幾種不同檢驗(yàn)方法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)臨床對(duì)比分析

任雅瓊

【摘 要】：目的：討論并分析三種不同檢驗(yàn)方法（細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法和革蘭染色法）檢驗(yàn)陰道細(xì)菌的臨床效果差異。方法：研究對(duì)象為在我院檢驗(yàn)科進(jìn)行陰道檢查的94例患者，對(duì)其陰道分泌物進(jìn)行采集后分別采用上述三種檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢查，并對(duì)比分析三種方法的陰道細(xì)菌檢出率。結(jié)果：細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法和革蘭染色法對(duì)患者陰道細(xì)菌的檢出率分別為80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法的檢出率均顯著高于革蘭染色法（P<0.05），同時(shí)PCR檢驗(yàn)法與細(xì)菌培養(yǎng)法（金標(biāo)準(zhǔn)）的檢出率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)論：PCR檢驗(yàn)法對(duì)陰道細(xì)菌的檢出效能與金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌培養(yǎng)法無(wú)顯著差異，均高于革蘭染色法;同時(shí)PCR檢驗(yàn)法比細(xì)菌培養(yǎng)法操作簡(jiǎn)單，獲得結(jié)果快速;故而值得被廣泛應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】：檢驗(yàn)方法;陰道細(xì)菌;檢出率

陰道炎是一組因陰道和菌群之間平衡失調(diào)導(dǎo)致的外陰瘙癢、刺激、灼痛以及異常流液的病癥，其常見種類包括細(xì)菌性陰道病、念珠菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎等[1]。該病在婦女中十分常見，若其未得到及時(shí)診斷和治療，容易引起急慢性盆腔炎甚至導(dǎo)致異位妊娠或者不孕[2]。臨床上對(duì)于該病的診斷，主要是進(jìn)行陰道細(xì)菌的檢查，常見方法包括細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法和革蘭染色法三種，其各有優(yōu)缺點(diǎn)[3]。本文欲探究這幾種方法的具體診斷效益，具體研究流程如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇在我院檢驗(yàn)科接受檢查的94例陰道炎患者作為研究對(duì)象，其年齡范圍為23-47歲，平均年齡為（38.45±6.21）歲，其均存在陰道瘙癢、大量白帶分泌物等癥狀。

1.2 研究方法

囑患者呈截石位，將陰道鏡置入患者宮頸內(nèi)，采用無(wú)菌棉拭子在其陰道后穹窿處蘸取陰道內(nèi)的分泌物，然后將帶有分泌物的棉拭子放入生理鹽水試管中。

（1）細(xì)菌培養(yǎng)法：在無(wú)菌條件下將試管內(nèi)的陰道分泌物以無(wú)菌接種環(huán)接種至用于細(xì)菌分離的培養(yǎng)基（生產(chǎn)公司：上?？婆d生物科技有限公司）上，然后將其放至35℃的二氧化碳培養(yǎng)箱中，48h后選取培養(yǎng)基中呈光滑、半透明水滴狀的菌落進(jìn)行生化檢驗(yàn)。

（2）PCR檢驗(yàn)法：在生理鹽水中加入500?L的陰道分泌物，在12000r/min的離心機(jī)內(nèi)離心10min，將上清液去除并加入堿性裂解液，在98℃環(huán)境中進(jìn)行10min的加熱，然后同樣轉(zhuǎn)速離心5min，取上清液進(jìn)行DNA模板制作。需要制作含有陰道分泌物DNA模板的陽(yáng)性組和沒有DNA模板的陰性組進(jìn)行對(duì)比。進(jìn)行PCR產(chǎn)物及擴(kuò)增檢查時(shí)，需取25?L總體積的模板、無(wú)菌離子水、緩沖液以及引物，并將30?L的無(wú)菌石蠟油蓋在上面，然后進(jìn)行PCR循環(huán)，循環(huán)參數(shù)為1min的58℃、1min的72℃、1min的94℃和5min的95℃，32個(gè)循環(huán)后再72℃環(huán)境中延伸5min[4]。

（3）革蘭染色法：將無(wú)破損清潔玻片放入95%乙醇中進(jìn)行浸泡，一段時(shí)間后取出并擦拭晾干，在玻片中央涂布無(wú)菌生理鹽水中的陰道分泌物，然后將其在顯微鏡（品牌：奧林巴斯;型號(hào)：BX46）下進(jìn)行細(xì)菌檢查。

1.3 判斷指標(biāo)

對(duì)陰道分泌物中的細(xì)菌種類、數(shù)量進(jìn)行觀察統(tǒng)計(jì)，用檢出率來(lái)對(duì)比分析三種方法的檢驗(yàn)效果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS25.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，采用χ2檢驗(yàn)對(duì)比分析三種檢驗(yàn)方法的檢出率差異，當(dāng)P<0.05時(shí)表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法和革蘭染色法對(duì)患者陰道細(xì)菌的檢出率分別為80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法的檢出率均顯著高于革蘭染色法（P<0.05），同時(shí)PCR檢驗(yàn)法與細(xì)菌培養(yǎng)法（金標(biāo)準(zhǔn)）的檢出率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見表1：

3 討論

陰道炎患者主要是因陰道內(nèi)乳酸桿菌減少引起，故而會(huì)出現(xiàn)其他病原菌含量的上升。陰道細(xì)菌檢驗(yàn)是對(duì)陰道炎進(jìn)行診斷的主要手段，常見的檢查方法包括革蘭染色法、細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法。其中革蘭染色法操作簡(jiǎn)便，但假陰性結(jié)果高，容易出現(xiàn)漏診，耽誤患者疾病的診斷和治療;細(xì)菌培養(yǎng)法是金標(biāo)準(zhǔn)，但其檢驗(yàn)過(guò)程復(fù)雜且耗時(shí)，無(wú)法及時(shí)出結(jié)果;PCR檢驗(yàn)法敏感性高，操作流程較簡(jiǎn)單，同時(shí)出結(jié)果迅速。本研究對(duì)此三種方法的檢驗(yàn)效果進(jìn)行了對(duì)比分析，其結(jié)果為： 細(xì)菌培養(yǎng)法、PCR檢驗(yàn)法和革蘭染色法對(duì)患者陰道細(xì)菌的檢出率分別為80.85%（76/94）、78.72%（74/94）、45.74%（43/94），細(xì)菌培養(yǎng)法和PCR檢驗(yàn)法的檢出率均顯著高于革蘭染色法（P<0.05），同時(shí)PCR檢驗(yàn)法與細(xì)菌培養(yǎng)法（金標(biāo)準(zhǔn)）的檢出率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。該結(jié)果表明，PCR檢驗(yàn)法對(duì)陰道細(xì)菌的檢出效能與金標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌培養(yǎng)法無(wú)顯著差異，均高于革蘭染色法;同時(shí)PCR檢驗(yàn)法比細(xì)菌培養(yǎng)法操作簡(jiǎn)單，獲得結(jié)果快速;故而值得被廣泛應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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