我院2012—2017年女性泌尿生殖道分離支原體的藥敏分析

高亮

(錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，遼寧 錦州 121000)

支原體是一種類似細(xì)菌但不具有細(xì)胞壁的原核型微生物，侵入人體后在生殖道上皮細(xì)胞粘附，可引起泌尿生殖道感染。女性感染支原體可導(dǎo)致子宮內(nèi)膜炎、尿道炎、陰道炎，甚至導(dǎo)致流產(chǎn)、新生兒腦膜炎、肺炎和血流感染等[1]。近年來，支原體引起的非淋菌性尿道炎和生殖道炎癥逐年增加，而且由于抗生素濫用或不規(guī)范使用，導(dǎo)致支原體耐藥現(xiàn)象日趨增加[2]。本研究通過對(duì)2012—2017年從女性患者采集的標(biāo)本中分離出的4511株支原體及藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，了解女性支原體感染的檢出率以及對(duì)抗生素的耐藥情況，為臨床規(guī)范藥物治療提供依據(jù)。

1 資料和方法

1.1 標(biāo)本來源

2012—2017年錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物組收集5329份支原體陽性標(biāo)本，其中來自女性患者的有4511份。標(biāo)本類型為宮頸分泌物。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑 支原體培養(yǎng)、鑒定和藥敏的試劑盒為珠海麗珠試劑股份有限公司解脲脲原體和人型支原體培養(yǎng)鑒定藥敏試劑盒。質(zhì)控菌株為Uu ATCC 27813。

1.2.2 標(biāo)本采集 女性患者采集前常規(guī)消毒外陰，用陰道窺器擴(kuò)張后，先用無菌棉球清除宮頸口分泌物，另取棉拭子插入患者宮頸1～2 cm處，旋轉(zhuǎn)3～5圈，放入配套的容器內(nèi)，立即送檢。

培養(yǎng)鑒定及藥敏試驗(yàn) 取出冷凍干燥培養(yǎng)基，滴加稀釋液到培養(yǎng)瓶中，充分搖勻，培養(yǎng)基完全溶解后液面至標(biāo)簽標(biāo)線處。將50 μL培養(yǎng)基加入空白孔中作為陰性對(duì)照。接種分泌物標(biāo)本，將無菌拭子采集的標(biāo)本插入培養(yǎng)基中，擠壓旋轉(zhuǎn)拭子次數(shù)，使拭子中的標(biāo)本滲入，棄掉拭子。然后往試劑條的每一孔中滴加一滴石蠟油，并蓋上蓋子。將剩余培養(yǎng)基連同試劑條一起置于35～37 ℃隔水恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，分別于24 h、48 h觀察結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行描述性統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。進(jìn)行卡方檢驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 支原體檢出率

本院自2012—2017年共檢出5329份支原體陽性標(biāo)本，其中女性標(biāo)本為4511份，其中3543份標(biāo)本分離出解脲脲原體，157份標(biāo)本分離出人型支原體，811份標(biāo)本為兩種支原體混合感染，經(jīng)χ2檢驗(yàn)P<0.05，女性的陽性率>男性的陽性率，見表1。分離出支原體的陽性標(biāo)本來自不同年齡的女性患者，女性患者的年齡分布，見表2。

表1 2012—2017年支原體檢出情況(%)

表2 不同年齡女性患者支原體感染情況

2.2 藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果

本研究采用的試劑盒有12種抗生素，分別是強(qiáng)力霉素、美滿霉素、紅霉素、交沙霉素、克拉霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、司帕沙星和加替沙星。藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果顯示解脲脲原體對(duì)強(qiáng)力霉素、美滿霉素和交沙霉素敏感性較高，分別是98.1%、96.4%和90.6%。對(duì)環(huán)丙沙星和司帕沙星的耐藥性較高，分別是81.7%和38.7%，P<0.05，見表3。人型支原體較敏感的抗菌藥物是強(qiáng)力霉素(89.1%)、美滿霉素(85.4%)和交沙霉素(80.4%)，耐藥性較高的是紅霉素(96.5%)和加替沙星(85.8%)，P<0.05，見表4。解脲脲原體對(duì)12種抗生素的耐藥率見表3?；旌细腥?同時(shí)分離出解脲脲原體和人型支原體)的標(biāo)本對(duì)強(qiáng)力霉素、美滿霉素的敏感性較高，分別是90.1%、87.2%。對(duì)羅紅霉素和氧氟沙星的耐藥性較高，分別是49.6%和47.8%，P<0.05，見表5。

表3 解脲脲原體陽性標(biāo)本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

表4 人型支原體感染標(biāo)本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

表5 解脲脲原體和人型支原體混合感染標(biāo)本的藥敏試驗(yàn)結(jié)果(%)

3 討 論

解脲脲原體是人類泌尿生殖道最常見的寄生菌之一，為條件致病菌，致病機(jī)制可能與侵襲性酶和毒性產(chǎn)物有關(guān)[3]。由于女性生理結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)，較男性更容易發(fā)生解脲脲原體感染。我院2012—2017年接受的4511份女性宮頸分泌物標(biāo)本中，分離出解脲脲原體標(biāo)本為3543份，證實(shí)了女性解脲脲原體感染中相當(dāng)高的感染率。這與之前的研究結(jié)果相近[4]。人型支原體主要寄居在生殖道，可通過性接觸傳播，引起附睪炎、宮頸炎、盆腔炎和產(chǎn)褥熱[5]。本研究結(jié)果顯示人型支原體與解脲脲原體混合感染的女性患者標(biāo)本為811份，占女性患者陽性標(biāo)本的17.98%。本研究表明，在不同年齡段，女性患者支原體陽性率明顯不同，其中20～40歲陽性率最高，為34.76%，這可能與此階段女性性行為活躍有關(guān)。

支原體是能在細(xì)胞外生存的最小的原核型微生物，沒有細(xì)胞壁，只有細(xì)胞膜，因此支原體對(duì)作用于細(xì)胞壁的抗生素如β-內(nèi)酰胺類和頭孢菌素類藥物普遍耐藥，但是對(duì)于抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)合成和肽鏈延伸的大環(huán)內(nèi)酯類藥物如紅霉素，阿奇霉素等較敏感[6]。本研究藥敏結(jié)果顯示解脲脲原體敏感性較高的抗生素分別是環(huán)丙沙星、四環(huán)素、交沙霉素，耐藥率較高的是紅霉素和司帕沙星，這個(gè)研究結(jié)果與近年來其他研究報(bào)道比較接近[7]。解脲脲原體和人型支原體混合感染的標(biāo)本藥敏試驗(yàn)的結(jié)果與解脲脲原體單一感染的結(jié)果有很大差異，敏感性較高的抗生素分別是環(huán)丙沙星、四環(huán)素、交沙霉素，耐藥率較高的是紅霉素和司帕沙星，這個(gè)研究結(jié)果提示臨床醫(yī)師應(yīng)根據(jù)每個(gè)標(biāo)本具體的藥敏試驗(yàn)結(jié)果來制定用藥方案。

解脲脲原體對(duì)干燥和熱敏感，因此采集標(biāo)本后應(yīng)立即送檢并及時(shí)接種到培養(yǎng)基中，以免造成假陰性[8]。有研究表明，女性下生殖道中存在解脲脲原體正常寄生的情況，解脲脲原體在女性下生殖道中是一種條件致病菌[9]。解脲脲原體培養(yǎng)陽性結(jié)果是否具有臨床意義，需要結(jié)合臨床癥狀和半定量計(jì)數(shù)結(jié)果解釋。解脲脲原體半定量計(jì)數(shù)結(jié)果大于104CCU的情況，處于感染狀態(tài)的危險(xiǎn)性高。臨床采集的大部分標(biāo)本都屬于不均一的分泌物，或者標(biāo)本中支原體濃度較低，可能導(dǎo)致試劑條微孔接種量不均一，藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果不合理。這樣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒有意義，應(yīng)重新做藥物敏感性試驗(yàn)或棄用此藥物。

總之，女性是解脲脲原體的易感人群，遇到疑似泌尿生殖道非淋球菌感染的患者，特別是年輕女性患者應(yīng)采集宮頸拭子進(jìn)行支原體培養(yǎng)，鑒定及藥物敏感性試驗(yàn)。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥物，避免濫用抗生素，以免加速耐藥率的上升。