沙 美
(南京威爾藥業(yè)股份有限公司,江蘇 南京 210042)
脂肪醇聚氧乙烯醚是最重要的一類非離子表面活性劑。分子中的醚鍵不易被酸、堿破壞,所以穩(wěn)定性較高,水溶性較好,耐電解質(zhì),易于生物降解,泡沫小,該類表面活性劑大都以環(huán)氧乙烷為乙氧基化試劑,以氫氧化鈉或者氫氧化鉀為催化劑[1],在后續(xù)反應(yīng)的精制過程中,會(huì)用到乙酸來中和多余的催化劑,使產(chǎn)品本身的性質(zhì)保持在中性或弱酸性,成品中會(huì)殘留少量的乙酸,作為雜質(zhì)會(huì)影響到產(chǎn)品質(zhì)量,常規(guī)乙酸方法的測(cè)定會(huì)采用氣相色譜法[2],但可能會(huì)遇到峰型不佳或者檢測(cè)靈敏度偏低的情況,也有文獻(xiàn)報(bào)道采用高效液相色譜法[3],但流動(dòng)相為甲醇-緩沖液系統(tǒng),檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm,因?yàn)榧状嫉慕刂共ㄩL(zhǎng)接近210 nm,所以我們改用乙腈和磷酸鹽緩沖系統(tǒng),建立了輔料C16-18醇聚氧乙烯醚中乙酸的測(cè)定方法,該方法靈敏度和準(zhǔn)確度較高。
儀器:Thermou3000高效液相色譜儀
試劑:乙酸(ACS,色譜級(jí),批號(hào)LOT27Y1709DK),乙腈(ACS,色譜級(jí),批號(hào)LOT45Y1708BR),磷酸二氫鉀(分析純),磷酸(分析純),C16-18醇聚氧乙烯醚(南京威爾藥業(yè)股份有限公司,批號(hào)20190701k)
色譜柱:CAPCELL PAK C18(4.6 mm*250 mm,5 μm);流動(dòng)相A:乙腈-pH3.0磷酸鹽緩沖液(5∶95);流動(dòng)相B:乙腈;柱溫35 ℃;進(jìn)樣量20 μl;流速1.0 mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng)210 nm,流動(dòng)相梯度見表1。
表1 流動(dòng)相梯度表
2.2.1對(duì)照品溶液
取乙酸適量,加水溶解并定量稀釋至濃度為25 μg/ml的溶液,作為對(duì)照溶液。
2.2.2供試品溶液
取本品100 mg,精密稱定,置20 ml量瓶中,加水溶解并稀釋至刻度,搖勻,作為供試品溶液。
2.3.1專屬性試驗(yàn)
取空白溶劑和乙酸對(duì)照溶液各20 μl,分別注入液相色譜儀,結(jié)果空白溶劑在乙酸出峰位置沒有干擾。
2.3.2檢測(cè)限和定量限
取乙酸溶液逐級(jí)稀釋至S/N約為10作為定量限,S/N約為3作為檢測(cè)限,結(jié)果見表2。
表2 乙酸檢測(cè)限和定量限
乙酸的定量限濃度為0.25 μg/ml,相當(dāng)于0.005%可以定量,檢測(cè)限濃度為0.125 μg/ml,相當(dāng)于0.0025%被檢出。
2.3.3線性范圍
分別取濃度約為100 μg/ml的乙酸對(duì)照溶液0.5、1.0、2.0、2.5、3.0、4.0、5.0 ml置10 ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,作為不同濃度的對(duì)照溶液,分別取不同濃度的乙酸對(duì)照溶液20 μl注入液相色譜儀,以濃度C(μg/ml)為橫坐標(biāo),以峰面積A為縱坐標(biāo)進(jìn)行直線回歸,結(jié)果見表3。
表3 乙酸線性
結(jié)果表明:乙酸濃度在5.49~54.90 μg/ml之間時(shí),濃度與峰面積線性關(guān)系良好。
2.3.4進(jìn)樣精密度試驗(yàn)
取線性4#溶液連續(xù)進(jìn)樣6針,考察進(jìn)樣精密度,結(jié)果見表4。
表4 乙酸進(jìn)樣精密度
結(jié)果表明乙酸進(jìn)樣的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD小于2.0%,說明測(cè)定數(shù)據(jù)間的波動(dòng)性小,即本方法精密度試驗(yàn)符合要求。
2.3.5重復(fù)性
取20190701k批樣品適量,精密稱定,加水溶解并制成每1 ml含5 mg的溶液,作為供試品溶液,取乙酸適量,精密稱定,加水溶解并定量稀釋至濃度約為25 μg/ml的溶液,作為對(duì)照溶液,按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算,平行測(cè)定6份,結(jié)果見表5。
表5 乙酸重復(fù)性
結(jié)果表明:該方法的重復(fù)性良好。
2.3.6中間精密度試驗(yàn)
不同人員不同時(shí)間按照測(cè)定方法平行測(cè)定6份,結(jié)果見表6。
表6 乙酸中間精密度
結(jié)果表明:該方法的中間精密度良好。
2.3.7回收率試驗(yàn)
取20190701k樣品適量,加水溶解后,按照限度的80%、100%和120%加入一定量的乙酸溶液,每個(gè)水平平行操作3份,計(jì)算回收量和回收率,結(jié)果如下:
表7 乙酸加樣回收率
結(jié)果表明:該方法測(cè)定乙酸,回收率良好。
2.3.8溶液穩(wěn)定性
取供試品溶液,分別于0、2.5、5、7.5、10和16 h進(jìn)樣,供試品溶液中乙酸的峰面積變化見表8。
表8 乙酸溶液穩(wěn)定性
結(jié)果表明:供試品溶液室溫放置16h穩(wěn)定。
該方法測(cè)定C16-18醇聚氧乙烯醚中的殘留的乙酸,準(zhǔn)確可靠,可以應(yīng)用到同類輔料的項(xiàng)目中,具有一定的實(shí)用意義。