• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    固相萃取-高效液相色譜法測(cè)定紅糖中有機(jī)酸

    2020-06-02 05:35:36陳其釗陳嘉敏陳紅香王桂華李家威余構(gòu)彬
    食品研究與開(kāi)發(fā) 2020年11期
    關(guān)鍵詞:烏頭琥珀酸去離子水

    陳其釗,陳嘉敏,陳紅香,*,王桂華,李家威,余構(gòu)彬

    (1.廣東省生物工程研究所(廣州甘蔗糖業(yè)研究所)廣東省甘蔗改良與生物煉制重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州510316;2.國(guó)家糖業(yè)質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心,廣東廣州510316)

    傳統(tǒng)紅糖,又名古法紅糖、原生態(tài)紅糖,是甘蔗榨汁后經(jīng)石灰法清凈處理,直接煮制而成,整個(gè)過(guò)程中不加入任何化學(xué)試劑及食品添加劑,幾乎完全保留甘蔗原有的風(fēng)味和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。紅糖在我國(guó)歷史悠久,一直享有健脾養(yǎng)胃、溫中補(bǔ)氣、緩解精通的溫補(bǔ)美譽(yù),常用作滋補(bǔ)食材。國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究亦表明,紅糖中的非糖成分具有防齲齒、抗毒素、抗癌以及抗氧化等作用[1-7]。紅糖中含有大量的甘蔗原生態(tài)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[8],包括礦物質(zhì)、氨基酸、有機(jī)酸、酚類(lèi)物質(zhì)以及維生素等。其中,有機(jī)酸的存在不僅構(gòu)成紅糖的風(fēng)味成分,而且可以使紅糖保持較低的pH值,抑制微生物的生長(zhǎng)繁殖。國(guó)內(nèi)外有關(guān)于研究紅糖有機(jī)酸的文獻(xiàn)都很少,多集中于測(cè)定紅糖及紅糖原料甘蔗中的有機(jī)酸種類(lèi)和含量,目前人們已經(jīng)從紅糖中檢測(cè)出含有多種有機(jī)酸,包括草酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸、烏頭酸、沒(méi)食子酸、乳酸以及富馬酸等[9-11],國(guó)內(nèi)對(duì)于有機(jī)酸的研究多以甘蔗發(fā)酵液[11]、果汁[12]、乳制品[13]、蜂蜜[14]、茶葉[15]和米酒[16]等為研究對(duì)象。對(duì)于復(fù)雜基體樣品多采用固相萃取法對(duì)有機(jī)酸進(jìn)行富集處理且效果良好,常用的分析方法主要為離子色譜法[17-19]、氣相色譜法[20-21]以及高效液相色譜法[22-23]等。有機(jī)酸的種類(lèi)和含量是影響紅糖質(zhì)量好壞的一個(gè)重要因素,建立一種可同時(shí)測(cè)定紅糖中多種有機(jī)酸的方法,可用于快速準(zhǔn)確檢測(cè)紅糖中的有機(jī)酸種類(lèi)和含量,為紅糖的質(zhì)量評(píng)價(jià)、紅糖的開(kāi)發(fā)利用提供相關(guān)依據(jù)。本文建立固相萃取-反相高效液相色譜測(cè)定紅糖有機(jī)酸的方法,該方法操作簡(jiǎn)單,可同時(shí)測(cè)定紅糖中的7種有機(jī)酸,并為紅糖的質(zhì)量控制提供相關(guān)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 主要儀器與試劑

    Agilent 1260 infinity Ⅱ高效液相色譜儀(配二極管陣列檢測(cè)器):安捷倫科技(中國(guó))有限公司;優(yōu)普UPC-I-60L去離子水系統(tǒng):四川優(yōu)普超純科技有限公司;CNWBOND SAX強(qiáng)陰離子交換固相萃?。╯olid phase extraction,SPE)小柱(200 mg/6 mL):上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;CL5R醫(yī)用離心機(jī):湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司;S22H型超聲提取儀:致微(廈門(mén))儀器有限公司;FE20型pH計(jì):梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易(上海)有限公司。

    酒石酸(≥99.0%)、丙酮酸(≥95.0%)、乙酸(≥99.7%)、檸檬酸(≥99.5%)、琥珀酸(≥99.0%)、沒(méi)食子酸(≥98.0%)、烏頭酸(≥98.0%):上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司;磷酸(分析純)、磷酸二氫鈉(分析純):廣州化學(xué)試劑廠;甲醇(色譜純)、乙腈(色譜純):西格瑪奧德里奇(上海)貿(mào)易有限公司;試驗(yàn)用水均由超純水系統(tǒng)制備。

    1.2 色譜條件

    色譜柱:XBridge C8柱(4.6×250 nm,5 μm);流動(dòng)相:0.1%H3PO4與乙腈,比例 99 ∶1;流速:0.7 mL/min;柱溫:35℃;進(jìn)樣 20 μL;檢測(cè)波長(zhǎng):210 nm。

    1.3 方法

    1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

    標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液:分別稱(chēng)取10 mg酒石酸、丙酮酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸、沒(méi)食子酸、烏頭酸7種有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL容量瓶中,用去離子水溶解并定容,于4℃下避光儲(chǔ)存?zhèn)溆谩?/p>

    混合標(biāo)準(zhǔn)溶液:分別取適量部分上述標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用去離子水配制成混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,其質(zhì)量濃度分別為:酒石酸20 mg/L、丙酮酸6 mg/L、乙酸70 mg/L、檸檬酸50 mg/L、琥珀酸60 mg/L、沒(méi)食子酸0.7 mg/L、烏頭酸3 mg/L。

    1.3.2 樣品前處理方法

    準(zhǔn)確稱(chēng)取紅糖樣品10g,加入去離子水?dāng)嚢枞芙?,并定容?5 mL,搖勻,轉(zhuǎn)移至50 mL離心管,4 000 r/min轉(zhuǎn)速下離心5 min。

    CNWBOND SAX SPE小柱依次用3 mL甲醇,3 mL去離子水活化平衡,備用。取離心后的上清液10 mL全部過(guò)柱,控制流速在1 mL/min左右,用2 mL去離子水淋洗棄掉全部上樣流出液以及淋洗流出液;用2 mL 1%H3PO4洗脫,收集所有洗脫液于25 mL離心管,混勻后過(guò)0.22 μm水相濾膜,濾液收集于進(jìn)樣小瓶備用于高效液相色譜分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 SPE條件的優(yōu)化

    2.1.1 SPE柱的選擇

    本文分別考察Waters Oasis WAX、Cleanert PAXSPE、poly-sery MAX SPE以及CNWBOND SAX SPE這4種陰離子交換柱對(duì)紅糖的凈化富集效果,結(jié)果見(jiàn)圖1。

    結(jié)果如圖1所示,弱陰離子交換柱Waters Oasis WAX與Cleanert PAX-SPE柱的凈化效果較好,能較好減少雜質(zhì)峰的干擾,而混合型弱陰離子poly-sery MAX SPE柱的凈化效果較差;3種陰離子交換柱對(duì)有機(jī)酸的吸附作用不強(qiáng),乙酸、琥珀酸、沒(méi)食子酸以及檸檬酸的回收率無(wú)法達(dá)到試驗(yàn)要求,且均不能保留丙酮酸和烏頭酸。強(qiáng)陰離子交換柱CNWBOND SAX SPE對(duì)紅糖的凈化效果以及對(duì)有機(jī)酸的保留能力都優(yōu)于弱陰離子交換柱,能同時(shí)保留7種有機(jī)酸且回收率滿足試驗(yàn)要求,因此本試驗(yàn)擇優(yōu)選擇SAX固相萃取小柱對(duì)樣品進(jìn)行凈化富集處理。

    圖1 4種SPE柱選擇色譜圖Fig.1 Chromatogram of SPE column selection

    2.1.2 洗脫劑的選擇

    理論上用一定pH值的酸性溶液即可將保留在陰離子柱上的有機(jī)酸洗脫下來(lái),本試驗(yàn)考察6%鹽酸溶液與0.1%磷酸溶液對(duì)7種有機(jī)酸的洗脫效果,結(jié)果見(jiàn)圖2。

    圖2 洗脫溶劑選擇色譜圖Fig.2 Elution solvent selection chromatogram

    結(jié)果如圖2所示,用6%鹽酸溶液進(jìn)行洗脫時(shí),由于洗脫液強(qiáng)度大,有機(jī)酸洗脫的同時(shí),在酒石酸的位置上會(huì)出現(xiàn)一些干擾,同時(shí)乙酸的回收率也不太好。用0.1%磷酸溶液進(jìn)行洗脫時(shí),則需要增大洗脫體積;綜合兩種洗脫劑的洗脫情況考慮,嘗試提高磷酸濃度至1%,試驗(yàn)表明以1%磷酸作為洗脫劑時(shí),7種有機(jī)酸的回收率良好。同時(shí)從圖中可以看到對(duì)于酒石酸無(wú)論選用何種凈化柱,洗脫溶液始終存在干擾,因此無(wú)法做準(zhǔn)確定量。

    2.2 色譜條件的優(yōu)化

    2.2.1 流動(dòng)相的選擇

    為了使有機(jī)酸能以分子的形式穩(wěn)定存在,一般使用pH值較低的流動(dòng)相。本試驗(yàn)考察3種流動(dòng)相對(duì)有機(jī)酸的分離,分別為0.1%磷酸、0.1 mol/L磷酸二氫鈉以及0.01 mol/L磷酸氫二銨溶液。試驗(yàn)結(jié)果表明:以0.1 mol/L磷酸二氫銨溶液作流動(dòng)相時(shí),多種有機(jī)酸擠在一起出峰,無(wú)法分離;比較0.1%磷酸與0.1 mol/L磷酸二氫鈉發(fā)現(xiàn),以0.1%磷酸作為流動(dòng)相時(shí),7種有機(jī)酸的分離度較好,綜合有機(jī)酸分離情況考慮,以0.1%磷酸作為流動(dòng)相為宜。

    2.2.2 色譜柱的選擇

    本文選擇考察3種不同品牌色譜柱,分別為E-clipse Plus C18柱、Venusil XBP C18柱以及 XBridge C8柱。結(jié)果表明:Eclipse Plus C18柱和XBridge C8柱分離有機(jī)酸的情況良好,Venusil XBP C18柱不能有效分離各有機(jī)酸,多種有機(jī)酸峰擠在一起。綜合有機(jī)酸分離情況以及色譜柱成本考慮,放棄使用Venusil XBP C18柱,進(jìn)一步考察Eclipse Plus C18柱和XBridge C8柱分離7種有機(jī)酸的情況。Eclipse Plus C18柱無(wú)法將烏頭酸與琥珀酸分離,且酒石酸出峰時(shí)間與溶劑峰出峰時(shí)間相差較小,容易發(fā)生峰形基線重疊。XBridge C8柱能有效分離7種有機(jī)酸,各有機(jī)酸峰形良好且分離度滿足試驗(yàn)要求,綜合考慮,本試驗(yàn)選擇XBridge C8柱作為試驗(yàn)用色譜柱。

    2.2.3 流速與柱溫的優(yōu)化

    根據(jù)以上流動(dòng)相以及色譜柱考察,基本確定流動(dòng)相為0.1%磷酸∶乙腈=99∶1,色譜柱為XBridge C8柱,在此條件下,本試驗(yàn)考察1、0.5、0.7 mL/min的流速對(duì)有機(jī)酸分離效果的影響,結(jié)果如圖3所示。

    圖3 不同流速下7種有機(jī)酸分離的色譜圖Fig.3 Separation chromatogram of seven organic acids at different flow rates

    比較試驗(yàn)結(jié)果,發(fā)現(xiàn)流速為1mL/min時(shí),各有機(jī)酸組分保留時(shí)間縮短,峰形良好,分析時(shí)間在12 min以內(nèi),但流速過(guò)高,泵的壓力也明顯升高,導(dǎo)致基線不穩(wěn)且容易降低柱子的使用壽命;而流速為0.5 mL/min時(shí),琥珀酸與沒(méi)食子酸基線分離不完全,峰部分重疊;流速為0.7 mL/min時(shí),7種有機(jī)酸能有效的分離且峰形均良好,20min內(nèi)能完成分析。綜合考慮有機(jī)酸分離度、分析時(shí)間以及基線穩(wěn)定情況,確定0.7 mL/min的流速為宜。

    在上述已確定的色譜條件下,考察30、35、40、45℃的柱溫,結(jié)果表明柱溫對(duì)各有機(jī)酸的保留時(shí)間以及分離度有明顯的影響:溫度高,出峰時(shí)間前移,有機(jī)酸分離度降低;溫度低,出峰時(shí)間后移,分析時(shí)間過(guò)長(zhǎng),且柱溫過(guò)高或過(guò)低都不能實(shí)現(xiàn)對(duì)琥珀酸和沒(méi)食子酸的分離;柱溫為35℃時(shí),7種有機(jī)酸全部出峰,且琥珀酸與沒(méi)食子酸分離情況良好,20 min內(nèi)可完成色譜分析,符合試驗(yàn)要求,故確定柱溫為35℃。圖4為7種有機(jī)酸標(biāo)準(zhǔn)品在上述已確定條件下的色譜圖。

    圖4 7種有機(jī)酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的高效液相色譜圖Fig.1 High performance liquid chromatography chromatogram of the mixed standard solution on of 7 organic acids

    2.3 線性關(guān)系、檢出限及線性范圍

    精確移取一定體積的7種有機(jī)酸儲(chǔ)備液至10 mL容量瓶,加去離子水定容,配制成較高濃度的有機(jī)酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。將其分別稀釋1.5倍、2.5倍、5倍、10倍,配成一系列濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液,采用1.2節(jié)所述色譜條件進(jìn)樣20 μL分析,以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo),相應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,以S/N=3和S/N=10分別確定各有機(jī)酸在樣品中的檢出限和定量限,結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 7種有機(jī)酸的線性范圍、回歸方程、相關(guān)系數(shù)與檢出限(S/N=3)Table 1 Linear ranges,regressions,correlation coefficients and detection limits of 7 organic acids(S/N=3)

    2.4 精密度和回收率

    按1.2節(jié)所述色譜條件進(jìn)行三水平加標(biāo)試驗(yàn),每一加標(biāo)水平平行測(cè)定3次,計(jì)算各有機(jī)酸回收率,結(jié)果如表2所示。

    表2 7種有機(jī)酸的回收率及精密度(n=3)Table 2 Recoveries and precision of 7 organic acids(n=3)

    續(xù)表2 7種有機(jī)酸的回收率及精密度(n=3)Continue table 2 Recoveries and precision of 7 organic acids(n=3)

    7種有機(jī)酸的加標(biāo)回收率為82.1%~108.6%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%~3.0%。表明該方法各有機(jī)酸的回收率較為穩(wěn)定,精密度良好,可以滿足樣品中種有機(jī)酸的同時(shí)測(cè)定。

    2.5 樣品分析

    2.5.1 紅糖樣品分析

    按照1.2的色譜條件,對(duì)由企業(yè)提供的10個(gè)紅糖樣品進(jìn)行了有機(jī)酸含量的檢測(cè),每個(gè)樣品重復(fù)3次。結(jié)果見(jiàn)表3。

    表3 10個(gè)紅糖樣品中7種有機(jī)酸的含量測(cè)定結(jié)果(n=3)Table 3 Determination results of 7 organic acids in 10 brown sugar samples mg/kg

    由表3可知,紅糖樣品中檢出的有機(jī)酸包括丙酮酸、乙酸、檸檬酸、琥珀酸、沒(méi)食子酸和烏頭酸,但不同樣品之間在有機(jī)酸組成及含量上存在明顯差別。其中乙酸、沒(méi)食子酸,烏頭酸所有樣品均有檢出,尤其是烏頭酸含量最高可達(dá)7 778.4 mg/kg。說(shuō)明紅糖中有機(jī)酸主要以烏頭酸的形式存在。丙酮酸,檸檬酸,琥珀酸的含量則差異很大;酒石酸未檢出。這些可能與甘蔗產(chǎn)地以及各個(gè)廠家的工藝有關(guān)。

    3 結(jié)論

    本文通過(guò)優(yōu)化富集紅糖有機(jī)酸的SPE條件以及7種有機(jī)酸分離的色譜條件,所建立的固相萃取-高效液相色譜法簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確,可快速準(zhǔn)確測(cè)定紅糖中的7種有機(jī)酸含量,該色譜法還可為建立其他食品中有機(jī)酸含量的檢測(cè)方法提供參考。

    猜你喜歡
    烏頭琥珀酸去離子水
    去離子水中的鈣鎂指標(biāo)
    針刺聯(lián)合琥珀酸普蘆卡必利片治療腦卒中后便秘的臨床觀察
    變頻器冷卻水系統(tǒng)嚴(yán)密性檢查及維護(hù)診斷
    含烏頭堿中成藥理論中毒風(fēng)險(xiǎn)的數(shù)學(xué)分析
    中成藥(2018年11期)2018-11-24 02:57:36
    德欽烏頭塊根化學(xué)成分的研究
    中成藥(2018年2期)2018-05-09 07:19:50
    琥珀酸美托洛爾的核磁共振波譜研究
    AGM隔板氯離子的處理與研究
    玻璃纖維(2016年2期)2016-12-18 12:32:03
    α-生育酚琥珀酸酯的酶法合成研究進(jìn)展
    高烏頭的研究進(jìn)展
    中成藥(2016年4期)2016-05-17 06:07:56
    不同稀釋液對(duì)免疫層析法糞便隱血試驗(yàn)的影響
    av专区在线播放| 各种免费的搞黄视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 久久狼人影院| 交换朋友夫妻互换小说| 成人国产av品久久久| 免费大片18禁| 在线观看www视频免费| 国产色爽女视频免费观看| 国产男女超爽视频在线观看| 少妇丰满av| 亚洲精品久久午夜乱码| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 人妻 亚洲 视频| 永久免费av网站大全| 黑人高潮一二区| 一区二区三区乱码不卡18| 自线自在国产av| 国产在线视频一区二区| 亚洲av成人精品一二三区| 搡老乐熟女国产| 最后的刺客免费高清国语| 内地一区二区视频在线| 在线播放无遮挡| 高清视频免费观看一区二区| 中文资源天堂在线| 九草在线视频观看| 国产精品人妻久久久久久| 久热这里只有精品99| 老司机影院毛片| 国产精品久久久久久久电影| 久久99一区二区三区| 婷婷色麻豆天堂久久| 69精品国产乱码久久久| 久久久久久久久大av| 国产成人免费观看mmmm| 七月丁香在线播放| 九色成人免费人妻av| 国产精品女同一区二区软件| 男男h啪啪无遮挡| 毛片一级片免费看久久久久| 黄色怎么调成土黄色| 综合色丁香网| av国产久精品久网站免费入址| 国产精品熟女久久久久浪| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品蜜桃在线观看| 老女人水多毛片| 久久这里有精品视频免费| a级片在线免费高清观看视频| 九草在线视频观看| 精品人妻偷拍中文字幕| 深夜a级毛片| 午夜激情久久久久久久| 99热6这里只有精品| 国产伦在线观看视频一区| 永久免费av网站大全| 一边亲一边摸免费视频| 插阴视频在线观看视频| 国产一级毛片在线| 国产色婷婷99| 欧美+日韩+精品| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 久久久久久久久久久丰满| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 国产免费又黄又爽又色| 日韩av不卡免费在线播放| 黑人猛操日本美女一级片| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 免费看光身美女| 美女主播在线视频| 99九九在线精品视频 | 一级片'在线观看视频| 久久久久网色| 亚洲性久久影院| 欧美日韩视频精品一区| 丰满少妇做爰视频| 久久这里有精品视频免费| 亚洲精品自拍成人| 9色porny在线观看| 亚洲成人一二三区av| 亚洲欧美日韩东京热| 99热国产这里只有精品6| 在线观看免费高清a一片| 在线 av 中文字幕| 男人添女人高潮全过程视频| 日本免费在线观看一区| 26uuu在线亚洲综合色| 国产成人免费无遮挡视频| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 亚洲成色77777| 七月丁香在线播放| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲成色77777| 国产成人免费观看mmmm| 精品一区二区三区视频在线| 99re6热这里在线精品视频| 精华霜和精华液先用哪个| 久久韩国三级中文字幕| 免费少妇av软件| 国产永久视频网站| av国产精品久久久久影院| 老熟女久久久| 久久免费观看电影| 免费观看性生交大片5| 亚洲美女搞黄在线观看| 亚洲电影在线观看av| 精品久久久久久久久av| 在线观看www视频免费| www.av在线官网国产| 亚洲怡红院男人天堂| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 91成人精品电影| 91久久精品电影网| av在线播放精品| 国产乱人偷精品视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 看免费成人av毛片| 97超视频在线观看视频| 99热全是精品| av福利片在线观看| 一级a做视频免费观看| 青春草国产在线视频| 亚洲欧美日韩东京热| 色婷婷av一区二区三区视频| 热99国产精品久久久久久7| a级一级毛片免费在线观看| 久久99精品国语久久久| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美成人午夜免费资源| 中文天堂在线官网| 91精品国产国语对白视频| 91成人精品电影| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 99九九线精品视频在线观看视频| 极品少妇高潮喷水抽搐| 国产成人精品无人区| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久 | 黑人猛操日本美女一级片| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 女性生殖器流出的白浆| 亚洲欧洲日产国产| 九九爱精品视频在线观看| 中文字幕人妻丝袜制服| 91在线精品国自产拍蜜月| 97在线人人人人妻| 久久99精品国语久久久| 久久国内精品自在自线图片| 99re6热这里在线精品视频| www.色视频.com| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 97超碰精品成人国产| 日韩中字成人| 水蜜桃什么品种好| 国产精品一区二区在线观看99| 日韩中文字幕视频在线看片| 国产精品久久久久久精品古装| 十八禁网站网址无遮挡 | 免费黄色在线免费观看| 欧美+日韩+精品| 亚洲av男天堂| 啦啦啦啦在线视频资源| 成年美女黄网站色视频大全免费 | 高清av免费在线| 久久6这里有精品| 乱系列少妇在线播放| 久久精品国产a三级三级三级| 99国产精品免费福利视频| 寂寞人妻少妇视频99o| 日本vs欧美在线观看视频 | 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲中文av在线| 亚洲一区二区三区欧美精品| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 简卡轻食公司| 97在线人人人人妻| 国产男女超爽视频在线观看| 69精品国产乱码久久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图 | 美女福利国产在线| 国产在线视频一区二区| 一区二区三区精品91| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产熟女欧美一区二区| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 草草在线视频免费看| 青青草视频在线视频观看| 久久99热6这里只有精品| 国产又色又爽无遮挡免| 交换朋友夫妻互换小说| 国产男人的电影天堂91| 色婷婷久久久亚洲欧美| 一级爰片在线观看| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 视频区图区小说| 国产综合精华液| 99热全是精品| 国产精品99久久久久久久久| 国产永久视频网站| 大片电影免费在线观看免费| 国产精品嫩草影院av在线观看| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产淫语在线视频| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 黄色怎么调成土黄色| 成人美女网站在线观看视频| 中文欧美无线码| 嫩草影院新地址| 欧美丝袜亚洲另类| 国产毛片在线视频| 在线观看av片永久免费下载| 十分钟在线观看高清视频www | 一本一本综合久久| 精品视频人人做人人爽| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 国产成人91sexporn| 久久青草综合色| 男人狂女人下面高潮的视频| 秋霞伦理黄片| 亚洲精品亚洲一区二区| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲精品日本国产第一区| 午夜影院在线不卡| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 极品人妻少妇av视频| 嫩草影院新地址| 亚洲精品国产av蜜桃| 三级经典国产精品| 十分钟在线观看高清视频www | 午夜福利,免费看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 另类精品久久| 我的老师免费观看完整版| av在线播放精品| 久久久精品免费免费高清| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 免费黄色在线免费观看| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产成人免费无遮挡视频| 国产成人午夜福利电影在线观看| 久久久国产一区二区| 99热这里只有精品一区| 男人舔奶头视频| 国产免费一区二区三区四区乱码| 熟女av电影| 亚洲精品乱久久久久久| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 国产永久视频网站| 在现免费观看毛片| 国产av码专区亚洲av| 国产综合精华液| 中文字幕久久专区| 99久久中文字幕三级久久日本| 三级国产精品片| 欧美三级亚洲精品| 午夜91福利影院| 国产精品99久久久久久久久| 91久久精品国产一区二区三区| 日日啪夜夜爽| 久久久久精品久久久久真实原创| 性色av一级| 日本黄大片高清| 午夜福利视频精品| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国产亚洲欧美精品永久| videos熟女内射| 91aial.com中文字幕在线观看| 老司机亚洲免费影院| 高清视频免费观看一区二区| 99久久精品热视频| 春色校园在线视频观看| 99久久人妻综合| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 人妻少妇偷人精品九色| 青春草视频在线免费观看| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 下体分泌物呈黄色| 少妇被粗大的猛进出69影院 | 日韩 亚洲 欧美在线| 中文资源天堂在线| av免费观看日本| 亚洲成人手机| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲av日韩在线播放| 欧美少妇被猛烈插入视频| 天堂俺去俺来也www色官网| 免费看光身美女| 亚州av有码| 免费黄色在线免费观看| 国产在线视频一区二区| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女中出高潮动态图| 久久久久久久久大av| 纯流量卡能插随身wifi吗| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲国产精品成人久久小说| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 男人舔奶头视频| 男人和女人高潮做爰伦理| 成人亚洲精品一区在线观看| 91在线精品国自产拍蜜月| a级片在线免费高清观看视频| 精品久久久久久久久av| 在线观看免费视频网站a站| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 亚洲无线观看免费| 日韩av不卡免费在线播放| 天美传媒精品一区二区| av黄色大香蕉| 国产精品一区二区在线观看99| 日本vs欧美在线观看视频 | 日本免费在线观看一区| 国产亚洲91精品色在线| 三上悠亚av全集在线观看 | 春色校园在线视频观看| 午夜免费观看性视频| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 丰满少妇做爰视频| 蜜桃在线观看..| 在线观看免费日韩欧美大片 | 一本一本综合久久| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 一级毛片电影观看| 如何舔出高潮| 欧美三级亚洲精品| av一本久久久久| 久久精品久久久久久久性| 久久久国产精品麻豆| 十分钟在线观看高清视频www | 日韩视频在线欧美| 日本与韩国留学比较| 高清不卡的av网站| 国产日韩欧美亚洲二区| 亚洲精品aⅴ在线观看| 国产视频首页在线观看| 亚洲av不卡在线观看| 岛国毛片在线播放| 亚洲伊人久久精品综合| a 毛片基地| 亚洲国产日韩一区二区| 草草在线视频免费看| 午夜福利影视在线免费观看| 中国美白少妇内射xxxbb| 精品国产一区二区久久| 国产淫片久久久久久久久| 亚洲国产精品999| 亚洲自偷自拍三级| 妹子高潮喷水视频| 国产精品久久久久久久电影| 一级毛片我不卡| 国产高清不卡午夜福利| 精品国产国语对白av| 性高湖久久久久久久久免费观看| 好男人视频免费观看在线| 欧美最新免费一区二区三区| 亚洲精品国产av成人精品| 高清午夜精品一区二区三区| 国产精品久久久久成人av| 欧美日韩一区二区视频在线观看视频在线| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产高清不卡午夜福利| 久久国内精品自在自线图片| 女人久久www免费人成看片| 亚洲,一卡二卡三卡| 九草在线视频观看| 99九九在线精品视频 | 国产成人aa在线观看| 美女大奶头黄色视频| 国产精品一区www在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 简卡轻食公司| 精品人妻偷拍中文字幕| 99热这里只有是精品在线观看| 国产黄频视频在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 欧美日韩精品成人综合77777| 中文字幕亚洲精品专区| 亚洲伊人久久精品综合| 亚洲第一av免费看| 免费av中文字幕在线| 国产精品国产av在线观看| 高清av免费在线| 成人综合一区亚洲| 欧美精品国产亚洲| 久久久a久久爽久久v久久| 日韩大片免费观看网站| 免费黄网站久久成人精品| av福利片在线| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 国产成人a∨麻豆精品| 免费av不卡在线播放| av国产久精品久网站免费入址| 精品国产露脸久久av麻豆| 亚洲四区av| 两个人的视频大全免费| 少妇 在线观看| 国产精品偷伦视频观看了| 性色av一级| 精华霜和精华液先用哪个| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 亚洲美女视频黄频| 久久久国产欧美日韩av| 国产精品三级大全| 人妻一区二区av| 国产高清有码在线观看视频| av福利片在线观看| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 国产免费一级a男人的天堂| 老司机影院成人| 日韩欧美 国产精品| 97精品久久久久久久久久精品| 在线观看免费日韩欧美大片 | 99国产精品免费福利视频| 久久6这里有精品| 亚洲国产日韩一区二区| 人妻人人澡人人爽人人| 久久热精品热| 热re99久久精品国产66热6| 欧美bdsm另类| 少妇精品久久久久久久| 男女国产视频网站| 看免费成人av毛片| 亚洲成人手机| 高清午夜精品一区二区三区| 国产美女午夜福利| 如日韩欧美国产精品一区二区三区 | 我要看黄色一级片免费的| 大话2 男鬼变身卡| 国产精品国产三级国产专区5o| 免费观看a级毛片全部| 久久精品国产a三级三级三级| 各种免费的搞黄视频| 久久这里有精品视频免费| 国产高清国产精品国产三级| 久久久欧美国产精品| 我要看日韩黄色一级片| 免费人成在线观看视频色| 国产高清国产精品国产三级| 女人久久www免费人成看片| 99九九在线精品视频 | 国产亚洲一区二区精品| 日本wwww免费看| av在线老鸭窝| 丰满乱子伦码专区| 国产一区二区三区综合在线观看 | 青青草视频在线视频观看| 成人免费观看视频高清| 老司机影院成人| 日韩欧美 国产精品| 51国产日韩欧美| 国产熟女午夜一区二区三区 | 伊人久久国产一区二区| 一级a做视频免费观看| 国产av一区二区精品久久| 成人漫画全彩无遮挡| 久久精品国产亚洲av涩爱| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 91久久精品电影网| 久热久热在线精品观看| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 99热网站在线观看| 免费少妇av软件| 国产精品一区二区在线不卡| 性高湖久久久久久久久免费观看| 婷婷色综合www| 欧美精品一区二区大全| 天堂俺去俺来也www色官网| 视频区图区小说| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产av一区二区精品久久| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲欧美一区二区三区国产| 观看av在线不卡| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 熟女av电影| 国产精品久久久久久av不卡| 交换朋友夫妻互换小说| 亚洲精品456在线播放app| 99热网站在线观看| 国产精品国产av在线观看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 天堂中文最新版在线下载| 国产亚洲91精品色在线| 99re6热这里在线精品视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 伊人亚洲综合成人网| 一级av片app| 一级毛片 在线播放| h视频一区二区三区| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 熟女电影av网| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 亚洲美女视频黄频| 男人添女人高潮全过程视频| 日本av手机在线免费观看| 日本免费在线观看一区| 99热这里只有是精品在线观看| 最新中文字幕久久久久| 久久婷婷青草| 91久久精品国产一区二区成人| 日本黄大片高清| 婷婷色av中文字幕| 亚州av有码| 国产毛片在线视频| 最近手机中文字幕大全| 免费人妻精品一区二区三区视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| av一本久久久久| 看十八女毛片水多多多| 乱系列少妇在线播放| 国产欧美日韩综合在线一区二区 | 街头女战士在线观看网站| 精品人妻一区二区三区麻豆| 欧美少妇被猛烈插入视频| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 国精品久久久久久国模美| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 午夜福利视频精品| 欧美激情极品国产一区二区三区 | 日本黄大片高清| 一本久久精品| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| av不卡在线播放| 亚洲欧美精品自产自拍| 女性被躁到高潮视频| 我的老师免费观看完整版| a 毛片基地| 国产黄色免费在线视频| 韩国高清视频一区二区三区| 中文欧美无线码| 久热久热在线精品观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 免费看av在线观看网站| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产爽快片一区二区三区| 女人精品久久久久毛片| 久久国产精品男人的天堂亚洲 | 国产一区二区三区综合在线观看 | 亚洲av日韩在线播放| 亚洲人与动物交配视频| 国产黄色免费在线视频| 国产精品久久久久久精品古装| 精华霜和精华液先用哪个| 乱人伦中国视频| 我的女老师完整版在线观看| 免费看不卡的av| videossex国产| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产精品一二三区在线看| 美女主播在线视频| 精品一品国产午夜福利视频| 美女内射精品一级片tv| 蜜臀久久99精品久久宅男| av在线老鸭窝| 免费观看性生交大片5| 亚洲av欧美aⅴ国产| 亚洲不卡免费看| 搡老乐熟女国产| 九九在线视频观看精品| 青春草国产在线视频| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 夜夜爽夜夜爽视频| 日韩强制内射视频| 中文资源天堂在线| 一区二区三区四区激情视频| 精品少妇黑人巨大在线播放| 精品少妇内射三级| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 久久人人爽人人片av| 69精品国产乱码久久久| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| av免费在线看不卡| 成年女人在线观看亚洲视频| 97超视频在线观看视频| 男人添女人高潮全过程视频| 97在线视频观看| 99re6热这里在线精品视频| 美女福利国产在线| 欧美日韩综合久久久久久| 中文字幕精品免费在线观看视频 | 水蜜桃什么品种好| 国产精品成人在线| 亚洲图色成人| 久久久国产一区二区| 亚洲精品一二三| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产精品久久久久久久电影| 最近2019中文字幕mv第一页| 免费人妻精品一区二区三区视频| 18禁动态无遮挡网站| 日韩大片免费观看网站| 人妻 亚洲 视频| 国产黄片视频在线免费观看| 欧美区成人在线视频| 欧美精品亚洲一区二区| 亚洲美女黄色视频免费看| 高清毛片免费看| 一边亲一边摸免费视频| av专区在线播放| 久久精品久久精品一区二区三区| 国产有黄有色有爽视频| 国产 精品1| 3wmmmm亚洲av在线观看|