運(yùn)動(dòng)處方對(duì)老年大鼠和老年肥胖大鼠Resistin和Visfatin mRNA表達(dá)及血漿濃度的影響

林偉其， 柏友萍， 孫 林

(安徽師范大學(xué) 體育學(xué)院，安徽 蕪湖 241003)

隨著第四次工業(yè)革命興起，人們的生活方式發(fā)生了根本性改變，現(xiàn)代社會(huì)老齡化狀態(tài)日益嚴(yán)重，老年肥胖人群的比例在不斷攀升。老年肥胖人群比一般老年人群更容易發(fā)生糖代謝紊亂、胰島素抵抗(Insulin resistance，IR)和血脂代謝異常等相關(guān)疾病，老齡化和老年肥胖已成為重要的公共衛(wèi)生問題[1]。近年大量研究證明脂肪組織可分泌多種脂肪因子，其中內(nèi)臟脂肪組織分泌的脂肪因子在老年和老年肥胖人群上述相關(guān)疾病中發(fā)揮重要的病理生理作用。Resistin[2]和Visfatin[3]是近年發(fā)現(xiàn)的脂肪因子，最初被認(rèn)為促進(jìn)肥胖和肥胖相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展，但隨著研究深入，很多研究發(fā)現(xiàn)Resistin和Visfatin存在有益影響，與促進(jìn)肥胖的觀點(diǎn)相悖[4,5]。運(yùn)動(dòng)對(duì)老年及老年肥胖人群Resistin和Visfatin的影響目前尚不清楚。因此，本研究通過建立老年大鼠及老年肥胖大鼠模型，探討運(yùn)動(dòng)處方在老年肥胖大鼠的減肥中對(duì)Resistin和Visfatin影響，為運(yùn)動(dòng)預(yù)防老年及老年肥胖相關(guān)疾病提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物與分組

清潔級(jí)3周齡雄性SD大鼠50只，普通飼料喂養(yǎng)至大鼠55周齡。大鼠在18℃-20℃，相對(duì)濕度50%-70%的環(huán)境下分籠飼養(yǎng)，自由飲食飲水。采用體重?zé)o差異原則(P>0.05)分為對(duì)照組與肥胖組，對(duì)照組12只喂普通飼料(脂肪含量比為6.0%)，肥胖組38只喂高脂飼料(脂肪含量比為40.0%)，喂養(yǎng)5周。建模成功標(biāo)準(zhǔn)為：老年大鼠的標(biāo)準(zhǔn)為鼠齡60周，老年肥胖大鼠的標(biāo)準(zhǔn)為肥胖大鼠體重>120%對(duì)照組平均體重[6]。建模成功后，選取11只老年大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(W)5只、運(yùn)動(dòng)組(WE)6只，隨機(jī)選取老年肥胖大鼠12只分為對(duì)照組(F)6只、運(yùn)動(dòng)組(FE)6只。在建模和干預(yù)中各死亡1只大鼠。本次實(shí)驗(yàn)大鼠購于上海斯萊克實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限責(zé)任公司(合格證號(hào)：2007000546402，許可證號(hào)：SCXK(滬)2012—0002)，獲得安徽師范大學(xué)動(dòng)物倫理學(xué)會(huì)同意(20150225)，符合中華人民共和國科學(xué)技術(shù)部頒發(fā)的《關(guān)于善待實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的指導(dǎo)性意見》要求。

1.2 試劑與儀器

Resistin和Visfatin ELISA試劑盒(美國TSZ公司生產(chǎn)，上海研域生物科技有限公司代理，上海)。M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(M1705，Promega)，Trizol(SN114，SunShineBioTM)，GoTaq qPCR Master Mix(A600，Promega)，Oligo dT15(SunShineBioTM)，Random prime(SunShineBioTM)，RNase Inhibitor(SunShineBioTM，R0004)，100bp DNA Ladder(SN124，SunShineBioTM)。

大鼠跑臺(tái)(Wi32812，北京)，電子秤(JM-A20001，中國)，電子分析天平(BS223S，北京)，冷凍高速離心機(jī)(Centrifuge5417，Eppendorf)，qRT-PCR儀(line-gene KFQD-48A，博日)，酶標(biāo)儀(Tecan Sunrise，瑞士)，洗板機(jī)(Tecan Columbus Washer，瑞士)。

1.3 運(yùn)動(dòng)處方

此次實(shí)驗(yàn)的運(yùn)動(dòng)處方在本實(shí)驗(yàn)室前期的運(yùn)動(dòng)方案基礎(chǔ)上進(jìn)行改良[7]。干預(yù)前，大鼠適應(yīng)跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練5天，每天3-5次。運(yùn)動(dòng)處方為跑臺(tái)的坡度為0°，速度為15m/min，15min/組，4組/次，組間休息5min，總運(yùn)動(dòng)時(shí)間60min，1次/天，5次/周，持續(xù)運(yùn)動(dòng)8周。

1.4 樣本采集

干預(yù)8周后，安靜籠養(yǎng)2天，禁食12h，禁水6h，測(cè)大鼠體重。用10%的水合氯醛溶液(3.0mg/kg)經(jīng)腹腔注射麻醉，麻醉成功后剖腹，取腹主動(dòng)脈血，分離血漿，用ELISA測(cè)定血漿Resistin和Visfatin濃度。取睪周及腎周的內(nèi)臟脂肪組織，先用濾紙吸干表面組織液，然后稱其脂肪重量，取含血管少的一部分脂肪立即置于Trizol中，用qRT-PCR技術(shù)測(cè)Resistin和Visfatin的mRNA表達(dá)。

1.5 熒光定量PCR檢測(cè)Resistin和Visfatin的mRNA表達(dá)及Visfatin Tm值

根據(jù)GenBank公布的SD大鼠Resistin和Visfatin基因和β-actin基因序列設(shè)計(jì)相應(yīng)的引物，委托上海生工技術(shù)有限公司合成。

表1 Resistin and Visfatin的引物序列設(shè)計(jì)

用Trizol提取總RNA，以總RNA為模板逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA。PCR擴(kuò)增:在95℃反應(yīng)條件下預(yù)變性2min，95℃變性10s→60℃退火60s→60℃延伸60s，40次循環(huán);熔解曲線:60℃→95℃，每5s升溫0.3℃，Resistin Tm值為87℃，Visf-atin Tm值為82℃。臺(tái)階檢測(cè)，數(shù)據(jù)閾值與Ct值由軟件自動(dòng)得出。采用2-△Ct法來進(jìn)行相對(duì)定量，△Ct=Ct(目的基因)-Ct(β-actin)。得出的Resistin和Visfatin數(shù)值均擴(kuò)大1000倍。

1.6 ELISA檢測(cè)Resistin和Visfatin的血漿濃度

血漿Resistin和Visfatin采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)試，所有操作均按照試劑盒使用說明書嚴(yán)格執(zhí)行。血漿Resistin和Visfatin濃度值均以標(biāo)準(zhǔn)品濃度作橫坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)OD值作縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)品的線性回歸方程。Resistin濃度的回歸方程為y=0.087x+0.052，r=0.997，Visfatin濃度的回歸方程為y=0.002x+0.008，r=0.998。代入Excel中得出數(shù)值乘以5即為樣本實(shí)際濃度。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行整理分析，正態(tài)分布數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(M±SD)表示，組間差異比較均以單因素方差分析(one-way ANOVA)的LSD進(jìn)行。P>0.05表示無顯著性差異，P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示有非常顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 運(yùn)動(dòng)后大鼠體重、內(nèi)臟脂肪量及內(nèi)臟脂肪率的比較

由表2知，(1)大鼠體重的表現(xiàn)為WE低于W，無顯著性差異(P>0.05)。FE明顯低于F，有非常顯著性差異(P<0.01)。(2)大鼠內(nèi)臟脂肪量的表現(xiàn)為F明顯高于W，有非常顯著性差異(P<0.01)，WE低于W，有顯著性差異(P<0.05)，F(xiàn)E明顯低于F，有非常顯著性差異(P<0.01)。(3)大鼠內(nèi)臟脂肪率的表現(xiàn)為F高于W，無顯著性差異(P>0.05)，WE明顯低于W，有非常顯著性差異(P<0.01)，F(xiàn)E明顯低于F，有非常顯著性差異(P<0.01)。

表2 各組大鼠的體重、內(nèi)臟脂肪量和內(nèi)臟脂肪率的比較(X±SD)

注：elderly rats(W：control group，WE：exercise group)；elderly obese rats(F：control group，F(xiàn)E：exercise group)；內(nèi)臟脂肪率=內(nèi)臟脂肪量/體重×100%。與W組比較：△為P<0.05，△△為P<0.01；與F組比，▲為P<0.05，▲▲為P<0.01。

2.2 運(yùn)動(dòng)后大鼠Resistin的變化

2.2.1 運(yùn)動(dòng)后大鼠內(nèi)臟脂肪Resistin mRNA比較 由表3可知，運(yùn)動(dòng)后大鼠內(nèi)臟脂肪組織Resistin的mRNA表現(xiàn)為F高于W，無顯著性差異(P>0.05)，WE高于W，有顯著性差異(P<0.05)，F(xiàn)E高于F，無顯著性差異(P>0.05)。

2.2.2 運(yùn)動(dòng)后大鼠血漿Resistin濃度比較 由表4可知，運(yùn)動(dòng)后大鼠血漿Resistin濃度的表現(xiàn)為F低于W，無顯著性差異(P>0.05)，WE低于W，無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)E低于F，無顯著性差異(P>0.05)。

表3 運(yùn)動(dòng)后各組大鼠Resistin的mRNA比較(X±SD)

Table 3 Comparison of resistin mRNA in rats after exercise

組別NResistin mRNA95%CIW523.286±10.16810.661-35.912WE650.491±23.242△26.100-74.881F523.897±6.63615.657-32.137FE639.881±18.59220.370-59.393

表4 干預(yù)后大鼠Resistin血漿濃度的比較(X±SD)(單位：pg/ml)

Table 4 Comparison of plasma concentrations of resistin in rats after intervention

組別NResistin95%CIW54.644±0.7793.676-5.611WE62.845±1.0211.774-3.916F54.299±1.9261.908-6.690FE63.669±2.2371.321-6.016

2.3 運(yùn)動(dòng)后大鼠Visfatin的變化

2.3.1 運(yùn)動(dòng)后大鼠內(nèi)臟脂肪Visfatin mRNA比較 由表5可知，運(yùn)動(dòng)后大鼠內(nèi)臟脂肪組織Visfatin mRNA的表現(xiàn)為F高于W，無顯著性差異(P>0.05)，WE高于W，無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)E高于F，無顯著性差異(P>0.05)。

2.3.2 運(yùn)動(dòng)后大鼠血漿Visfatin濃度比較 由表6可知，運(yùn)動(dòng)后大鼠血漿Visfatin濃度的表現(xiàn)為F低于W，無顯著性差異(P>0.05)，WE高于W，無顯著性差異(P>0.05)，F(xiàn)E高于F，無顯著性差異(P>0.05)。

表5 運(yùn)動(dòng)后各組大鼠Visfatin的mRNA比較(X±SD)

表6 運(yùn)動(dòng)后大鼠Visfatin血漿濃度的比較(X±SD)(單位：pg/ml)

Table 6 Comparison of plasma concentrations of visfatin in rats after exercise

組別NVisfatin95%CIW5288.000±103.220159.835-416.165WE6311.667±91.483215.661-407.672F5246.000±57.353174.787-317.213FE6283.750±42.004239.669-327.831

3 討論

3.1 運(yùn)動(dòng)對(duì)老年大鼠和老年肥胖大鼠減肥效果的影響

Matsuzawa[8]等人研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)臟脂肪組織在IR和心血管疾病的病理生理學(xué)中的重要性高于皮下脂肪。Preis[9]等人研究發(fā)現(xiàn)，內(nèi)臟脂肪與BMI之間相互作用，內(nèi)臟脂肪與IR的相關(guān)性高于皮下脂肪，且肥胖患者的內(nèi)臟脂肪與IR關(guān)系更密切。Fernández[10]等人研究表明，超重和肥胖會(huì)增加個(gè)體IR的風(fēng)險(xiǎn)，內(nèi)臟脂肪的增加會(huì)導(dǎo)致慢性炎癥增加，從而加重IR，隨著內(nèi)臟脂肪的增加，疾病易感性上升。有一項(xiàng)研究報(bào)告指出了內(nèi)臟肥胖與年齡、空腹血糖水平、血脂、血壓和性別之間存在相關(guān)性，其中年齡的增加與內(nèi)臟脂肪增量密切相關(guān)[11]。衰老和肥胖是大多數(shù)心血管疾病的危險(xiǎn)因素，會(huì)增加個(gè)體患2型糖尿病、脂肪肝、血脂異常、高血壓等疾病的風(fēng)險(xiǎn)[12]，伴隨老年肥胖人群成為了上述疾病的易感群體，有的老年肥胖患者可能同時(shí)患有上述幾種疾病。運(yùn)動(dòng)作為一種科學(xué)有效的減肥方法，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于肥胖患者的治療處方中。Keating[13]等人的研究表明，不同運(yùn)動(dòng)量和運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度都能有效降低內(nèi)臟脂肪，雖然有些運(yùn)動(dòng)方式對(duì)體重影響不明顯，但是內(nèi)臟脂肪都會(huì)隨著運(yùn)動(dòng)時(shí)間的延續(xù)而明顯下降。本實(shí)驗(yàn)室前期研究證實(shí)，運(yùn)動(dòng)處方能顯著降低超重肥胖男女大學(xué)生BMI、體脂及腰臀比，改善身體形態(tài)[14]，8周運(yùn)動(dòng)可以導(dǎo)致大鼠的內(nèi)臟脂肪量顯著下降[7]。本研究發(fā)現(xiàn)，高脂飲食誘導(dǎo)的老年肥胖大鼠體重、內(nèi)臟脂肪明顯增多，在接受運(yùn)動(dòng)處方干預(yù)后，老年肥胖大鼠的體重和內(nèi)臟脂肪量均下降明顯，且運(yùn)動(dòng)后的內(nèi)臟脂肪量與對(duì)照組老年大鼠相似，而老年大鼠減重效果不明顯，但內(nèi)臟脂肪量顯著下降，可能是老年大鼠本身不肥胖，運(yùn)動(dòng)僅僅減去了老年大鼠的內(nèi)臟脂肪。運(yùn)動(dòng)對(duì)老年肥胖大鼠的體重減輕和內(nèi)臟脂肪的消除有很好的影響，對(duì)老年大鼠內(nèi)臟脂肪的消除也有很好的影響，說明運(yùn)動(dòng)對(duì)老年和老年肥胖人群的健康十分有益。

3.2 運(yùn)動(dòng)對(duì)老年大鼠和老年肥胖大鼠Resistin的影響

Resistin在2001年由Steppan[2]等人首次描述，它首先在脂肪組織中被發(fā)現(xiàn)，因?yàn)槠渲苯訁⑴cIR作用而命名。隨后Moon[15]等人重組了老鼠Resistin，發(fā)現(xiàn)飲食誘導(dǎo)的小鼠和基因肥胖小鼠會(huì)糖耐量受損，阻斷Resistin會(huì)改善肥胖小鼠的血糖濃度和葡萄糖耐受量，證實(shí)了Resistin過量表達(dá)會(huì)增加肥胖和IR的患病風(fēng)險(xiǎn)。Shuldiner[16]等人研究認(rèn)為Resistin對(duì)胰島素敏感性和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)影響較大，是肥胖導(dǎo)致IR的直接原因。但隨著研究的深入，人們對(duì)Resistin與IR的關(guān)系產(chǎn)生質(zhì)疑。本實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)，8周運(yùn)動(dòng)處方減肥效果明顯，但Resistin水平變化不明顯，Resistin與女大學(xué)生的體重、體脂和BMI無相關(guān)性，與男女大學(xué)生的血糖也無相關(guān)性[17]。Koebnick[4]對(duì)肥胖受試者進(jìn)行4個(gè)月的減肥干預(yù)后，發(fā)現(xiàn)人的Resistin是不可缺少的，Resistin參與調(diào)節(jié)胰島素敏感性，是脂代謝的調(diào)節(jié)因子，維持脂肪組織的儲(chǔ)存，誘導(dǎo)脂肪酸再酯化，隨著受試者的體重與肥胖指標(biāo)得到改善，血漿Resistin濃度上升。De Luis[18]等人通過對(duì)重度肥胖患者減肥手術(shù)后隨訪一年發(fā)現(xiàn)，患者的體重、腰圍、體脂率、血壓、總膽固醇均明顯下降，但甾醇、低密度脂蛋白、膽固醇、甘油三酯水平無明顯變化，且Resistin水平在術(shù)后小幅度上升。Olszanecka[19]等人對(duì)比了19名肥胖受試者與22名正常受試者后發(fā)現(xiàn)，Resistin在肥胖和正常受試者中沒有相關(guān)性，提示Resistin與肥胖沒有直接關(guān)系。Baris[20]等對(duì)3000多老年人進(jìn)行10個(gè)月的調(diào)查，發(fā)現(xiàn)Resistin與代謝炎癥標(biāo)志物C反應(yīng)蛋白(C-Reactive protein，CRP)、腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor，TNF-α)和IL-6關(guān)系不大，提示Resistin與炎癥也沒有直接關(guān)系。Hayashino[21]等人研究發(fā)現(xiàn)，運(yùn)動(dòng)使2型糖尿病(Type 2 diabetes，T2D)患者的IL-6和CRP降低，且隨著運(yùn)動(dòng)持續(xù)時(shí)間延長，IL-6和CRP水平下降更明顯，但Resistin、瘦素等脂肪因子的水平?jīng)]有發(fā)生變化。本研究顯示，老年大鼠與老年肥胖大鼠Resistin的mRNA表達(dá)和血漿濃度沒有差異，提示Resistin作為一個(gè)脂肪因子可能并不參與老年肥胖進(jìn)程，Resistin的生理功能有待進(jìn)一步研究。運(yùn)動(dòng)處方能明顯升高老年大鼠Resistin的mRNA表達(dá)，對(duì)老年大鼠及老年肥胖大鼠血漿濃度影響不明顯，運(yùn)動(dòng)對(duì)Resistin的影響結(jié)果存在不一致性，具體原因有待進(jìn)一步研究。

3.3 運(yùn)動(dòng)對(duì)老年大鼠和老年肥胖大鼠Visfatin的影響

Visfatin是一種脂肪細(xì)胞因子，在脂肪細(xì)胞和免疫細(xì)胞中表達(dá)。先前的一些研究認(rèn)為Visfatin與肥胖關(guān)系密切，血漿Visfatin在肥胖和T2D患者中表達(dá)增加，被認(rèn)為是有害的，但是具體的生理作用機(jī)制還不完全清楚[3]。盡管大多數(shù)實(shí)驗(yàn)研究都指向Visfatin的有害作用，但近年來，有些研究表明Visfatin可能是正常生理活動(dòng)中必不可少的蛋白。Kim[5]等人切除糖尿病大鼠部分胰腺后，血漿Visfatin沒有發(fā)生變化，而中樞Visfatin增多改善了糖尿病大鼠下丘腦的胰島素分泌和胰島素敏感性，維持血糖穩(wěn)態(tài)，證實(shí)中樞Visfatin是一種調(diào)節(jié)血糖穩(wěn)態(tài)的正向調(diào)節(jié)劑。Hallschmid[22]等人對(duì)38名受試者進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)腦脊液中存在Visfatin，且腦脊液的Visfatin水平隨著體重增加而降低。Ingelsson[23]等人調(diào)查了374名社區(qū)居民，發(fā)現(xiàn)Visfatin水平與年齡和甘油三酯水平無關(guān)，與臨床用于檢測(cè)內(nèi)臟脂肪的指標(biāo)也沒有顯著相關(guān)性，同時(shí)與血脂異常、肥胖以及糖尿病也無明顯關(guān)系。Ersoy[24]等人研究發(fā)現(xiàn)女性的Visfatin與脂肪分布沒有關(guān)系，Visfatin與肥胖參數(shù)BMI、腰臀比和IR沒有相關(guān)性，與血脂參數(shù)之間也沒有相關(guān)性。Dimitriadis[25]等人重組了小鼠的Visfatin后發(fā)現(xiàn)，Visfatin增加了分化的T37i細(xì)胞的表達(dá)，上調(diào)末端結(jié)合蛋白1，末端結(jié)合蛋白2和骨形態(tài)發(fā)生蛋白7，通過激活I(lǐng)L-6/STAT3通路阻止巨噬細(xì)胞的凋亡。Lim[26]等人通過誘導(dǎo)小鼠心肌缺血，再給該小鼠心肌注射Visfatin發(fā)現(xiàn)能明顯減少心肌梗死面積，可能機(jī)制為Visfatin在心肌再灌注時(shí)是通過激活PI3K/Akt和MEK1/2和抑制MPTP開放而介導(dǎo)的直接細(xì)胞效應(yīng)來保護(hù)心肌的。Veer[27,28]等人發(fā)現(xiàn)Visfatin是一種調(diào)節(jié)輔酶I生物合成、輔酶I依賴性蛋白去乙酰化、血管平滑肌細(xì)胞生存能力的細(xì)胞內(nèi)蛋白，能夠防止小鼠神經(jīng)元突變，Visfatin的增多能夠促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的存活，激活SIRT2；他的另一項(xiàng)研究將Visfatin基因?qū)胨ダ系娜似交〖?xì)胞內(nèi)，發(fā)現(xiàn)Visfatin可以延緩衰老，延長細(xì)胞壽命，增加細(xì)胞抵抗氧化應(yīng)激的能力，Visfatin通過降低p53在SIRT1的靶標(biāo)賴氨酸382上乙酰化的比例，抑制了細(xì)胞衰老，說明Visfatin可通過優(yōu)化SIRT1介導(dǎo)的p53降解來增加人血管平滑肌細(xì)胞的壽命。Plinta[29]等人對(duì)50名青年職業(yè)籃球和手球運(yùn)動(dòng)員在集訓(xùn)期的研究發(fā)現(xiàn)，3個(gè)月的密集速度訓(xùn)練會(huì)使Visfatin水平上升。本研究顯示，老年大鼠與老年肥胖大鼠Visfatin mRNA表達(dá)和血漿Visfatin濃度差異不明顯，沒有發(fā)現(xiàn)Visfatin可以促進(jìn)肥胖；本運(yùn)動(dòng)處方對(duì)老年大鼠與老年肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織Visfatin mRNA表達(dá)和血漿Visfatin濃度影響甚微，可能是由于Visfatin在老年大鼠和老年肥胖內(nèi)臟脂肪組織和血漿中含量過低導(dǎo)致的，具體原因有待進(jìn)一步研究。

綜上所述，本運(yùn)動(dòng)處方能夠降低老年大鼠和老年肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪量以及內(nèi)臟脂肪率，具有顯著減肥效果。老年大鼠和老年肥胖大鼠的Resistin和Visfatin mRNA表達(dá)及血漿Resistin和Visfatin濃度差異不明顯，Resistin和Visfatin對(duì)老年肥胖的發(fā)生發(fā)展影響較小，運(yùn)動(dòng)僅對(duì)老年大鼠內(nèi)臟脂肪組織Resistin mRNA表達(dá)有影響。運(yùn)動(dòng)對(duì)老年肥胖大鼠內(nèi)臟脂肪組織Resistin和Visfatin mRNA表達(dá)及血漿濃度影響甚微，可能是Resistin和Visfatin本身在老年肥胖大鼠中含量較少，Resistin和Visfatin在老年肥胖的發(fā)生發(fā)展中影響較小導(dǎo)致的，具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。