不同免疫程序下鴿新城疫抗體水平測定與分析

江 斌 林 琳 吳勝會 張世忠 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013

鴿新城疫又稱鴿瘟或鴿Ⅰ型副黏病毒病，是由禽Ⅰ型副黏病毒引起的、流行于鴿群中的一種急性和高度接觸性傳染病。因其病原、癥狀、病變均與雞新城疫相似，所以通常稱之為鴿新城疫[1]。該病傳播迅速、發(fā)病率高、病死率高，是目前危害鴿業(yè)發(fā)展的頭號傳染病，在多數(shù)鴿（肉鴿和信鴿）場中都不同程度地存在。在臨床上，有些急性病例會導(dǎo)致鴿群大量死亡，特別是幼鴿的病死率更高；有些病例是散發(fā)，病程較長，會導(dǎo)致部分患鴿零星死亡[2]。為了探索鴿場良好的免疫程序，對兩批鴿采用不同的新城疫免疫程序，免疫后定期抽血監(jiān)測新城疫抗體，以期為鴿場制定免疫程序提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試劑 阿氏液、1%雞紅細胞、磷酸鹽緩沖液，按有關(guān)方法自行配制，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 抗原與標準血清 雞新城疫抗原、雞新城疫陽性血清和陰性血清等由中國獸藥監(jiān)察所提供。

1.1.3 設(shè)備 96孔V型微量板、微量移液器（配滴頭）、微型震蕩器、溫箱等。

1.1.4 疫苗 雞新城疫活疫苗（L系）由山東齊魯動物保健品有限公司提供；雞新城疫、傳染性支氣管炎、H9亞型禽流感三聯(lián)滅活疫苗（簡稱新支流三聯(lián)滅活疫苗），由普萊柯生物工程股份有限公司提供。1.1.5 試驗鴿 在福州效區(qū)某肉鴿場選100羽20日齡幼鴿，分二組進行免疫和抗體跟蹤監(jiān)測。

1.2 方法

1.2.1 疫苗免疫 試驗Ⅰ組：20日齡乳鴿50羽首免雞新城疫活疫苗（L系），劑量為2羽份，采用生理鹽水稀釋后滴鼻免疫；40日齡時再次采用雞新城疫活疫苗（L系）二免，劑量為3羽份，采用飲水免疫（控制2 h內(nèi)飲完）。試驗Ⅱ組：20日齡乳鴿50羽首免雞新城疫活疫苗（L系），劑量為2羽份，采用滴鼻免疫；40日齡時再次采用雞新支流三聯(lián)滅活疫苗肌內(nèi)注射免疫，劑量為每羽0.3mL。

1.2.2 采血化驗 兩組試驗鴿于二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分別進行靜脈采血，每組抽取10羽，每羽采血1mL進行抗體測定。

1.2.3 測定方法 按照《GB16550-1996新城疫檢測技術(shù)規(guī)范》進行新城疫抗體測定，HI抗體滴度以log2表示[3]。

1.2.4 判定標準 HI抗體滴度≥4 log2判定為免疫合格[3]。

1.2.5 生物統(tǒng)計 利用Excel進行數(shù)據(jù)差異性統(tǒng)計分析。

2 結(jié) 果

兩組鴿新城疫抗體監(jiān)測結(jié)果見表1。Ⅰ組在二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分別抽血10份進行新城疫HI抗體滴度測定，結(jié)果相應(yīng)的HI抗體滴度平均值為4.8log2、5.1log2、4.2log2、3.5log2和2.7log2，其中抗體合格率分別為60%、70%、30%、10%和0%。Ⅱ組在二免后第10 d、40 d、70 d、100 d和130 d分別抽血10份進行新城疫HI抗體滴度測定，結(jié)果相應(yīng)的HI抗體滴度平均值為4.9log2、6.7log2、6.2log2、5.6log2和4.8log2，其中抗體合格率分別為70%、100%、100%、100%和90%。相比之下，二免后第10 d時兩組之間HI抗體滴度均值差異不顯著（P＞0.05），而在其它各時間點兩組HI抗體滴度均值差異均非常顯著（P＜0.01）。

從圖1看出，Ⅰ組二免70多天后HI抗體滴度逐漸下降到免疫合格線（4log2）以下，免疫抗體保護期約70 d；Ⅱ組二免130 d后，HI抗體滴度平均值為4.8log2，說明免疫抗體保護期可達4個多月。

表1 兩組鴿新城疫抗體監(jiān)測情況表

3 小結(jié)與討論

1）通過兩組不同免疫程序下鴿新城疫的免疫抗體跟蹤監(jiān)測，可以看出Ⅱ組的HI抗體滴度要顯著高于Ⅰ組，且抗體保護期可達4個多月。建議肉種鴿和信鴿場要采用活疫苗與滅活疫苗相結(jié)合的免疫程序。新城疫的病原是Ⅰ型副黏病毒，與雞城疫病毒都屬一個血清型，但由于宿主不同，毒株之間的毒力和生物學(xué)特性差別仍較大[4]。鴿新城疫病毒與雞新城疫病毒在攻毒中存在交叉保護現(xiàn)象，所以，現(xiàn)在生產(chǎn)實踐中都用雞新城疫疫苗免疫來預(yù)防鴿新城疫，但一些學(xué)者認為使用雞新城疫疫苗的免疫效果比用專門的鴿新城疫疫苗效果差，保護不完全[4]。影響新城疫抗體水平高低的因素有多方面，除了與免疫程序有關(guān)外，還與所使用疫苗種類、疫苗質(zhì)量、鴿群健康狀況、鴿場飼養(yǎng)管理水平等均有關(guān)。

圖1 兩組鴿新城疫抗體消長曲線圖

2）新城疫疫苗種類有很多，大體可分活疫苗和滅活疫苗兩大類。常見的活疫苗有雞新城疫L系，新支120、N79株、克隆30等；常見的滅活疫苗有雞新城疫滅活疫苗、鴿瘟滅活疫苗、新支二聯(lián)滅活疫苗、新流二聯(lián)滅活疫苗、新支流三聯(lián)滅活疫苗、新支減三聯(lián)滅活疫苗、新支流法四聯(lián)滅活疫苗、新支減流四聯(lián)滅活疫苗等，不同的疫苗所產(chǎn)生的免疫效果有所不同，不同廠家的疫苗以及不同佐劑疫苗，其免疫效果也不盡相同，各個鴿場要因地制宜地選用相應(yīng)的疫苗進行防疫。鴿群的健康水平對新城疫疫苗的應(yīng)答反應(yīng)也不一樣，健康的鴿群一般會產(chǎn)生良好的免疫效果，老弱病殘的鴿對疫苗免疫應(yīng)答效果差。在生產(chǎn)實踐中，時常見到鴿場新城疫免疫失敗。究其原因，除了疫苗品種和質(zhì)量外，還與疫苗保存、疫苗使用劑量不當、免疫程序不合理、消毒隔離措施不力、鴿群不健康等都有關(guān)[5-6]。

此外，在日常工作中要加強飼養(yǎng)管理，做好消毒和隔離措施，每間隔2個月要對鴿群每個階段按比例抽血進行新城疫抗體監(jiān)測，要求群體的新城疫抗體滴度都要≥4log2，有的學(xué)者建議群體的新城疫抗體滴度要達5log2以上才能確保鴿群的健康。