùn)動(dòng)正常進(jìn)行。紅細(xì)胞壓積是影響血液黏度最主要的因素紅細(xì)胞壓積越大其全血黏度值越高[13-14]魚(yú)體在游動(dòng)時(shí)血液循環(huán)的速度與血液流暢度密切相關(guān)黏稠的血液流暢度往往較低。本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明隨著魚(yú)體規(guī)格的增大紅細(xì)胞壓積逐漸變大且350 g組紅細(xì)胞壓積顯著高于20 g組（P<0.05）這或許就是規(guī)格較大的魚(yú)體沒(méi)有規(guī)格較小的魚(yú)體喜歡游動(dòng)的原因。

3.3大菱鲆血栓細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)分析

血栓細(xì)胞的歸類(lèi)問(wèn)題一直存在爭(zhēng)議袁仕取等[15]認(rèn)為血栓細(xì)胞應(yīng)歸為白細(xì)胞的一類(lèi)尾崎久雄[16]則認(rèn)為血栓細(xì)胞應(yīng)單獨(dú)歸為一類(lèi)。為了更清晰地表述各組數(shù)據(jù)之間的差異本次采用尾崎久雄的分類(lèi)方法將血栓細(xì)胞系單獨(dú)分析。

試驗(yàn)所用三種不同規(guī)格大菱鲆血栓細(xì)胞相關(guān)血液指標(biāo)差異均不顯著（P>0.05）表明血栓細(xì)胞系在魚(yú)體生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中相對(duì)穩(wěn)定各項(xiàng)指標(biāo)受魚(yú)體規(guī)格影響較小本試驗(yàn)結(jié)果可作為大菱鲆臨床診斷中血常規(guī)參考依據(jù)。此外血栓細(xì)胞的數(shù)目、壓積以及平均血栓細(xì)胞體積與魚(yú)體規(guī)格呈現(xiàn)正相關(guān)狀態(tài)這可能是因?yàn)檠?xì)胞數(shù)量以及壓積必須隨著魚(yú)體規(guī)格增大而加大以保證機(jī)體正常的抗凝血作用;而血栓細(xì)胞寬度隨著魚(yú)體規(guī)格增大反而降低或許是因?yàn)檠?xì)胞數(shù)量增多所致。

3.4不同規(guī)格大菱鲆血常規(guī)的綜合分析

三組不同規(guī)格大菱鲆白細(xì)胞系、紅細(xì)胞系中部分指標(biāo)受魚(yú)體規(guī)格影響較大不能形成確切的血常規(guī)參考值血栓細(xì)胞系受魚(yú)體規(guī)格影響較小可考慮將此試驗(yàn)結(jié)果作為建立大菱鲆血常規(guī)正常值的參考依據(jù)。但要注意的是在魚(yú)體生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中不同種類(lèi)的細(xì)胞發(fā)揮著不同的作用受外界環(huán)境的影響或機(jī)體功能的改變血液指標(biāo)也會(huì)發(fā)生相應(yīng)的改變?nèi)缭诓煌乃疁?、養(yǎng)殖密度及營(yíng)養(yǎng)狀況下測(cè)得的魚(yú)體內(nèi)各項(xiàng)血液指標(biāo)也不同由于本試驗(yàn)選用大菱鲆的規(guī)格、數(shù)量均較少且未將季節(jié)、飼養(yǎng)條件、養(yǎng)殖密度等其它因素參考在內(nèi)因此容易出現(xiàn)偶然性的結(jié)果所以本次試驗(yàn)結(jié)果也就僅可作為建立大菱鲆血常規(guī)的參考依據(jù)而不能算得出其確切范圍。由此可見(jiàn)建立大菱鲆血常規(guī)正常參考值任重而道遠(yuǎn)還需廣大學(xué)者共同努力擴(kuò)大魚(yú)體規(guī)格加大樣本數(shù)量將季節(jié)、飼養(yǎng)環(huán)境等現(xiàn)實(shí)因素都考慮進(jìn)去以此建立出一套健全的大菱鲆血常規(guī)正常值參考范圍。

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Abstract：In order to explore the characteristics of blood indexes in different growth stages of Scophthalmus maximus （turbot），the blood routine analysis of turbot was performed by manual testing and Pentra120 blood analyzer.The results showed that there were significant differences in the absolute value of granulocytes，percentage of lymphocytes，intermediate cells and granulocytes between 70 g group and 350 g group （P<0.05），the hematokrit were significantly different （P<0.05） and hemoglobin was different （P<0.01） between 20 g group and 350 g group，but there was no significant difference among the other 13 indexes.The result indicated that： some leukocyte-related and RBC-related blood indices of turbot were unstable，it was difficult to obtain normal reference range，but thrombus cell-related blood indices were relatively stable，could be used as the basis of turbots normal blood indices.

Key words：Scophthalmus maximus;blood index;blood routine analysis

（收稿日期：2020-04-27）