秸稈與麥粒復(fù)配栽培種基質(zhì)對(duì)羊肚菌菌絲酶活性的影響及配方優(yōu)化

苗人云 ，劉天海 ，唐 杰 ，黃忠乾 ，彭衛(wèi)紅 ，譚 昊 ，3*

（1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所，成都 610066；2.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部西南區(qū)域農(nóng)業(yè)微生物資源利用科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，成都 610066；3.江南大學(xué)生物工程學(xué)院，江蘇無錫 214062）

羊肚菌屬于子囊菌門（Ascomycota），盤菌綱（Pezizomycetes），盤菌目（Pezizales），羊肚菌科（Morchellaceae），羊肚菌屬（Morchella）。目前大規(guī)模人工栽培的種類主要包括梯棱羊肚菌（Morchella importuna）、六妹羊肚菌（M.sextelata）、七妹羊肚菌（M.eximia）。栽培種是羊肚菌栽培的重要一環(huán)，栽培種中羊肚菌菌絲的活力最終會(huì)影響到收獲羊肚菌子實(shí)體的產(chǎn)量。目前，國(guó)內(nèi)公開的羊肚菌栽培種配方用到的原料中主料有麥粒、雜木屑、麩皮、玉米芯粉、谷殼、草粉、腐殖土等，輔料包括石膏、碳酸鈣、生石灰、磷酸二氫鉀、磷酸二氫鈣、硫酸鎂、羊肚菌基腳土等[1-2]，其組成較為復(fù)雜，羊肚菌菌絲在這些配方的基質(zhì)上的生長(zhǎng)效果各有好壞，背后的原因可能是各種天然原材料在營(yíng)養(yǎng)成分組成上的差異對(duì)菌絲生長(zhǎng)和活力造成影響。借鑒香菇等食用菌的研究結(jié)果，香菇菌絲在分解利用微晶纖維素、木質(zhì)素磺酸鈉、葡萄糖等不同碳源物質(zhì)時(shí)蛋白質(zhì)分泌組中各種分解酶的表達(dá)量各有不同[3]；不同種類的秸稈原料制成的香菇菌棒在營(yíng)養(yǎng)成分組成、碳氮比等因素上的差異可造成香菇菌絲漆酶、纖維素酶、半纖維素酶等分解酶的活性差異[4]。羊肚菌方面，作者在前期工作中發(fā)現(xiàn)不同種類、不同比例的秸稈與麥粒原料復(fù)配后的外源營(yíng)養(yǎng)袋基質(zhì)在營(yíng)養(yǎng)成分屬性尤其是碳氮比方面存在差異，影響到羊肚菌最終出菇產(chǎn)量的高低差異[5]。綜合以上線索，羊肚菌菌種培養(yǎng)基質(zhì)中可能存在類似的規(guī)律，制作菌種基質(zhì)的秸稈等原料的化學(xué)成分屬性可能影響羊肚菌分解利用基質(zhì)的關(guān)鍵酶的產(chǎn)生量，從而間接造成菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)的差異。

前期研究中，發(fā)現(xiàn)營(yíng)養(yǎng)袋基質(zhì)中的羊肚菌菌絲主要產(chǎn)生γ-淀粉酶（EC 3.2.1.3）降解淀粉，而木聚糖酶（EC 3.2.1.8）是降解半纖維素的主力[6]。在木質(zhì)素降解方面，羊肚菌的漆酶活性（EC 1.10.3.2）主要由一個(gè)AA1_3家族、66 kDa大小的氧化酶蛋白提供[7]。錳過氧化物酶（EC 1.11.1.13）和多功能過氧化物酶（versatile peroxidase，EC1.11.1.16）活性由子囊菌較原始的AA2家族過氧化物酶蛋白提供，不具有像擔(dān)子菌一樣典型的錳過氧化物酶和木質(zhì)素過氧化物（EC 1.11.1.14）基因[6]。由于栽培種基質(zhì)與營(yíng)養(yǎng)袋基質(zhì)均為富含纖維素、半纖維素、木質(zhì)素、淀粉等碳源營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì)，我們推測(cè)上述纖維素酶、木聚糖酶、γ-淀粉酶、漆酶、錳過氧化物酶和多功能過氧化物酶也同樣是羊肚菌菌絲分解利用栽培種基質(zhì)中纖維素、半纖維素、淀粉和木質(zhì)素的代表性關(guān)鍵酶。分別選用小麥、水稻、玉米和油菜4種作物秸稈為制作羊肚菌栽培種基質(zhì)的主料，并與麥粒復(fù)配。綜合菌絲長(zhǎng)勢(shì)和菌核形成情況的外觀觀察，酶活性水平與活性氧分子含量的測(cè)定，以及栽培效果驗(yàn)證，優(yōu)化獲得可應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)的輕質(zhì)、高效的羊肚菌栽培種基質(zhì)配方。

1 材料和方法

1.1 供試品種

試驗(yàn)用羊肚菌品種為六妹羊肚菌“川羊肚菌6號(hào)”，其菌株來源于四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所。

1.2 供試材料

1.2.1 主要材料及試劑

馬鈴薯葡萄糖瓊脂（北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司）、油菜秸稈（收割后 6個(gè)月使用，含水量為9.37%，顆粒度為＜3 cm的碎片）、水稻秸稈（收割后2個(gè)月使用，含水量為8.94%，顆粒度為＜3 cm的碎片）、小麥秸稈（收割后6個(gè)月使用，含水量為8.14%，顆粒度為＜3 cm的碎片）、玉米秸稈（收割后2個(gè)月使用，含水量為8.20%，顆粒度為＜3 cm的碎片）、麥粒、纖維素酶活性測(cè)定試劑盒（CL-2-Y，蘇州科銘生物技術(shù)有限公司（下同）、木聚糖酶活性測(cè)定試劑盒（NEX-2-G）、漆酶活性測(cè)定試劑盒（QM-2-G）、錳過氧化物酶活性測(cè)定試劑盒（MNP-2-G）、多功能過氧化物酶活性測(cè)定試劑盒（LIP-2-G）、γ-淀粉酶活性測(cè)定試劑盒（THM-2-G）、過氧化氫含量測(cè)定試劑盒（H2O2-2-Y）、超氧陰離子含量測(cè)定試劑盒（SA-2-G）。

1.2.2 4種秸稈單獨(dú)使用或與麥粒復(fù)配的栽培種基質(zhì)

分別以4種作物秸稈，添加或不添加麥粒制成栽培種基質(zhì)（表1）。其中麥粒添加重量比40%參照賀新生等的羊肚菌栽培種基質(zhì)無土配方采用的麥粒添加比例[1]。另按照100 g主料添加1.5 g的比例添加石灰作為輔料。分別配制8種配料并裝入廣口瓶，放入高壓滅菌鍋中于121℃滅菌150 min，無菌冷卻至25℃以下接入母種，放入培養(yǎng)箱22℃避光培養(yǎng)25 d。

表1 4種純秸稈或秸稈與麥粒復(fù)配的羊肚菌栽培種基質(zhì)主料配方Table 1 Cultivating spawn formula of morel，using straws solely or in combination with wheat grain

1.2.3 油菜秸稈與麥粒按不同比例復(fù)配的栽培種基質(zhì)

以1.2.2試驗(yàn)中篩選獲得的油菜秸稈為試驗(yàn)材料，設(shè)置5個(gè)復(fù)配比例（表2），按表2配方并按照100 g主料添加1.5 g的比例添加石灰，分別配制5種配料制成栽培種。

表2 油菜秸稈與麥粒按不同比例復(fù)配的栽培種基質(zhì)配方Table 2 Formula of cultivating spawn substrate made from different proportions of rapeseed straw in combination with wheat grains %

1.3 供試方法

1.3.1 菌種酶活、活性氧分子水平和菌種制作材料營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定

采用浸提法提取栽培種基質(zhì)中以羊肚菌分泌的胞外酶為主的酶蛋白[6，8]，使用蘇州科銘生物技術(shù)有限公司的試劑盒，參照試劑盒說明書的方法步驟，對(duì)纖維素酶、木聚糖酶、漆酶、錳過氧化物酶、多功能過氧化物酶和γ-淀粉酶（又稱糖化酶）的活性進(jìn)行測(cè)定，對(duì)過氧化氫、超氧陰離子的含量進(jìn)行測(cè)定。菌種制作材料隨機(jī)取樣，粉碎均勻后，按照苗人云等[5]描述的方法測(cè)定其營(yíng)養(yǎng)成分，以每克干重中的營(yíng)養(yǎng)成分毫克數(shù)表示。碳氮比根據(jù)原材料檢測(cè)結(jié)果按各配方中各原料的用量比分別計(jì)算出各配方的總碳氮量，然后總碳含量/總氮含量的值即為各配方碳氮比。

1.3.2 農(nóng)藝性狀測(cè)定

菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)：包括菌絲濃密度和菌核多少，參照李欣然、李書蘭等和劉福陽等的方法，對(duì)菌絲濃密度和菌核多少以“-”和“+”表示，分為 6個(gè)等級(jí)：“-”表示無菌絲或無菌核，“+”越多說明菌絲越濃密或菌核數(shù)量越多，“+”表示菌絲稀疏或菌核少，“++”表示菌絲較稀疏或菌核較少，“+++”表示菌絲較濃密或菌核較多，“++++”表示菌絲濃密或菌核多，“+++++”表示菌絲很濃密或菌核很多[9，10]。

產(chǎn)量：試驗(yàn)處理鮮子實(shí)體的重量。

1.3.3 經(jīng)濟(jì)效益

栽培羊肚菌時(shí)總產(chǎn)出減去總投入的值即為經(jīng)濟(jì)效益。參照劉偉等人的方法[11]，其中總產(chǎn)出即賣出羊肚菌的所得；總投入包括原種成本、原材料、燃料動(dòng)力、生產(chǎn)人工投入、設(shè)施設(shè)備占用費(fèi)、土地租金和棚架設(shè)施等各項(xiàng)投入。

1.3.4 栽培試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在觀察到表1中添加麥粒的4種配方（B、D、F、H）具有使羊肚菌菌絲酶活性和生長(zhǎng)趨勢(shì)相對(duì)增強(qiáng)的基礎(chǔ)上，制得4種栽培種，即設(shè)計(jì)4個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)3.0 m2，于2016年10月至2017年4月在四川省簡(jiǎn)陽市養(yǎng)馬鎮(zhèn)田家壩村進(jìn)行栽培試驗(yàn)。

按表2制得5種栽培種基質(zhì)，每種基質(zhì)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1.5 m2，于 2017年10月至2018年4月在四川省簡(jiǎn)陽市養(yǎng)馬鎮(zhèn)田家壩村進(jìn)行栽培試驗(yàn)。

1.3.5 栽培與出菇管理

按常規(guī)生產(chǎn)方法進(jìn)行生產(chǎn)管理出菇[12]。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

主成分分析（principal component analysis，PCA）：采用MVSP分析軟件對(duì)配方A～H的營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行主成分分析。

酶活、活性氧分子、產(chǎn)量：采用SPSS18.0分析軟件進(jìn)行單因素方差分析，其中多重比較采用Tukey檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同秸稈對(duì)羊肚菌菌絲生長(zhǎng)和酶活性的影響

2.1.1 菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)

觀察栽培種A～H的菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)，每個(gè)配方觀察了10瓶作為重復(fù)，發(fā)現(xiàn)使用不同秸稈的栽培種基質(zhì)上生長(zhǎng)的菌絲密度和菌核密度存在差異，而在秸稈的基礎(chǔ)上添加麥粒輔料后，均表現(xiàn)出菌絲濃密程度和菌核密度增加的情況（表3、圖1～圖2）。

然后，對(duì)潛變量的組合信度進(jìn)行檢驗(yàn)。組合信度主要是評(píng)價(jià)一組潛在變量的一致性程度，此信度指標(biāo)是內(nèi)部一致性的重要指標(biāo)之一，組合信度越高，表示測(cè)量指標(biāo)間有高度的內(nèi)在關(guān)聯(lián)，反之亦然。一般認(rèn)為潛在變量的組合信度值最好在0.6以上，個(gè)別顯性變量的信度接受值也可采用0.5[24]。分析得知各潛變量的組合信度均在0.7以上，表明變量具有較好的內(nèi)部一致性。

表3 栽培種基質(zhì)中的羊肚菌菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)Table 3 Growth performances of morel mycelium in the substrates of cultivating spawn

圖1 從左到右為純小麥、水稻、玉米和油菜秸稈為基質(zhì)的栽培種Figure 1 Frow the left to the right，cultivating spawn with the substrates made from pure straws of wheat， rice， corn， or rapeseed

圖2 從左到右為60%小麥、水稻、玉米和油菜秸稈分別與40%麥粒復(fù)配為基質(zhì)的栽培種Figure 2 Frow the left to the right,cultivating spawn with the substrates made from 60%wheat,rice,corn,or rapeseed straw in combination with 40%wheat grains

2.1.2 營(yíng)養(yǎng)成分及主成分分析

對(duì)4種秸稈材料和麥粒的19種營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)表1配方換算獲得8個(gè)配方的19種營(yíng)養(yǎng)成分，并分別對(duì)8個(gè)配方的19種營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行比較，結(jié)果顯示（表4）:純油菜秸稈配方的纖維素（P＜0.01）和游離脂肪酸（P＜0.05）含量顯著高于其他7個(gè)配方，而全氮（P＜0.01）、全磷（P＜0.01）、半纖維素（P＜0.05）、不溶性果膠（P＜0.01）、總蛋白質(zhì)（P＜0.01）和游離氨基酸（P＜0.01）的含量顯著低于其他7個(gè)配方；油菜秸稈與麥粒復(fù)配配方的全碳含量顯著高于其他7個(gè)配方（P＜0.01）。結(jié)果表明，不同秸稈以及是否添加麥?？赡苁峭ㄟ^多種營(yíng)養(yǎng)成分變化的復(fù)合因素來共同影響栽培種基質(zhì)中羊肚菌菌絲的酶活性，碳氮比在其中可能起到一定的影響。

由于制作栽培種基質(zhì)的秸稈、麥粒等原料營(yíng)養(yǎng)成分組成較為復(fù)雜，對(duì)酶活性的影響可能不是簡(jiǎn)單地由某一兩項(xiàng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的含量比例決定，而是受多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量屬性協(xié)同影響。因此，為了解不同配方之間在營(yíng)養(yǎng)成分組成方面的相似性和差異性，對(duì)8個(gè)配方的19種營(yíng)養(yǎng)成分進(jìn)行主成分分析。以主成分1為X軸、主成分2為Y軸作圖可知，8個(gè)配方可分為4類，其中4種純秸稈配方均在左邊，且純小麥、純水稻和純玉米秸稈配方為一類，純油菜秸稈配方單獨(dú)為一類；4種秸稈與麥粒復(fù)配的配方均在右邊，且小麥、水稻和玉米秸稈與麥粒復(fù)配配方為一類，油菜秸稈與麥粒復(fù)配配方單獨(dú)為一類，同類中的材料成分相近（圖3）。

表4 栽培種基質(zhì)配方營(yíng)養(yǎng)成分比較Table 4 Comparison of the nutritional composition of the cultivating spawn formula

2.1.3 酶活性及活性氧分子水平

對(duì)比8種栽培種基質(zhì)的酶活性及活性氧分子水平，結(jié)果顯示（表5）：對(duì)于同一種秸稈，添加麥粒相比不添加麥粒普遍提升了其活性氧分子含量水平（僅水稻秸稈添加與不添加麥粒的過氧化氫含量差異P=0.051，其他3種秸稈添加與不添加麥粒的過氧化氫含量以及所有4種秸稈添加與不添加麥粒的活性氧分子含量差異P值均小于0.05），并在纖維素酶、半纖維素酶（木聚糖酶）、木質(zhì)素降解酶系（漆酶、錳過氧化物酶、多功能過氧化物酶）和淀粉酶（γ-淀粉酶）6種酶中至少顯著提升了3種酶的活性（P＜0.05）。其中油菜秸稈與麥粒搭配使全部6種酶的活性得到顯著提升（P值均小于0.01），促進(jìn)羊肚菌對(duì)秸稈基質(zhì)化的利用。

2.1.4 不同秸稈的栽培種基質(zhì)對(duì)羊肚菌栽培產(chǎn)量的影響

圖3 栽培種基質(zhì)配方主成分分析圖Figure 3 PCA scatter plots of the cultivating spawn formula

由表5可知，油菜秸稈與麥粒復(fù)配的組合相比其他3種秸稈與麥粒的復(fù)配更能較為全面地提升分解纖維素、半纖維素、淀粉和木質(zhì)素的關(guān)鍵酶的活性水平，可能有助于提高菌絲對(duì)栽培種基質(zhì)的分解利用能力，提升菌絲活力。為驗(yàn)證這4種在酶活性表現(xiàn)上存在明顯差異的秸稈麥粒復(fù)配組合是否與羊肚菌產(chǎn)量高低趨勢(shì)一致，開展了田間栽培試驗(yàn)。

表5 栽培種基質(zhì)中的羊肚菌酶活性和活性氧分子水平Table 5 Enzymatic activities and ROS levels of morel mycelium in the cultivating spawn substrates μg·min-1·g-1

圖4 種秸稈與麥粒復(fù)配基質(zhì)栽培種的產(chǎn)量Figure 4 Morel yield of the cultivating spawns made from the four kinds of straws in combination with wheat grains

2.1.5 菌種秸稈材料的選擇

從圖4中已知，玉米、水稻秸稈分別與麥粒復(fù)配基質(zhì)栽培種的產(chǎn)量顯著低于油菜秸稈與麥粒復(fù)配基質(zhì)的栽培種，而小麥秸稈與麥粒復(fù)配基質(zhì)栽培種的產(chǎn)量接近油菜秸稈與麥粒復(fù)配基質(zhì)的栽培種。小麥秸稈已廣泛用于食用菌生產(chǎn)、造紙、動(dòng)物飼料等，而油菜秸稈目前回收利用率較低。綜合考慮產(chǎn)量與農(nóng)業(yè)廢棄物循環(huán)利用因素，選取油菜秸稈與麥粒的搭配，進(jìn)行進(jìn)一步的配方比例優(yōu)化。

2.2 油菜秸稈與麥粒配比優(yōu)化

根據(jù)2.1.5篩選獲得適宜制作羊肚菌栽培種的材料為油菜秸稈和麥粒復(fù)配，進(jìn)一步優(yōu)化油菜秸稈與麥粒的配比。

2.2.1 油菜秸稈與麥粒不同配比的出菇產(chǎn)量

油菜秸稈與麥粒按不同比例復(fù)配的栽培種H1～H5栽培羊肚菌均能正常出菇，且產(chǎn)量差異顯著，其中麥粒占比25%的配方產(chǎn)量顯著高于其他4個(gè)配方（P＜0.05）（圖 5）。

2.2.2 經(jīng)濟(jì)效益

圖5 油菜與麥粒復(fù)配的5個(gè)梯度配方栽培種的產(chǎn)量Figure 5 Yields of five gradient formula of cultivating spawn substrate made from rapeseed straw plus wheat grains

供試5個(gè)處理的成本按照2017—2018年四川省成都市周邊地區(qū)的原種成本、原材料、燃料動(dòng)力、生產(chǎn)人工投入、設(shè)施設(shè)備占用費(fèi)、土地租金和棚架設(shè)施等的平均價(jià)格計(jì)算，鮮銷價(jià)格按照90元/kg計(jì)，進(jìn)行各處理成本及經(jīng)濟(jì)效益分析[11]。由表 6可知，供試各處理的菌種成本在3.46～6.93元/m2，且菌種成本隨著秸稈用量的減少而減少；供試各處理的栽培效益在 51.30～73.00元/m2，其中麥粒占比25%的配方（H5）栽培效益最高。綜合考量出菇產(chǎn)量與經(jīng)濟(jì)效益，主料中油菜秸稈與麥粒的優(yōu)化配比為 3∶1。

表6 油菜與麥粒復(fù)配的5個(gè)梯度配方栽培種的成本及效益Table 6 Costs and benefits of five gradient formula of cultivating spawn substrate made from rapeseed straw plus wheat grains,and comparison with the CK commercial cultivating spawn

3 討論

4種秸稈中加入麥粒后培養(yǎng)羊肚菌，羊肚菌菌絲6種酶活性及活性氧分子含量水平均發(fā)生部分或全部提升，說明添加麥粒后極大地提升羊肚菌產(chǎn)生半纖維素、木質(zhì)素和淀粉降解酶的能力，促進(jìn)羊肚菌對(duì)秸稈基質(zhì)的利用，與香菇對(duì)培養(yǎng)基質(zhì)利用的研究結(jié)果相似[4，13]。試驗(yàn)結(jié)果也印證了這6種酶是羊肚菌菌絲分解利用栽培種基質(zhì)中纖維素、半纖維素、淀粉和木質(zhì)素的代表性關(guān)鍵酶的推測(cè)，與代俊杰的研究結(jié)果相符[14]。食用菌菌絲胞外酶與食用菌的生長(zhǎng)發(fā)育狀況密切相關(guān)，測(cè)定胞外酶活性的大小及動(dòng)態(tài)變化趨勢(shì)可以側(cè)面反映出菌絲生長(zhǎng)的茁壯程度以及生長(zhǎng)發(fā)育的變化規(guī)律[15-16]，且不同基質(zhì)中食用菌菌絲胞外酶活性存在差異[17-19]，所以以羊肚菌菌絲酶活性的提升來作為選擇配方基質(zhì)的借鑒具有科學(xué)依據(jù)。對(duì)比4種純秸稈和4種秸稈麥粒復(fù)配基質(zhì)中的羊肚菌菌絲濃度和菌核密度，發(fā)現(xiàn)秸稈復(fù)配麥粒后均表現(xiàn)出菌絲增濃和菌核增密的情況，這與劉奇正等人的研究結(jié)果相符[20]，而菌絲長(zhǎng)勢(shì)、菌核數(shù)量與羊肚菌的出菇機(jī)制有一定關(guān)系[10，21]，且菌核的數(shù)量某種程度上代表了可以供給到生殖生長(zhǎng)即所要獲得的子實(shí)體的營(yíng)養(yǎng)數(shù)量[14]，故菌絲長(zhǎng)勢(shì)和菌核數(shù)量可以作為評(píng)價(jià)羊肚菌菌種質(zhì)量的指標(biāo)。栽培種基質(zhì)配方的主成分分析表明，油菜秸稈的營(yíng)養(yǎng)成分與其他3種秸稈差異較大，加入麥粒復(fù)配后仍然如此，而油菜秸稈和麥粒復(fù)配后羊肚菌菌絲降解基質(zhì)中碳源營(yíng)養(yǎng)的6種關(guān)鍵酶活性和活性氧分子含量水平也明顯好于其他3種秸稈與麥粒復(fù)配的配方，這種一致性說明了正是因?yàn)橛筒私斩捿^為獨(dú)特的營(yíng)養(yǎng)成分組成，使得以油菜秸稈為主料的基質(zhì)配方相比其他秸稈更能較為全面地提升羊肚菌降解利用菌種基質(zhì)碳源營(yíng)養(yǎng)的關(guān)鍵酶的活性，并提升活性氧分子水平從而促進(jìn)菌核形成。優(yōu)化獲得的羊肚菌秸稈栽培種配方較國(guó)內(nèi)公開的栽培種配方[1-2，10，22]，具有配方簡(jiǎn)單、麥粒用量少、成本低、質(zhì)輕便運(yùn)輸?shù)膬?yōu)點(diǎn)，不僅可有效降低栽培者的成本增加效益，還可利用農(nóng)村大量易得的作物秸稈，有助于農(nóng)業(yè)廢棄物循環(huán)利用，減少秸稈焚燒，還能少用或不用木屑、刨花等本可制成膠合板材的木質(zhì)原料，節(jié)約林木資源，使羊肚菌制種環(huán)節(jié)向高效、生態(tài)的目標(biāo)邁進(jìn)。

綜上，本研究通過對(duì)不同配方菌種菌絲生長(zhǎng)表現(xiàn)、營(yíng)養(yǎng)成分及主成分分析和酶活性及活性氧分子含量水平比較分析，驗(yàn)證了羊肚菌菌絲分解利用菌種基質(zhì)的6種關(guān)鍵酶。結(jié)合栽培試驗(yàn)驗(yàn)證，證明秸稈作為制作羊肚菌栽培種的材料是可行的，并進(jìn)一步優(yōu)化出栽培種基質(zhì)配方為：主料為油菜秸稈與麥粒重量比3∶1，每100 g主料添加1.5 g石灰作為輔料。