貴州產(chǎn)民族藥巖五加藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

張 華，鄧言歡，史 娟，陳 貴，李 姍

(1.黔南州檢驗(yàn)檢測院，貴州 都勻 558000；2.黔南州中醫(yī)醫(yī)院，貴州 都勻 558000)

巖五加為葡萄科植物崖爬藤Tetrastigmaobtectum(Wall.)Planch.的全草，收載于2013年版《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》。崖爬藤主要分布于貴州、云南、四川、湖北、湖南、江西、廣西、廣東等省區(qū)，具有祛風(fēng)除濕、活血通絡(luò)、解毒消腫的功效，主治風(fēng)濕痹痛、跌打損傷、流注痰核、癰瘡腫痛、毒蛇咬傷[1]。關(guān)于該植物化學(xué)成分的報(bào)道較少，文獻(xiàn)報(bào)道崖爬藤的95%乙醇提取物中分離得到11個(gè)化合物，分別為吲哚類生物堿及黃酮苷類成分，并且有7個(gè)新化合物[2]；與其同屬的三葉崖爬藤報(bào)道相對較多，其含有綠原酸、異葒草苷-2′-O-鼠李糖苷及異葒草苷等成分[3]。本研究通過對收集的巖五加樣品進(jìn)行分析，制定了巖五加藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為巖五加藥材的質(zhì)量評價(jià)提供研究基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

徠卡DM500顯微鏡(德國徠卡儀器有限公司)；101-1AB電熱鼓風(fēng)干燥箱(天津泰斯特儀器有限公司)；BSA224S電子天平(賽多利斯科學(xué)儀器有限公司)；SX-4-10型箱式電阻爐(天津泰斯特儀器有限公司)；IKA A11 basic研磨機(jī)(德國艾卡儀器設(shè)備有限公司)。

1.2 材料

水合氯醛、間苯三酚、濃鹽酸、稀甘油、蒸餾水、乙醇均為分析純。10批次巖五加藥材樣品均經(jīng)貴州省食品藥品檢驗(yàn)所中藥標(biāo)本館館長李揚(yáng)鑒定為葡萄科植物崖爬藤Tetrastigmaobtectum(Wall.)Planch.的全草，憑證標(biāo)本存放于黔南州檢驗(yàn)檢測院食品藥品檢驗(yàn)所中藥室。樣品來源見表1。

表1 供試樣品來源

2 方法與結(jié)果

2.1 性狀

通過對采集的10個(gè)藥材樣品去除雜質(zhì)后曬干，對藥材樣品的大小、形狀、顏色、質(zhì)地、斷面等特征進(jìn)行對比觀察和描述，并對具有代表性的藥材進(jìn)行拍照。發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的藥材除了在大小方面稍有差異，其他特征相對比較穩(wěn)定。該藥材的性狀鑒別特征歸納總結(jié)如下：本品為木質(zhì)或草質(zhì)藤本，莖呈圓柱形，灰棕色至棕褐色，質(zhì)脆，易折斷，斷面粗糙，可見明顯的形成層環(huán)紋，小枝稍有棱，無毛或被疏柔毛。葉為掌狀5小葉，小葉菱狀橢圓形或橢圓披針形，兩面均無毛，總?cè)~柄長1～11 cm，小葉柄極短或幾無柄，無毛或被疏柔毛。氣微，味辛。見圖1。

2.2 顯微鑒別

本品橫切面和粉末性狀的顯微鑒別所用樣本來至于貴州不同地區(qū)野外采集的10個(gè)藥材樣品。切片和制作標(biāo)本，研究其共性總結(jié)歸納得出該藥材粉末顯微鑒別特征：通過對10個(gè)藥材樣品的粉末進(jìn)行觀察和測量，其顯微鑒別特征總結(jié)如下：本品粉末黃綠色或棕黃色。淀粉粒極多，多為單粒淀粉，圓形、橢圓形或類圓形，臍點(diǎn)點(diǎn)狀、短縫狀或人字狀，復(fù)粒少見；黏液細(xì)胞類圓形或方形，有的含草酸鈣針晶束；針晶成束或散在；導(dǎo)管為具緣紋孔導(dǎo)管。見圖2。

圖2 巖五加粉末顯微特征

2.3 水分

按照《中華人民共和國藥典》2015年版四部通則0832水分測定法第二法進(jìn)行測定。樣品測定結(jié)果為9.2%～12.6%，平均值為11.2%，暫定水分含量不高于13.0%。

2.4 總灰分

按照《中華人民共和國藥典》2015年版四部通則2302總灰分測定法進(jìn)行測定。樣品測定結(jié)果為8.7%～14.3%，平均值為11.8%，暫定總灰分含量不得超過14.0%。

2.5 浸出物

分別用10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、100%乙醇作溶劑，熱浸法測定1批巖五加浸出物含量，結(jié)果10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇作溶劑的樣品溶液無法濾過，其余測定結(jié)果見表2。根據(jù)測定結(jié)果，用稀乙醇作溶劑，按《中國藥典》2015年版通則2201熱浸法，測定了10批樣品，測定結(jié)果見表3。根據(jù)測定結(jié)果，暫定浸出物標(biāo)準(zhǔn)不得少于15.0%。

樣品來源50%乙醇浸出物60%乙醇浸出物70%乙醇浸出物80%乙醇浸出物90%乙醇浸出物100%乙醇浸出物羅甸縣沫陽鎮(zhèn)18.418.116.115.514.07.4

表3 巖五加水分、總灰分、浸出物測定結(jié)果 (%)

3 討論

3.1 巖五加藥材的歷史沿革

據(jù)《四川中藥志》[4]記載，走游草為葡萄科崖爬藤屬植物崖爬藤的全草，文獻(xiàn)記載為“本植物喜溫暖，陰濕，通常生于山區(qū)纏繞于高大的樹木上，或附著于墻崖上”“草藥醫(yī)于四季采集入藥。辨別其特征：以本品形略似爬山虎而小；藤粗如火柴梗，節(jié)間較長，藤葉紫紅色，葉略肉質(zhì)，根少”。以上特征與《中國植物志》[5]及《貴州植物志》[6]中收載的崖爬藤一致?！顿F州草藥》[7]亦收載崖爬藤作為藥材，文獻(xiàn)記載其“別名：走游草(各地均稱)，毛五加(清鎮(zhèn))，小走游草、巖五加(貴陽)”“藥用部分：全草。四季均可采集?！庇纱丝梢姡端拇ㄖ兴幹尽肥蛰d的走游草、《貴州草藥》收載的崖爬藤及《昆明民間常用草藥》[8]中收載的鈍葉小五爪龍均為該植物的全草，另外《重慶草藥》[9]《中華本草》[1]和《貴州中草藥名錄》[10]中收載的走游草均為該植物的全草或根。經(jīng)過上述考證，巖五加作為葡萄科植物崖爬藤的干燥全草，有足夠的本草支撐，可以作為藥用。

3.2 性狀與顯微鑒別

巖五加與常用藥材三葉青(葡萄科植物三葉崖爬藤 Tetrastigma hemsleyanum Diels&Gilg的干燥全草)性狀的主要區(qū)別在于：巖五加葉為掌狀5小葉，小葉菱狀橢圓形或橢圓披針形，兩面均無毛，小葉柄極短或幾無柄，無毛或被疏柔毛；三葉青葉互生，展開后呈三出掌狀復(fù)葉，無毛，葉緣具刺狀疏齒。二者在顯微鑒別上的差別主要體現(xiàn)在：巖五加的部分嫩枝有非腺毛，而三葉青沒有非腺毛。另外，在樣品采集的過程中，發(fā)現(xiàn)崖爬藤有兩個(gè)相近品種，無毛崖爬藤和毛葉崖爬藤，二者與崖爬藤最大的區(qū)別在于：無毛崖爬藤全株無毛；毛葉崖爬藤小枝、葉柄、葉片和花梗下面被疏柔毛。

3.3 薄層鑒別

根據(jù)文獻(xiàn)調(diào)研三葉崖爬藤等相近品種所含成分，課題組曾以綠原酸(110753-201415中國食品藥品檢定研究院)作為對照品對其進(jìn)行薄層鑒別。在篩選好的試驗(yàn)條件下，供試品色譜中在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)，分離度好，斑點(diǎn)顯色清晰，但因?yàn)榫G原酸專屬性不強(qiáng)，未列入標(biāo)準(zhǔn)正文。

4 結(jié)論

本文建立的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)具有較好的專屬性，能明顯地區(qū)別于同屬的其他常見的相近植物，可應(yīng)用于巖五加藥材的質(zhì)量控制。