不同類型幽門螺桿菌感染與兒童過敏性紫癜發(fā)病風險、臨床表型的關(guān)聯(lián)性研究

王志超,劉金祥

(1.江蘇省南通市第二人民醫(yī)院 兒科,江蘇 南通,226002;2.江蘇省如皋市人民醫(yī)院 兒科,江蘇 南通,226500)

過敏性紫癜(HSP)是臨床上較為常見的血管炎綜合征，主要由免疫復合物介導，以小血管炎為主要臨床表現(xiàn)，其發(fā)病率在小兒免疫性疾病中占首位，且呈現(xiàn)逐年上升的趨勢[1]。臨床上,HSP以皮膚紫癜、關(guān)節(jié)癥狀、胃腸道癥狀和腎臟損害為主要特征[2]。研究[3]顯示，支原體、幽門螺桿菌(Hp)、鏈球菌等病原菌的感染是引起HSP患兒自身免疫應答改變的主要誘因。研究[4]表明,Hp感染后的免疫反應與HSP發(fā)病密切相關(guān)。Hp分為Ⅰ型、Ⅱ型和中間型，各類型在HSP發(fā)病中的作用不同，因此本研究主要探討不同類型Hp感染與HSP患兒發(fā)病的關(guān)系及其與不同臨床表型的關(guān)聯(lián)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月—2019年10月江蘇省南通市第二人民醫(yī)院接受治療的HSP患兒100例為病例組，其中男65例，女35例;年齡4～14歲;病程5～27 d。其中15例單純皮膚型,29例伴消化道癥狀,31例伴有關(guān)節(jié)受累。同時，選取同期在本院進行體檢的100例健康兒童為對照組，其中男67例，女33例;年齡5～14歲。2組性別和年齡差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。本研究所涉及的兒童及其監(jiān)護人均知曉該研究方案且簽署知情同意書，該研究方案通過本院倫理委員會的批準(批準文號20160625)。HSP的診斷標準:所有HSP患兒均符合2006年歐洲抗風濕聯(lián)盟及歐洲兒科風濕病學會制定的HSP診斷標準[5]。Hp陽性判斷標準:運用膠體金法進行Hp抗體檢測,Hp抗體陽性者即為Hp陽性，其中Hp抗體包括免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)。當患兒處于急性感染期，抗體類型主要為IgM,當患兒處于恢復期，抗體類型主要為IgG。

1.2 方法

1.2.1 Hp分型檢測方法:抽取患兒外周靜脈血5 mL,2 500轉(zhuǎn)/min,離心20 min,取上層血清30 μL,運用Hp抗體檢測試劑盒(膠體金法)檢測患兒的Hp感染狀況，之后運用免疫印跡法檢測患兒Hp-IgG抗體分型。Hp檢測試劑盒和Hp抗體分型檢測試劑盒購自蘇州海路生物科技有限公司。分型[6]:Ⅰ型，細胞毒素相關(guān)基因A蛋白(CagA)和空泡毒素A(VacA)抗體呈陽性;Ⅱ型,CagA和VacA抗體呈陰性，尿素酶A(UreA)和尿素酶B(UreB)抗體至少1項為陽性;中間型,CagA抗體和VacA抗體其中任意1項為陽性。Hp感染陰性:CagA抗體、VacA抗體、UreA抗體以及UreB抗體均為陰性。

1.2.2 腎功能和紫癜性腎炎標志物檢測方法:空腹抽取患兒外周靜脈血血清待測,2 500轉(zhuǎn)/min,離心20 min。采用全自動生化分析儀和配套試劑盒檢測血清中血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)含量;采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測紫癜性腎炎標志物血清胱抑素(CysC)、腫瘤標志物(TM)、血管性血友病因子(vWF)、血管細胞間黏附分子-1(sVCAM-1)、結(jié)締組織生長因子(CTGF)、金屬蛋白酶9(MMP9)含量。檢測試劑盒購自美國R&D公司，操作嚴格按照說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學分析

本研究所涉及的試驗數(shù)據(jù)均運用SPSS 20.0統(tǒng)計學軟件進行統(tǒng)計學分析，其中計量資料運用t檢驗。采用均數(shù)±標準差表示;計數(shù)資料運用χ2檢驗，采用百分比表示;等級資料采用秩和檢驗。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 Hp感染對HSP發(fā)病的影響

病例組有35例患兒Hp呈陽性,Hp陽性率為35.00%;對照組有17例患兒Hp陽性,Hp陽性率為17.00%;2組兒童Hp陽性率差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

2.2 Hp感染對HSP腎功能的影響

Hp陽性者腎功能Scr、BUN顯著高于Hp陰性者(P<0.05);Hp陽性者紫癜性腎炎標志物CysC、TM、vWF、sVCAM-1、CTGF和MMP9水平均顯著高于Hp陰性者(P<0.05),見表1。

表1 HSP患兒Hp陽性和Hp陰性腎功能以及血清中紫癜性腎炎標志物濃度比較

Scr:肌酐;BUN:尿素氮;CysC:血清胱抑素;
TM:腫瘤標志物;vWF:血管性血友病因子;
sVCAM -1:血管細胞間黏附分子-1;CTGF:結(jié)締組織生長因子;
MMP9:金屬蛋白酶9。與Hp陰性者比較,*P<0.05。

2.3 不同類型Hp感染對HSP發(fā)病的影響

病例組Hp陽性者35例,Ⅰ型17例,Ⅱ型6例，中間型12例;對照組中,Ⅰ型3例,Ⅱ型12例，中間型2例。病例組I型和中間型感染患兒比例顯著高于對照組(P<0.05)。

2.4 不同類型Hp感染對HSP患兒關(guān)節(jié)癥狀的影響

病例組31例(Ⅰ型菌株17例,Ⅱ型菌株4例，中間型菌株10例)患兒合并患有關(guān)節(jié)癥狀，主要表現(xiàn)為活動受限、腫痛等，無關(guān)節(jié)癥狀者4例(Ⅱ型菌株2例，中間型菌株2例)。HSP合并關(guān)節(jié)癥狀患兒中,Ⅰ型菌株感染率顯著高于無關(guān)節(jié)癥狀的患兒(χ2=6.740,P=0.009);中間型菌株感染率和無關(guān)節(jié)癥狀患兒感染率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.890,P=0.347);Ⅱ型菌株感染率顯著低于無關(guān)節(jié)癥狀的患兒(χ2=4.950,P=0.026)。

2.5 不同類型Hp感染對HSP消化道癥狀的影響

29例HSP患兒合并消化系統(tǒng)癥狀，其中17例感染Ⅰ型菌株,2例感染Ⅱ型菌株,10例感染中間型菌株。6例HSP患兒無消化系統(tǒng)癥狀，其中4例Ⅱ型菌株,2例中間型菌株。HSP合并消化系統(tǒng)癥狀患兒中,Ⅰ型菌株感染率顯著高于無消化系統(tǒng)癥狀患兒(χ2=7.770,P=0.005);中間型菌株感染率和無消化系統(tǒng)癥狀患兒感染率差異無統(tǒng)計學意義(χ2=0.090,P=0.766);Ⅱ型菌株感染率顯著低于無消化系統(tǒng)癥狀患兒(χ2=14.990,P<0.001)。

3 討 論

HSP是臨床上較為常見的血管炎綜合征，主要由免疫復合物介導，以小血管炎為主要臨床表現(xiàn)，主要累及小血管和毛細血管的自身免疫性疾病。HSP疾病進展過程中常累及腎小球，進而影響患兒的腎臟濾過功能，導致代謝產(chǎn)物排泄發(fā)生障礙[7]。腎臟損害是HSP病情的嚴重表現(xiàn)，與HSP預后有關(guān)。HSP發(fā)病機制尚不清楚，研究[8]表明,HSP發(fā)病與機體感染密切相關(guān)。Hp是存在于胃黏膜中的革蘭氏陰性需氧菌，研究[9-10]表明,Hp感染與HSP存在密切關(guān)系。

Hp感染誘發(fā)HSP的機制大致如下:機體在Hp及其代謝產(chǎn)物的持續(xù)刺激下，產(chǎn)生免疫復合物沉積在患兒的毛細血管基底膜，進而將補體C3活化為C3a、C5a、C3b等過敏毒素，形成膜攻擊單位。近些年，隨著對Hp的生物學特性、致病機理以及生物分型等研究不斷深入，越來越多研究發(fā)現(xiàn),Hp菌株是決定患兒感染預后的重要因素。本研究表明，病例組Hp的陽性率為35.00%;對照組Hp陽性率為17.00%;病例組Hp陽性率顯著高于對照組，提示Hp感染參與了HSP發(fā)病。

蛋白質(zhì)的主要代謝產(chǎn)物為Scr和BUN,CysC是機體反映腎小球濾過功能的內(nèi)源性標志物[11]。本研究表明,HSP患兒中,Hp陽性者腎功能Scr、BUN顯著高于Hp陰性者，提示Hp會加重患兒的腎功能損傷。Hp的菌體結(jié)構(gòu)和鞭毛結(jié)構(gòu)及代謝物會刺激多種細胞因子分泌[12]。TM和vMF是糖基化蛋白，當內(nèi)皮細胞發(fā)生損傷，其會釋放入患兒的血液中;而VCAM-1是位于內(nèi)皮細胞表面的黏附分子，介導炎癥細胞遷移至內(nèi)皮細胞進而損傷內(nèi)皮細胞[13-14]。CTGF和MMP9是反映HSP患兒腎間質(zhì)纖維化的重要指標[15-16]。本研究結(jié)果顯示,Hp陽性者TM、vWF、sVCAM-1、CTGF和MMP9水平同樣顯著高于Hp陰性者，提示Hp會引起HSP患兒內(nèi)皮功能損傷，使得腎間質(zhì)發(fā)生重構(gòu)，最終損害機體腎小球的濾過功能。Hp分為Ⅰ型、Ⅱ型和中間型，有研究顯示,Hp菌株有不同分型，其致病作用存在巨大差異。Ⅰ型菌株可產(chǎn)生VacA和CagA，會引起上消化組織炎癥反應，引起潰瘍疾病的發(fā)生與發(fā)展;Ⅱ型Hp不產(chǎn)生VacA和CagA,且毒性小，僅能夠引起輕度慢性淺表性胃炎;中間型表達產(chǎn)生VacA或者CagA,毒力介于兩者之間。本研究顯示,Hp的不同分型在HSP發(fā)病中作用不同，可能為機體感染高毒力菌株從而損傷患兒胃黏膜屏障功能，且產(chǎn)生眾多致病因子，進而刺激機體釋放細胞因子[10]。

綜上所述,HSP的發(fā)病及預后可能與Hp感染存在關(guān)聯(lián)，且不同類型Hp感染的致病作用存在差異。Ⅰ型菌株感染與HSP關(guān)節(jié)和消化道損害有關(guān)。