基于特異性識(shí)別生物探針檢測(cè)食品中雌激素殘留研究進(jìn)展

陳婷婷 - 王 鑫 陶曉奇 -

(1. 西南大學(xué)食品科學(xué)學(xué)院，重慶 400715；2. 西南大學(xué)國(guó)家級(jí)食品科學(xué)與工程實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，重慶 400715)

雌激素種類繁多，總體可分為內(nèi)源性激素和環(huán)境雌激素兩類。內(nèi)源性激素由機(jī)體分泌產(chǎn)生，包括雌酮(E1)、雌二醇(E2)和雌三醇(E3)等；環(huán)境雌激素是生物體通過外界環(huán)境攝取，并與機(jī)體分泌的雌激素具有相同作用，包括雙酚A(BPA)、己烯雌酚(DES)等[1-2]。由于10-12級(jí)別的殘留即可對(duì)人類內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生不良影響[3]，因此食品中雌激素的殘留備受關(guān)注，且已被美國(guó)環(huán)境保護(hù)局列為緊急關(guān)注的污染物。

由于雌激素的非法使用，在地表水甚至是飲用水中均有發(fā)現(xiàn)，其濃度范圍一般為10-12～10-9[2]，并造成了水生動(dòng)物體內(nèi)富含雌激素；同時(shí)，西方飲食中60%～70%的食源性雌激素來源于牛奶和乳制品[4]。1996年歐盟規(guī)定禁止使用雌激素作為促生長(zhǎng)劑，2002年《中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部公告第235號(hào)》也明確指出，己烯雌酚及其鹽、酯為禁止使用藥物，在動(dòng)物食品中不得檢出[5]。

目前，雌激素的檢測(cè)方法包括高效液相色譜法[6]、液質(zhì)聯(lián)用法[7]、超高效液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法[8]等，但儀器昂貴、耗時(shí)長(zhǎng)和前處理復(fù)雜，不適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)[9]。文章擬綜述近幾年基于特異性識(shí)別生物探針的酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)[10-11]、側(cè)流免疫層析技術(shù)[12]以及電化學(xué)生物傳感器[13]在相關(guān)檢測(cè)中的應(yīng)用，并分析其原理和特性，以期為食品安全監(jiān)控提供參考。

1 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)

ELISA 法操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、成本較低且不需大型儀器設(shè)備，適合現(xiàn)場(chǎng)大批量樣品的快速檢測(cè)[14]。根據(jù)檢測(cè)原理的不同，ELISA又分為直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA和間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA。

1.1 直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA

直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA是將特定酶標(biāo)記的抗原或抗體與待測(cè)物直接競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體或抗原，根據(jù)酶催化底物的顯色程度對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定量分析。Chatchaporn等[15]通過ELISA和重組酵母篩選法相結(jié)合的方法，研究了7種酶結(jié)合物對(duì)8種抗體的影響，其中酶標(biāo)抗體(Ab∝E2-ACT1#3/EE2-乙酸HRP對(duì))的靈敏度最佳，檢測(cè)限為(0.04±0.02) μg/L。當(dāng)加標(biāo)河水濃度為1～50 ng/L時(shí)，回收率為68.6%～252.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.5%～86.3%，該方法與采用氣相色譜—質(zhì)譜法得到的結(jié)果具有良好的相關(guān)性(r=0.909)。與間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA相比，由于省去了二抗的使用，該方法大大簡(jiǎn)化了試驗(yàn)操作，縮短了檢測(cè)時(shí)間，并且可以進(jìn)行定量分析，檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，適用于現(xiàn)場(chǎng)眾多樣品初篩，但檢測(cè)靈敏度不如間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA。

生物素—親和素系統(tǒng)(BAS)是以生物素與親和素之間高親合力的牢固結(jié)合為基礎(chǔ)的系統(tǒng)，并且一個(gè)親合素分子最多可以標(biāo)記4個(gè)生物素分子，即BAS與ELISA聯(lián)用具有多級(jí)放大效應(yīng)，提高靈敏度。梁祖培等[16]利用此方法測(cè)定牛奶中雌三醇含量，即用經(jīng)過生物素化的雌三醇單克隆抗體代替 ELISA中常規(guī)的酶標(biāo)記抗體，再與親和素—辣根過氧化物酶結(jié)合，該方法的IC50值為0.689 ng/mL，檢測(cè)范圍為0.149～3.270 ng/mL，與單克隆抗體 ELISA 相比，靈敏度提高了2倍左右。在實(shí)際牛奶樣品檢測(cè)中，平均回收率為94.9%～115.2%，變異系數(shù)為10.5%～12.8%，該方法不僅可以提高靈敏度，還具有穩(wěn)定性高、回收率高和重復(fù)性好的特點(diǎn)，但親和素—酶結(jié)合物的孵育時(shí)間較長(zhǎng)(30 min)，且樣品中存在的復(fù)雜多變成分會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生影響。

1.2 間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA

間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA是一種利用已知抗原檢測(cè)未知抗體的檢測(cè)方法，待檢物與抗原在載體表面發(fā)生抗原抗體特異性結(jié)合，加入酶標(biāo)二抗及顯色底物后，觀察顯色反應(yīng)[17]。白宇等[18]利用單克隆抗體建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA來滿足食品中殘留雌二醇的檢測(cè)要求，通過優(yōu)化一抗孵育時(shí)間、吐溫-20洗滌液濃度、二抗孵育時(shí)間以及TMB顯色時(shí)間4個(gè)ELISA參數(shù)以獲得特異性高的雌二醇抗體。結(jié)果顯示，與雌三醇、乙炔雌二醇的交叉反應(yīng)率為0.31%，0.25%，與雌酮、炔雌醚等交叉反應(yīng)率<0.10%。雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液的IC50值為1.636 ng/mL，線性范圍為0.202～13.281 ng/mL。何方洋等[19]通過對(duì)雌三醇分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造得到雌三醇抗原，并對(duì)動(dòng)物免疫得到靈敏度為0.05 μg/L的單克隆抗體，將該抗體與辣根過氧化物酶偶聯(lián)得到酶標(biāo)抗體從而建立間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA進(jìn)行雌三醇的測(cè)量。雌三醇標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)限為0.05 μg/L，測(cè)定范圍為0.05～1.35 μg/L；環(huán)境水樣品中雌三醇的檢測(cè)限為0.25 μg/L，回收率為72.00%～108.00%，變異系數(shù)<15.00%。

酶聯(lián)免疫吸附法快速簡(jiǎn)便且靈敏度高，可以定量檢測(cè)食品中殘留的雌激素；但特異性欠佳，易發(fā)生交叉反應(yīng)，且存在難以實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)檢測(cè)、完全自動(dòng)化以及檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)等問題[20]。目前該方法需要研究具有高度免疫性的重組抗原來提高免疫原性、開發(fā)不同底物顯示不同顏色的酶制劑以實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)檢測(cè)、與其他檢測(cè)技術(shù)如PCR相結(jié)合來有效提高檢測(cè)效率。

2 側(cè)流免疫層析技術(shù)

側(cè)流免疫層析技術(shù)借助毛細(xì)作用使樣品在硝酸纖維素膜上泳動(dòng)，層析過程中免疫復(fù)合物被富集在T線區(qū)域，根據(jù)顏色深淺或熒光信號(hào)強(qiáng)度，短時(shí)間便可得到直觀結(jié)果(見圖 1)[21]。目前，示蹤材料除傳統(tǒng)的熒光素和膠體金外，還有稀土元素、熒光微球、量子點(diǎn)以及磁珠等[22]。由于其操作簡(jiǎn)單和快速檢測(cè)的特點(diǎn)，已被廣泛應(yīng)用于殘留雌激素檢測(cè)中。

1. 樣品墊 2. 結(jié)合墊 3. 分析膜 4. 質(zhì)控線(C) 5. 檢測(cè)線(T) 6. 吸水墊 7. 底板

圖1 免疫層析試紙條結(jié)構(gòu)圖[22]

Figure 1 Immunochromatographic strip structure

2.1 膠體金免疫層析技術(shù)

膠體金免疫層析技術(shù)是一種用膠體金標(biāo)記抗體，與待測(cè)物形成免疫復(fù)合物后被富集在檢測(cè)帶處，達(dá)到一定程度時(shí)出現(xiàn)肉眼可見的顏色，從而具有直觀試驗(yàn)現(xiàn)象的技術(shù)[23]。Wang等[24]使用膠體金作為抗體標(biāo)記物，開發(fā)了測(cè)定牛奶中E1、17β-E2和E3的3種膠體金免疫層析試紙條。E1、17β-E2、E3的檢測(cè)限分別為0.053，0.061，0.038 ng/mL，線性范圍分別為0.107～1.964，0.123～1.066，0.076～2.032 ng/mL。加標(biāo)牛奶的E1、17β-E2、E3回收率分別為81.0%～87.9%，86.8%～99.0%，87.0%～93.0%，且所測(cè)結(jié)果與氣相色譜—質(zhì)譜法和IC-ELISA的結(jié)果一致，10 min內(nèi)就能完成對(duì)樣品的篩選。白宇等[25]將檸檬酸三鈉還原法制備的膠體金顆粒與E2兔多克隆抗體偶聯(lián)，并優(yōu)化抗原包被量和多克隆抗體標(biāo)記量等反應(yīng)條件組裝成試紙條以檢測(cè)牛奶中雌二醇含量，檢測(cè)限為10 μg/L，對(duì)雌酮、己烯雌酚等類似物具有較好的特異性。且該方法不需要復(fù)雜的前處理，只需對(duì)牛奶進(jìn)行2倍稀釋就可直接用于檢測(cè)，樣品判定值為20 μg/L，適合現(xiàn)場(chǎng)對(duì)大批量牛奶中E2殘留的初篩。

由于部分檢測(cè)結(jié)果仍需用肉眼觀察，只能用于定性或半定量的檢測(cè)，且會(huì)造成假陽性和假陰性現(xiàn)象；因此，提高檢測(cè)的靈敏度、實(shí)現(xiàn)多元檢測(cè)以及定量檢測(cè)等成為該方法的發(fā)展方向，目前可以通過聯(lián)合其他技術(shù)或者改進(jìn)膜結(jié)構(gòu)來提高靈敏度和特異性，且隨著膠體金讀數(shù)儀的發(fā)展，可以建立針對(duì)現(xiàn)場(chǎng)定量、智能化和功能多樣化的快速檢測(cè)體系，實(shí)現(xiàn)膠體金免疫層析技術(shù)在基層的廣泛應(yīng)用[26]。

2.2 熒光免疫層析技術(shù)

2.2.1 上轉(zhuǎn)換發(fā)光免疫層析法 上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料是由稀土元素?fù)诫s在惰性材料中形成的納米級(jí)示蹤材料[20]，上轉(zhuǎn)換發(fā)光免疫層析法是基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料與抗原或抗體結(jié)合的一種新型檢測(cè)方法。姜會(huì)聰?shù)萚27]采用戊二醛法將上轉(zhuǎn)化顆粒標(biāo)記單克隆抗體結(jié)合物作為熒光信號(hào)探針，以此建立上轉(zhuǎn)換發(fā)光免疫層析法檢測(cè)牛奶中殘留雌二醇。以雌二醇標(biāo)準(zhǔn)溶液為樣品，最低檢測(cè)限為2.75 ng/mL，線性范圍為5～2 000 ng/mL，變異系數(shù)<10%，15 min內(nèi)即可完成全部檢測(cè)，加標(biāo)牛奶回收率達(dá)88.88%～103.50%，表明該方法適用于現(xiàn)場(chǎng)大批量檢測(cè)。王瑜等[28]基于上轉(zhuǎn)換免疫層析試紙條定量檢測(cè)牛奶中殘留的己烯雌酚(DES)，將表面功能化修飾后的轉(zhuǎn)換納米顆粒(UCNPs)-NaYF4：Yb,Er與己烯雌酚單克隆抗體偶聯(lián)制備出新型的熒光探針用于DES標(biāo)準(zhǔn)溶液的檢測(cè)，以牛血清白蛋白—己烯雌酚偶聯(lián)物和羊抗鼠二抗分別噴涂硝酸纖維膜，形成試紙條檢測(cè)線和質(zhì)控線。線性范圍為25～10 000 ng/mL，檢測(cè)限為20.84 ng/mL，單個(gè)樣品檢測(cè)時(shí)間為15 min，批內(nèi)和批間樣品變異系數(shù)均<10%；加標(biāo)牛奶的平均回收率為90.1%～115.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差<5.0%，與高效液相色譜法相比具有較好的一致性。

由于上轉(zhuǎn)換發(fā)光材料具有穩(wěn)定的發(fā)光特性，可以完全消除背景熒光的干擾，從而具有耐用性強(qiáng)、有效期長(zhǎng)、靈敏度高和可重復(fù)檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。目前，上轉(zhuǎn)換發(fā)光免疫層析法主要應(yīng)用于核酸和病原菌檢測(cè)，食品安全的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)較少，大都停留在實(shí)驗(yàn)室階段。

2.2.2 時(shí)間分辨免疫層析法 時(shí)間分辨免疫層析法是用鑭系稀土元素如[銪(Eu3 +) ]螯合物作為標(biāo)記示蹤物，螯合物經(jīng)激發(fā)后可發(fā)射特征性的熒光，根據(jù)熒光強(qiáng)度可測(cè)得待測(cè)物含量[9]。Janne等[29]開發(fā)了用于雌二醇檢測(cè)的高性能非競(jìng)爭(zhēng)性免疫分析法—時(shí)間分辨熒光免疫分析法，并進(jìn)行了雌二醇?xì)埩魴z測(cè)。該方法的靈敏度和特異性較高，檢測(cè)限為3.0 pg/mL。同時(shí)，該方法也可以對(duì)不太復(fù)雜的基質(zhì)(廢水等)進(jìn)行E2的殘留檢測(cè)。由于稀土離子螯合物熒光壽命長(zhǎng)，該方法既具有波長(zhǎng)分辨又具有時(shí)間分辨，能消除背景熒光干擾，大幅提高檢測(cè)靈敏度，并且可以實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)檢測(cè)。目前對(duì)于時(shí)間分辨免疫層析技術(shù)有望從新型材料的應(yīng)用、標(biāo)記物的更新、更理想螯合劑的設(shè)計(jì)和多組分檢測(cè)等方面進(jìn)行研究。

3 電化學(xué)生物傳感器

電化學(xué)生物傳感器的原理是待測(cè)物質(zhì)與修飾在電極上的抗體、核酸適配體、分子印記聚合物等生物識(shí)別元件結(jié)合，導(dǎo)致生物識(shí)別元件的結(jié)構(gòu)或活性發(fā)生改變，進(jìn)而轉(zhuǎn)變?yōu)殡妼W(xué)信號(hào)實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè)物的定量檢測(cè)。該方法具有檢測(cè)速度快、抗干擾能力強(qiáng)、響應(yīng)好和靈敏度高的特點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用[30]。

3.1 生物電化學(xué)傳感器

Donini等[31]基于還原氧化石墨烯(RGO)和銀納米粒子(AgNPs)的協(xié)同組合開發(fā)了一種改性玻碳電極，用于測(cè)定自來水樣品中的雌三醇，用掃描電鏡和循環(huán)伏安法對(duì)RGO-AgNPs復(fù)合材料的形貌和電化學(xué)行為進(jìn)行了表征，表明RGO被Ag納米粒子修飾。在最優(yōu)條件下，檢測(cè)限為21.0 nmol/L，線性范圍為0.1～3.0 μmol/L，與傳統(tǒng)方法相比，該方法獲得了1.5%的重現(xiàn)性和1.3%的可重復(fù)性，加標(biāo)自來水的回收率為96.4%～108.2%。Jodar等[32]提出了一種穩(wěn)定的還原氧化石墨烯(RGO)、金納米粒子(GNPs)和馬鈴薯淀粉(PS)傳感薄膜，對(duì)自來水中的雌三醇進(jìn)行檢測(cè)。所得的RGO-GNPs-PS電極具有較高的陽極和陰極峰電流，最佳條件下，檢測(cè)限為0.48 μmol/L，線性范圍為1.5～22.0 μmol/L。加標(biāo)自來水的回收率為100.7%～106.5%，證明該方法可檢測(cè)水生環(huán)境中雌三醇含量。

3.2 免疫電化學(xué)傳感器

食品安全檢測(cè)的電化學(xué)傳感器種類繁多，其中免疫傳感器的研究相對(duì)較早，發(fā)展也相對(duì)成熟，它具有方便、體積小、成本低、可實(shí)時(shí)在線檢測(cè)以及制備簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)[33]。秦藝菲等[34]通過在金電極表面修飾羧基化氧化石墨烯-硫堇—納米金—抗體—抗原的過程，構(gòu)建了一種應(yīng)用于水和牛奶中17β-雌二醇微量檢測(cè)的電化學(xué)免疫傳感器。在最優(yōu)的抗體抗原結(jié)合時(shí)間和PBS緩沖液pH條件下，根據(jù)電化學(xué)工作站測(cè)得的電流大小可確定17β-雌二醇含量，其線性范圍為0.3～3.0 μg/mL，檢測(cè)限為50 pg/mL，加標(biāo)自來水和牛奶的回收率分別為93.0%～100.8%，99.0%～100.3%，證明該裝置可用于實(shí)際樣品的檢測(cè)。電化學(xué)免疫傳感器具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性高等特點(diǎn)，但仍存在一些問題，如電極表面抗原抗體的穩(wěn)定性差、裝置構(gòu)成復(fù)雜和未應(yīng)用到實(shí)際現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)等缺點(diǎn)。

3.3 分子印跡電化學(xué)傳感器

分子印跡電化學(xué)傳感器是以分子印記聚合物(MIPs)作為生物識(shí)別元件的檢測(cè)技術(shù)，MIPs能特異性地與目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合，具有耐受能力強(qiáng)、穩(wěn)定性好、可重復(fù)使用等特點(diǎn)，被廣泛用于雌激素檢測(cè)中。Wen等[35]在納米金薄膜固定到金電極表面形成的納米電極上合成了MIPs，檢測(cè)水、豬肉和牛奶中17β-雌二醇?xì)埩袅?。最?yōu)條件下，檢測(cè)范圍為1×10-12～1×10-5mol/L，最低檢測(cè)限為1×10-13mol/L。該方法對(duì)與17β-雌二醇結(jié)構(gòu)相似的化合物不具有親和力，特異性好。水、豬肉以及牛奶3種實(shí)際樣品的加標(biāo)回收率為95.1%～106.0%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均<6.09%。Messaoud等[36]將超聲輔助磁性分子印跡聚合物固定在用炭黑納米顆粒和金納米顆粒組成的納米復(fù)合材料修飾的電極上，檢測(cè)雙酚A含量。最優(yōu)條件下，線性范圍為0.07 ～10.00 μmol/L，檢測(cè)限為8.8 nmol/L，實(shí)際水和礦泉水的回收率為96.4%～104.3%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.18%～8.30%。

MIPs具有穩(wěn)定性好、耐受能力強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，故分子印跡電化學(xué)傳感器兼?zhèn)洳僮骱?jiǎn)單、檢測(cè)快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)等特點(diǎn)。但目前的研究主要集中于小分子領(lǐng)域，有望通過印跡和識(shí)別機(jī)理的研究實(shí)現(xiàn)新型交聯(lián)劑和功能單體的開發(fā)，從而逐步過渡到大分子領(lǐng)域的應(yīng)用探索[37-38]。

3.4 核酸適配體電化學(xué)傳感器

核酸適配體是利用體外篩選技術(shù)—指數(shù)級(jí)富集系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)從核酸分子文庫獲得的單鏈寡核苷酸序列，其特異性強(qiáng)、親和力高[39]，在某些應(yīng)用中可代替抗體作為修飾在電極上的生物識(shí)別元件。Alinezhad等[40]將雌二醇的裂解DNA適配體作為識(shí)別探針并固定在金電極表面形成電化學(xué)核酸適配體傳感器。E2存在時(shí)，裂解適配體與E2結(jié)合，在電極表面形成復(fù)合物作為橋聯(lián)物，導(dǎo)致弱電流；無E2存在時(shí)，電流增強(qiáng)。該傳感器無需復(fù)雜的操作程序和昂貴的設(shè)備，可在30 min內(nèi)識(shí)別雌二醇。其線性范圍為1.2×10-6～1.0×10-4μmol/L和1.0×10-4～7.0×10-3μmol/L，檢測(cè)限為5.0×10-7μmol/L。自來水樣品的檢測(cè)限為5.0×10-7μmol/L；牛奶的檢測(cè)限為7.0×10-7μmol/L，線性范圍為3.0×10-6～3.0×10-4μmol/L和3.0×10-4～9.0×10-3μmol/L，回收率為89.4%～101.7%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8%～6.4%。電化學(xué)核酸適配體傳感器簡(jiǎn)便快捷、成本低廉并可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)大批量檢測(cè)，核酸適配體的寡核苷酸性質(zhì)使其十分易于與各種核酸、核酸酶等生物信號(hào)放大技術(shù)相結(jié)合，從而大大提高生物傳感器的分析靈敏度[41]。但核酸適配體鏈和互補(bǔ)鏈雜交時(shí)間較長(zhǎng)，導(dǎo)致響應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，同時(shí)該方法對(duì)環(huán)境條件變化敏感，穩(wěn)定性欠佳。

電化學(xué)生物傳感器具有靈敏度高和檢測(cè)重復(fù)性好等優(yōu)勢(shì)，但目前研制出的電化學(xué)生物傳感器大多只能檢測(cè)一種物質(zhì)，不能滿足同時(shí)檢測(cè)多種物質(zhì)的需求，研究電極新型修飾材料、改變電極表面微觀結(jié)構(gòu)、實(shí)現(xiàn)電化學(xué)生物傳感器智能化、高效化、商業(yè)化、便攜化是推動(dòng)其廣泛應(yīng)用的主要發(fā)展方向。

表1 雌激素的快速檢測(cè)方法比較Table 1 Comparison of rapid detection methods for estrogen

4 結(jié)論與展望

文章綜述了基于特異性識(shí)別生物探針的ELISA、側(cè)流免疫層析法以及電化學(xué)生物傳感器3種檢測(cè)方法(見表1)，ELISA操作簡(jiǎn)單靈敏度高，但檢測(cè)時(shí)間過長(zhǎng)；側(cè)流免疫層析法在檢測(cè)時(shí)間上取得優(yōu)勢(shì)，卻難以實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)；電化學(xué)生物傳感器可達(dá)到線上定量檢測(cè)，卻存在操作復(fù)雜等缺點(diǎn)。基于目前的雌激素快速檢測(cè)方法，未來可從以下幾個(gè)方面進(jìn)行突破：① 發(fā)展既能實(shí)現(xiàn)多組分同時(shí)檢測(cè)，又能達(dá)到特異性強(qiáng)、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確可靠、不容易出現(xiàn)假陽性或假陰性結(jié)果的快速檢測(cè)方法；② 減少樣品前處理等復(fù)雜操作步驟，提高現(xiàn)場(chǎng)自動(dòng)化檢測(cè)能力；③ 利用量子點(diǎn)、核酸適配體、分子印記聚合物等新型生物識(shí)別分子和納米材料的結(jié)合開發(fā)研究新型分析技術(shù)，比如應(yīng)用在電化學(xué)生物傳感器的電極修飾上；④ 研制相關(guān)電子設(shè)備以實(shí)現(xiàn)線上直接分析結(jié)果，推動(dòng)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)智能化。