乙型肝炎肝硬化患者血清Chemerin、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白表達(dá)及其預(yù)后分析

杜尚春，秦建平

(1.成都市新都區(qū)第三人民醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 成都 610504；2.西部戰(zhàn)區(qū)總醫(yī)院消化內(nèi)科，四川 成都 610000)

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是全球常見(jiàn)的肝臟疾病，我國(guó)是HBV感染高發(fā)區(qū)，HBV攜帶者約占總?cè)丝诘?0%，若不及時(shí)治療可發(fā)展為乙型肝炎、肝硬化、肝癌[1，2]。乙型肝炎肝硬化(Hepatitis B-liver cirrhosis，HB-LC)是由乙型肝炎反復(fù)發(fā)作而引起的彌漫性肝損害，晚期以肝功能損害和門(mén)靜脈高壓為主要臨床癥狀，一旦發(fā)生肝硬化，疾病呈不可逆發(fā)展，發(fā)展為失代償期HB-LC的患者死亡率明顯升高，預(yù)后極不理想[3，4]。因此，尋找一種科學(xué)、實(shí)用、準(zhǔn)確的評(píng)價(jià)方法，對(duì)做出HB-LC患者的預(yù)后判斷尤為重要，準(zhǔn)確的預(yù)后預(yù)測(cè)有助于制定個(gè)性化治療方案，延長(zhǎng)患者生存期。本研究探討HB-LC患者血清Chemerin、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)載脂蛋白(NGAL)的表達(dá)水平，其對(duì)患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料2015年1月至2016年10月兩家醫(yī)院收治的185例HB-LC患者(HB-LC組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合《慢性乙型肝炎防治指南》(2010年版)[5]診斷標(biāo)準(zhǔn)；②經(jīng)血液學(xué)、生化、影像學(xué)等檢查確診為乙型肝炎肝硬化；③長(zhǎng)期在我院隨訪；④相關(guān)資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①非乙型肝炎引起的肝硬化；②合并原發(fā)性腎臟疾??；③惡性腫瘤；④原發(fā)性高血壓、心肺疾?。虎荽x綜合癥；⑥合并血液系統(tǒng)疾?。虎叻歉尾≡蛩劳?；⑧失訪或資料缺失者。男107例，女78例；年齡29～72歲[(49.05±8.21)歲]；肝功能Child-Pugh分級(jí)A級(jí)55例、B級(jí)69例、C級(jí)61例；病程4～19年[(11.79±3.46)年]；未婚22例，離婚或喪偶43例，已婚120例。選擇同期健康體檢者50例為對(duì)照組，各項(xiàng)檢查均正常，既往無(wú)肝臟疾病，其中男28例，女22例；年齡30～71歲[(49.77±7.98)歲]。

1.2 標(biāo)本采集及檢測(cè)采集入選患者清晨空腹靜脈血3 ml，室溫靜置1～2 h，4000 r/min離心15 min，分離上層血清，分裝后存于-80 ℃冰箱待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清Chemerin、NGAL水平，使用日本東芝TBA-2000FR全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)，試劑盒購(gòu)于上海蔚霆生物試劑有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)要求操作。

1.3 資料收集與分組制訂統(tǒng)一的病例資料表格，記錄受試者年齡、性別、既往病史、生化指標(biāo)、血清Chemerin、NGAL等。所有HB-LC患者隨訪3年，死亡29例(15.68%)，根據(jù)預(yù)后情況，分為死亡組(n=29)和存活組(n=156)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用COX回歸模型進(jìn)行影響HB-LC患者預(yù)后的多因素分析，應(yīng)用受試者工作特征(ROC)曲線和曲線下面積(AUC)分析血清Chemerin、NGAL對(duì)HB-LC患者預(yù)后的預(yù)測(cè)價(jià)值。P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HB-LC組與對(duì)照組臨床資料比較HB-LC組血小板計(jì)數(shù)、血紅蛋白水平低于對(duì)照組，HB-LC組AST、ALT、INR、總膽紅素、血肌酐、血腎素、血清Chemerin、血清NGAL水平均高于對(duì)照組(P< 0.05)；兩組年齡、性別比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P> 0.05)。見(jiàn)表1。

表1 HB-LC組與對(duì)照組臨床資料比較

2.2 死亡組與存活組各指標(biāo)比較死亡組血肌酐、血腎素、血清Chemerin、血清NGAL水平均高于存活組(P< 0.05)。見(jiàn)表2。

表2 死亡組與存活組各指標(biāo)比較

2.3 影響HB-LC患者預(yù)后因素的Cox回歸模型分析以HB-LC患者預(yù)后為因變量，年齡、血肌酐、血腎素、血清Chemerin、血清NGAL為自變量，進(jìn)行Cox模型分析，結(jié)果顯示，血肌酐、血清Chemerin、血清NGAL是影響HB-LC患者預(yù)后的獨(dú)立因素(P< 0.05)。見(jiàn)表3。

表3 影響HB-LC患者預(yù)后因素的Cox回歸模型分析

2.4 血清Chemerin、NGAL預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的ROC曲線分析血清Chemerin預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC為0.850，截?cái)嘀禐?01.64 ng/ml，約登指數(shù)為0.630，敏感性為75.86%，特異性為87.18%。血清NGAL預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC為0.892，截?cái)嘀禐?78.47 U/L，約登指數(shù)為0.671，敏感性為79.31%，特異性為87.82%。血清Chemerin、NGAL聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC、敏感性、特異性均大于單獨(dú)檢測(cè)。見(jiàn)表4、圖1。

表4 血清Chemerin、NGAL預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的ROC曲線分析

圖1 血清Chemerin、NGAL預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的ROC曲線

3 討論

肝炎肝硬化是全球性健康問(wèn)題，主要由慢性HBV及丙型、丁型肝炎病毒感染引起的，患者由于長(zhǎng)期處于持續(xù)病毒感染狀態(tài)，肝臟在反復(fù)炎癥、損傷刺激下，發(fā)生變性壞死，進(jìn)而肝臟內(nèi)纖維結(jié)締組織異常增生和肝細(xì)胞再生，形成肝纖維化，肝臟逐漸變硬、變形，最終導(dǎo)致肝硬化[6，7]。HB-LC患者早期因肝臟代償功能仍基本完整而多無(wú)明顯臨床癥狀，后期則表現(xiàn)為肝功能損害和門(mén)靜脈高壓，晚期則可能出現(xiàn)繼發(fā)感染、上消化道出血、腹水、肝性腦病、癌變等，威脅患者的生命安全[8]。HB-LC病情難以控制，根據(jù)患者臨床表現(xiàn)和肝組織病理，分為代償性HB-LC和失代償性HB-LC，前者主要表現(xiàn)為門(mén)靜脈高壓，后者多指中晚期肝硬化，患者表現(xiàn)為明顯的肝功能異常和失代償征象，存在多種嚴(yán)重并發(fā)癥，導(dǎo)致預(yù)后不理想[9]。因此，了解影響HB-LC的預(yù)后因素，尋找可靠的評(píng)價(jià)方法，并采取有效的干預(yù)措施，具有積極的臨床意義。

脂肪因子主要由脂肪組織產(chǎn)生，在脂肪浸潤(rùn)、炎癥、肝纖維化的發(fā)展進(jìn)程中扮演重要角色，亦可影響脂肪、葡萄糖代謝和胰島素敏感性，促進(jìn)代謝異常的發(fā)生，并調(diào)節(jié)纖維形成和血管生成[10]。因此，脂肪因子在肝臟疾病的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮重要作用。最近的研究表明，肥胖與慢性、低度炎癥狀態(tài)有關(guān)，這種狀態(tài)可能會(huì)導(dǎo)致脂肪因子失調(diào)，而肝硬化在肥胖人群中發(fā)病率更高，肥胖是酒精性肝病、非酒精性脂肪性肝炎及肝細(xì)胞癌中肝纖維化的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[11]。Chemerin又稱(chēng)為維甲酸受體反應(yīng)元件2，由163個(gè)氨基酸殘基組成，主要表達(dá)與脂肪組織、肝臟、腎臟、肺臟等，肝細(xì)胞分泌相對(duì)高濃度的Chemerin與脂肪細(xì)胞產(chǎn)生的水平相似[12]。Chemerin可與其受體結(jié)合而發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)，在血壓調(diào)控、炎癥介導(dǎo)、免疫應(yīng)答、代謝綜合征等方面都起一定作用，但國(guó)內(nèi)有關(guān)Chemerin與HB-LC的報(bào)道較少[13]。本研究結(jié)果顯示，HB-LC組血清Chemerin水平高于對(duì)照組，死亡組血清Chemerin水平高于存活組，血清Chemerin是影響HB-LC患者預(yù)后的獨(dú)立因素，血清Chemerin預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC為0.850；提示血清Chemerin可能是HB-LC患者預(yù)后的獨(dú)立預(yù)測(cè)因子，雖然存在一定局限性，但可與其他指標(biāo)一起更好地評(píng)價(jià)HB-LC患者的預(yù)后情況。

NGAL是脂質(zhì)運(yùn)載蛋白lipocalin超家族成員之一，一般情況下，其在腎組織中的表達(dá)甚微，但當(dāng)腎小管上皮細(xì)胞受到缺血、缺氧等刺激時(shí)，NGAL表達(dá)水平明顯升高，通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、清除氧自由基、促進(jìn)腎小管細(xì)胞再生、誘導(dǎo)炎性浸潤(rùn)細(xì)胞凋亡等機(jī)制發(fā)揮腎臟保護(hù)作用[14]。NGAL是眾多腎損傷指標(biāo)中出現(xiàn)最早的，能較準(zhǔn)確地反映腎臟疾病的損傷和恢復(fù)過(guò)程。大量研究表明，肝硬化繼發(fā)急性腎損傷的主要原因?yàn)槟I前性和急性腎小管壞死，損傷的近端腎小管上皮細(xì)胞NGAL表達(dá)水平顯著增加，NGAL被作為肝硬化繼發(fā)急性腎損傷的早期診斷指標(biāo)。本研究中，HB-LC組血清NGAL水平高于對(duì)照組，死亡組血清NGAL水平高于存活組，血清NGAL是影響HB-LC患者預(yù)后的獨(dú)立因素，血清NGAL預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC為0.892；HB-LC患者血清NGAL表達(dá)水平與其預(yù)后有關(guān)，可能原因?yàn)橹型砥贖B-LC患者容易出現(xiàn)繼發(fā)感染、上消化道出血、腹水、肝性腦病等并發(fā)癥，這些并發(fā)癥可能會(huì)導(dǎo)致血清NGAL水平升高，同時(shí)這些并發(fā)癥也是中晚期HB-LC患者預(yù)后極差的重要因素。本研究還發(fā)現(xiàn)，血清Chemerin、NGAL聯(lián)合檢測(cè)預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的AUC、敏感性、特異性均大于單獨(dú)檢測(cè)；提示聯(lián)合檢測(cè)可提高預(yù)測(cè)HB-LC患者預(yù)后的效能。

綜上所述，HB-LC患者血清Chemerin、NGAL水平明顯升高，可作為HB-LC患者預(yù)后的預(yù)測(cè)指標(biāo)，聯(lián)合檢測(cè)應(yīng)用價(jià)值更佳。