中藥鼠婦蟲種類鑒定及質(zhì)量研究

康四和，譚靜玲，江珍玉，鄧海英?

（1.湖北省藥品監(jiān)督檢驗研究院，湖北 武漢430075； 2.武漢科技大學醫(yī)學院／職業(yè)危害識別控制湖北省重點實驗室，湖北 武漢430065）

鼠婦蟲為我國傳統(tǒng)中藥材，已有2 000 多年的使用歷史，具有破瘀消癥、通經(jīng)利水、解毒止痛作用，用于久瘧瘧母、血瘀經(jīng)閉、癥瘕、小便不通、驚風撮口、牙齒疼痛、鵝口瘡等。該藥材主要含有蛋白類、多肽類及多糖類等成分［1-2］，現(xiàn)代藥效學研究表明，鼠婦蟲具有鎮(zhèn)痛、抗炎、活血、抗腫瘤及抗病原微生物等作用，對癌性劇痛有較好的治療作用，且廣泛用于多種疣性皮膚病的治療［3-9］。鼠婦蟲為鱉甲煎丸、消乳癖膠囊、紅金消結(jié)片等多個中成藥品種處方中重要藥味，但我國對鼠婦蟲藥材的基礎(chǔ)研究較為薄弱，系統(tǒng)性研究尚未見開展，文獻報道雖對其質(zhì)量控制方法進行研究，并被多省藥材標準收載［10-13］，但其藥用基源及種類尚不確定，標準控制指標簡單，難以有效控制藥材質(zhì)量，導致藥材種類混淆、藥材及其成藥制劑質(zhì)量良莠不齊等現(xiàn)象長期存在，制約了鼠婦蟲藥用資源開發(fā)與有效利用。本研究對我國鼠婦蟲藥材的基源種類和品質(zhì)進行探討，為鼠婦蟲藥材及其制劑的質(zhì)量評價和資源開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 鼠婦蟲應用的歷史沿革

鼠婦蟲又名潮蟲、鼠婦、西瓜蟲、濕生蟲、地虱婆等，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》： “主氣癃，不得小便，女人月閉，血癥，癇痓，寒熱，利水道。生平谷”，并列為下品，后世本草多有記載?！稜栄拧?言“鼠多在坎中，背粘負之，故曰鼠負”。諸多本草對其生長環(huán)境及形態(tài)進行了詳細描述?！睹t(yī)別錄》 記載，“鼠婦，生魏郡及人家地上。五月五日取”?！侗静輬D經(jīng)》 云： “今處處有之，多在下濕處，翁器底及土坎中”?？茏趭]曰： “濕生蟲，多足，其色如蚓，背有橫紋蹙起，大者長三四分，在處有之，磚翁及下濕處多。用處絕少”。李時珍謂之“鼠負，因濕化生，故俗名濕生蟲。形似衣魚稍大，灰色”。由上述可見，鼠婦蟲在我國歷代均有應用，按其生境形態(tài)，古代鼠婦與現(xiàn)今所用鼠婦為同類動物，其種類來源并非一種，在顏色上有灰色和蚯蚓色，但并未明確到具體物種［2，14］。

2 鼠婦類動物生境與分布

鼠婦類動物隸屬于甲殼綱等足目潮蟲亞目，潮蟲亞目是等足目動物中的最主要陸生類型，故陸生等足類動物通常也被統(tǒng)稱為“潮蟲”。該類動物主要生活于熱帶、亞熱帶地區(qū)，溫帶地區(qū)種類較少［15-16］，其腹肢具有特殊的偽氣管，可在陸地上呼吸，是少數(shù)完全脫離水域生活的陸生小型甲殼綱動物。該類動物具有向濕性和負趨光性，多喜歡生活在陰暗潮濕的環(huán)境，棲息于朽木、腐葉或石塊下，有時出現(xiàn)在居民村落的房屋、庭院內(nèi)及其附近農(nóng)田、果園、菜園的磚石、朽木及垃圾堆中，有的還生活于水邊或海邊石下。

鼠婦類動物在世界各地分布廣泛，在我國主要分布于華北、華東、華中、華南等地區(qū)，江蘇、浙江、山東、河北等省為鼠婦蟲藥材的主要產(chǎn)區(qū)，道地產(chǎn)區(qū)主要為江蘇蘇州、無錫、常州及浙江杭州、湖州等地，山東泰安、臨沂、濰坊、煙臺等也有一定產(chǎn)量。由于鼠婦類動物種類眾多，雜居現(xiàn)象普遍，在形態(tài)上具有一定的相似性，一般情況下難以區(qū)分，故鼠婦類動物通常也多以鼠婦或潮蟲相稱，這也是造成鼠婦蟲藥材基源混亂的原因之一，在商品藥材樣品中，?？梢娀煊卸鄠€種類來源。

3 鼠婦類動物種類鑒定

我國對陸生等足類動物的研究起步較晚，對其分類研究不夠深入，學者早期曾對潮蟲亞目動物進行過簡單的分類，將能卷曲成球形的種類統(tǒng)稱為鼠婦，定義為鼠婦科；而將不能卷曲成球形的種類統(tǒng)稱為潮蟲，定義為潮蟲科，這種分類方法對該類動物后期正確分類常造成一定的影響［16］。

隨著國內(nèi)外對該類動物種類記述和研究的增多，其科屬劃分逐漸完善。目前我國陸生等足類動物共有11 科、29屬、72 種［15］，其中除喜濕蟲科、氣肢蟲科及卷殼蟲科為我國陸生等足類動物最主要類群外，卷甲蟲科、鼠婦科及潮蟲科是其重要類群。卷甲蟲科動物在我國僅發(fā)現(xiàn)1 屬4 種，卷甲蟲屬的普通卷甲蟲Armadillidium vulgare（Latreille） 為其代表種類，分布廣泛，數(shù)量較多。鼠婦科動物在我國主要有4 屬7 種，鼠婦屬的光滑鼠婦Porcellio laevisLatreille、臘鼠婦屬的多霜臘鼠婦Porcellionides pruinosus（Brandt） 為世界廣布種，在我國各地均能采集，數(shù)量眾多。粗糙鼠婦Porcellio scaberLatreille 原僅分布于歐洲南部，后因人類活動而廣泛遷移于世界各地，如美洲、非洲、大洋洲及亞洲等，在我國部分地區(qū)有分布。潮蟲科動物在我國僅發(fā)現(xiàn)有1 屬3 種，以卡氏雅潮蟲為代表，主要分布于我國亞熱帶和暖溫帶地區(qū)。

雖然我國歷史文獻描述了鼠婦蟲的生境與形態(tài)，但并未明確鼠婦蟲藥材的基源種類，后期文獻逐步將其基源確定為普通卷甲蟲和粗糙鼠婦［17-19］，并被多數(shù)標準沿用［11-13］。由于受早期分類方法的影響，其基源種的科屬歸類一直以來較為混亂，常有卷甲蟲科、平甲蟲科、鼠婦科、潮蟲科等不同歸類表述，如多將粗糙鼠婦定義為平甲蟲科粗糙鼠婦或潮蟲科鼠婦。根據(jù)現(xiàn)代分類學研究，卷甲蟲科和鼠婦科動物的主要區(qū)別在于卷甲蟲科動物能卷曲成球狀，尾肢及尾節(jié)后緣圍成半圓形，而鼠婦科動物不能卷曲成球狀，尾肢棒狀，長于尾節(jié)。潮蟲科動物雖然也不能卷曲成球狀，卻與鼠婦科動物分別歸為不同的科，并未作為鼠婦蟲藥材來源被收載。根據(jù)形態(tài)學特征，二者應分別屬于卷甲蟲科和鼠婦科［15-16］，本研究將二者分類基源擬定為卷甲蟲科普通卷甲蟲和鼠婦科粗糙鼠婦。

根據(jù)形態(tài)特征差異，本研究將收集樣品分為不同類型，并對不同類型樣本種類進行鑒定，結(jié)合文獻記述，建立了鼠婦蟲藥材基源種類及其主要近似種的形態(tài)鑒別檢索表，見表1。

4 質(zhì)量研究

4.1 性狀鑒別

4.1.1 普通卷甲蟲 本品全體橢圓形而稍扁，多卷曲成近球形或半球形，體長0.5～1.2 cm，長約為寬的2 倍。表面灰色至暗褐色，部分具灰白色與灰黑色相間斑紋，略具光澤。頭部近長方形，陷于第一胸節(jié)，前緣有復眼一對，觸角兩對，第一觸角細小，不易觀察，第二觸角較長，觸柄5 節(jié)，觸鞭2 節(jié)，末節(jié)長于近體節(jié)，多脫落。全體由多數(shù)近平行的環(huán)節(jié)構(gòu)成，呈覆瓦狀排列。背部隆起，平滑，腹部內(nèi)陷。胸節(jié)7，寬廣，腹節(jié)5，腹部和胸部背板幾等長，兩者側(cè)緣連成一弧線，第1、2 節(jié)窄，側(cè)緣被第7 胸節(jié)覆蓋。各體節(jié)具同形足1 對，胸肢7 對，腹肢5 對。尾節(jié)呈倒梯形，末端平直，尾肢扁平，外肢節(jié)背面觀呈三角形，末端與尾節(jié)嵌合齊平。第三至第五腹節(jié)側(cè)緣與尾節(jié)、尾肢后緣圍成半圓形。質(zhì)脆易碎，氣腥臭，味微咸（見圖1A）。

4.1.2 粗糙鼠婦 體稍大，長約1～1.5 cm，橢圓形，扁平，有的稍卷曲，但不呈球狀。背部顆粒狀，粗糙，散有淺黃色斑紋，兩側(cè)緣斑紋連續(xù)成一淺黃色條帶。尾節(jié)倒三角形，內(nèi)肢節(jié)較短，較尾節(jié)稍長，外肢節(jié)呈長錐形，長于尾節(jié)（見圖1B）。

4.2 顯微鑒別 取樣品粉末，置顯微鏡下觀察，體壁碎片橙色或黃色，表面具不規(guī)則紋理，有的可見具點狀小圓孔。部分碎片上可見多數(shù)剛毛，無色透明。肌纖維無色或淡黃色，多碎斷，具波狀紋理。棘刺淺黃色，多斷裂，具縱直紋理，見圖2。

表1 鼠婦蟲基源動物及其近似種形態(tài)鑒別

圖1 鼠婦蟲藥材

4.3 薄層色譜鑒別 取本品粉末1 g，加水20 mL，超聲處理20 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水5 mL 使溶解，取上清液作為供試品溶液。另取鼠婦蟲對照藥材1 g，同法制成對照藥材溶液。再取苯丙氨酸、纈氨酸對照品適量，加水制成每1 mL 含1 mg 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（2015 年版《中國藥典》 四部通則0502） 試驗，吸取上述2 種溶液各5 μL，分別點于同一硅膠G 薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水（12 ∶5 ∶4） 為展開劑，展開，取出，晾干，噴以茚三酮試液，在105 ℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，見圖3。由薄層色譜可以看出，不同產(chǎn)地鼠婦蟲藥材樣品與鼠婦蟲對照樣品在薄層圖譜上斑點基本一致，且與苯丙氨酸、纈氨酸對照品呈現(xiàn)一致斑點，表明不同產(chǎn)地樣品中含有基本一致的化學成分。

4.4 浸出物測定 取樣品粉末2～3 g，照醇溶性浸出物測定法（2015 年版《中國藥典》 四部通則2201） 項下的熱浸法測定，用稀乙醇作溶劑，測定10 批鼠婦蟲藥材樣品的浸出物，每批樣品測定3 次，測定結(jié)果見表2。根據(jù)測定結(jié)果，10 批鼠婦蟲藥材樣品浸出物測定值為13.57%～18.85%，平均值為16.21%。

表2 鼠婦蟲藥材信息及浸出物測定結(jié)果表（n＝3）

圖2 鼠婦蟲藥材粉末顯微圖

5 討論

鼠婦蟲為我國傳統(tǒng)少常用蟲類藥材，作用明確，療效顯著，但長期以來其基源種類不明確，多數(shù)文獻或標準對其品種分類記載較為混亂，常有卷甲蟲科、平甲蟲科、鼠婦科、潮蟲科等不同歸類方法，如將普通卷甲蟲定義為潮蟲科，將粗糙鼠婦定義為平甲蟲科粗糙鼠婦或潮蟲科鼠婦等［1-2，11-13］，該基源歸類是沿用我國早期不完善的分類方法的結(jié)果。隨著對該類動物研究的深入，其種類分類逐漸完善，本研究根據(jù)現(xiàn)代分類方法對鼠婦類動物分類情況進行了梳理，建立了鼠婦蟲藥材基源種與主要近似種的鑒別檢索表，并將鼠婦蟲藥材基源種類擬定為卷甲蟲科普通卷甲蟲和鼠婦科粗糙鼠婦。

圖3 鼠婦蟲薄層色譜圖

本研究根據(jù)形態(tài)差異將所收集樣品分為不同類型，并對不同類型樣品進行鑒定，結(jié)果所有樣品中均包含多個種類來源，其中普通卷甲蟲、光滑鼠婦占有較高比例，而粗糙鼠婦僅占較小比例，另外還包含有一些其他種類來源。鼠婦科光滑鼠婦是原產(chǎn)于東亞地區(qū)的品種之一，在我國各地廣為分布，文獻記載其亦供藥用［16，20］，而粗糙鼠婦原產(chǎn)于歐洲，現(xiàn)僅在部分地區(qū)有分布。相較于粗糙鼠婦，光滑鼠婦樣品應更易獲得，但各類現(xiàn)代文獻均僅將粗糙鼠婦作為中藥鼠婦蟲的來源之一，而未收載光滑鼠婦，這種現(xiàn)象與樣品實際情況并不相符。二者到底哪種應為我國鼠婦蟲藥材歷史沿用種類，需進一步開展品種考證。

研究結(jié)果表明，鼠婦蟲藥材基源混亂現(xiàn)象較為普遍。長期以來，鼠婦蟲藥材質(zhì)量控制方法過于簡單，導致藥材正偽品混用現(xiàn)象普遍，嚴重影響了藥材質(zhì)量，增加了藥材使用的安全風險。本研究在分類鑒定的基礎(chǔ)上，對鼠婦蟲藥材基源種類的性狀、顯微、薄層及浸出物等指標項目進行研究，建立了藥材質(zhì)量控制方法，以期能對藥材質(zhì)量進行有效控制和評價。