莊伯伯緩釋肥對蘆筍生長的影響

王華英 施建軍 李水鳳 許楚楚 熊輝 章忠梅 張旭娟

摘要：為探究莊伯伯緩釋肥在蘆筍上的使用效果，本研究采用大區(qū)試驗的方法，設(shè)置用1次、2次及不施用作對照，單次使用量20 kg/667m2，測定了蘆筍的產(chǎn)量及產(chǎn)值，莖枯病的發(fā)生。結(jié)果表明：使用莊伯伯后產(chǎn)量、產(chǎn)值、凈收益均是A2>A1>CK;蘆筍莖枯病發(fā)病率和病指均是A2處理1>處理3>CK;凈增產(chǎn)值處理2>CK >處理1>處理3;蘆筍莖枯病株發(fā)病率和病指處理1<處理1處理3>處理2>CK，可溶性糖的含量處理1>處理2>處理3>CK;蘆筍中硝態(tài)氮的含量CK>處理1>處理2>處理3。

關(guān)鍵詞：莊伯伯;蘆筍;效果

中圖分類號：S6446

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：1008-0457（2019）06-0084-05國際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2019.06.015

Effects of Zhuang Bobo Slow Release Fertilizer on the Growth of Asparagus

WANG Hua-ying1，SHI Jian-jun2，LI Shui-feng1，XU Chu-chu1，XIONG Hui2，ZHANG Zhong-mei3，ZHANG Xu-juan2

（1Xiaoshan Agricultural Technology Extension Center，Hangzhou，Zhejiang 311203，China;2Hangzhou Jiahui Agricultural Development Co，Ltd，Hangzhou，Zhejiang 311228，China;3Fuyang Agricultural Technology Extension Center，Hangzhou，Zhejiang 311400，China）

Abstract：To explore the effect of Zhuang Bobo slow-release fertilizer on asparagus，this study used the method of large-scale experiment by the application of one or two times fertilizer （20kg/667 m2 per time）and tested the yield，out value and the occurrence of stem blight of asparagus The results showed that the yield，output value and net income of Zhuang Bobo were A2 > A1 > CK; the incidence and pathological index of asparagus stem blight were A2 < A1 < CK These results showed that it was better to apply Zhuang Bobo slow-release fertilizer in two times In order to study the optimum dosage of asparagus for Zhuang Bobo，this experiment used the method of community test to evaluate the effect of different dosages （15kg，20kg，25kg and 30kg per 667m2）on the yield，output value of asparagus，nutritional value and the occurrence of stem blight of asparagus The results showed that the yield and output value of asparagus with Zhuang Bobo were treatment 2 （25kg per 667m2）> treatment 1 （20kg per 667m2）> treatment 3 （30kg per 667m2）> CK （15kg per 667m2）; net production value of asparagus with Zhuang Bobo were treatment 2 > CK > treatment 1 > treatment 3; asparagus stem blight strain incidence and disease index were treatment 1 < treatment 1 < CK < treatment 3 From the perspective of the increase in output value and the occurrence of stem blight，the application of treatment 2 （25kg per 667m2）was the best choice for the production of asparagus The application of Zhuang Bobo could increase the calcium （treatment 1 > treatment 3 > treatment 2 > CK）and soluble sugar （treatment 1 > treatment 2 > treatment 3 > CK）in asparagus prodcuts，reduce the content of nitrate nitrogen （CK > treatment 1 > treatment 2 > treatment 3）in asparagus，and improve the quality of asparagus

1材料與方法

11試驗材料

白及（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.）成熟蒴果。

12試驗方法

121白及種子貯藏方法的研究

本試驗處理為兩因素三水平：貯藏溫度（常溫、4? ℃、-20? ℃）與蒴果含水量（新鮮蒴果、含水率下降至30%、含水率下降至5%）。3次重復(fù)，設(shè)計處理表1所示。含水率是指種子所含水分的質(zhì)量與種子質(zhì)量的百分比，其計算方法為種子含水量=（種子鮮重-干燥后種子質(zhì)量）/種子鮮重×100%。

種子干燥方法：將白及蒴果放在有吸水硅膠的干燥器中密封，進(jìn)行干燥。

定時對貯藏蒴果進(jìn)行種子活力、種子萌發(fā)率檢測，利用Nikon SMZ 800顯微鏡鏡檢，每個處理觀察3個視野，篩選適宜貯藏組合。

種子含水率：取0.5 g（精確到1/10000）種子，放入干燥后的鋁盒，105?? ℃下烘干至恒重（3 h以上），測定種子含水率：含水率=（鮮重-干重）/鮮重×100%。

種子活力：種子活力檢測條件：0.5 g/L TTC溶液，溫度（40±1）? ℃，時間24 h，胚染成有光澤的鮮紅色，為有生活力的種子;凡是完全不染色或染成無光澤的淡紅色或灰白色，為敗育或無活力種子。種子活力=視野內(nèi)染色種子數(shù)/視野內(nèi)總的種子數(shù)×100%。

白及種子萌發(fā)的鑒別：胚的長度≥1/2類原球莖長度即為萌發(fā)。

萌發(fā)率=視野內(nèi)萌發(fā)種子數(shù)/視野內(nèi)總的種子數(shù)×100%。

122白及幼苗的培育

白及種子處理：取白及蒴果，用洗潔精清洗10 min→流水沖洗30 min→75%酒精中浸泡30 s→無菌水清洗2次→0.1%的升汞溶液滅菌8～12 min→無菌水清洗3次→接種于培養(yǎng)基上。培養(yǎng)條件：溫度20～25? ℃，光照強(qiáng)度為1 800 Lx，光照12 h/d。

白及種子萌發(fā)培養(yǎng)基的篩選：考察基本培養(yǎng)基、NAA、6￣BA 3種因素對白及種子萌發(fā)的影響，每個因子3個水平，分別為MS、1/2MS、3/4MS，03、0.5、0.7 mg/L，0.1、0.2、0.3 mg/L。采用L9（34）正交試驗共9個處理（表2）。接種培養(yǎng)20 d后，每個處理隨機(jī)選取3個培養(yǎng)皿，每個培養(yǎng)皿取3個視野在體視顯微鏡下觀察，統(tǒng)計種子萌發(fā)率。

123白及假鱗莖誘導(dǎo)及生長

白及假鱗莖的誘導(dǎo)主要是考察基本培養(yǎng)基、6￣BA和NAA3種因素對誘導(dǎo)白及假鱗莖的影響。每個因子3個水平，分別為MS、1/2MS、3/4MS，05、1.0、1.5 mg/L，0.1、02、0.3 mg/L，采用L9（34）正交試驗共9個處理（表3）。將高約1～2 cm的白及幼苗轉(zhuǎn)接于培養(yǎng)基上，每個處理接種白及幼苗10瓶，每瓶10株，3個重復(fù)。培養(yǎng)40 d后，在每個重復(fù)中隨機(jī)選取2瓶，共54瓶，記錄假鱗莖個數(shù)，計算假鱗莖的誘導(dǎo)率。用游標(biāo)卡尺測量株高（mm）、假鱗莖直徑（mm）、根長（mm），精確度為001，重復(fù)3次。記錄葉片數(shù)、根數(shù)。

假鱗莖誘導(dǎo)率=假鱗莖總數(shù)/接種數(shù)×100%。

13數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)處理使用軟件Excel 2010、DPS 7.05。

2結(jié)果與分析

21白及種子活力、萌發(fā)率及含水量

在貯藏試驗前，對種子質(zhì)量進(jìn)行檢驗。隨機(jī)選取10個蒴果剝開，將種子倒出混勻，對種子活力、萌發(fā)率及含水率（n=3）進(jìn)行測量，結(jié)果見表4和圖1。從活力和萌發(fā)率來看，種子活力較好，從水分來看，蒴果新鮮。

2.2不同貯藏方法白及種子活力及萌發(fā)率

不同貯藏條件的種子活力和萌發(fā)率測定結(jié)果見表5。由表5可知，當(dāng)種子含水率高時，種子活力和萌發(fā)率下降明顯，溫度越高，下降越快，同時高含水量種子會在-20? ℃條件下死亡，推測原因可能是種胚內(nèi)水分結(jié)冰漲破種胚細(xì)胞，造成種子死亡;在相同溫度下，含水率越低種子壽命越長，25? ℃時，新鮮種子在90 d的時候已經(jīng)不能萌發(fā)，含水率下降到30%可以存放半年左右，含水量下降到5%的種子，快1年時也能保持較高活力和萌發(fā)率;含水率下降到5%時，不同溫度下都保持了較高的活力和萌發(fā)率，25? ℃時種子萌發(fā)率和活力緩緩下降，在相同的貯藏時間內(nèi)，4? ℃時種子活力低于-20? ℃貯藏時的種子活力，但是4? ℃時種子的萌發(fā)率高于-20? ℃貯藏時的種子萌發(fā)率。3種不同含水率的白及種子在不同溫度條件下貯藏的種子活力、種子萌發(fā)率隨時間的增加呈遞減趨勢。

綜上，水分是影響貯藏白及種子壽命的關(guān)鍵因素，水分較低時種子可以貯存時間較長;貯藏種子的溫度過高或過低，均會對種子活力與萌發(fā)率有一定的影響。因此，對白及種子進(jìn)行貯藏時，建議選用含水率下降到5%左右的干燥種子，4? ℃條件下保存。

23白及種子萌發(fā)培養(yǎng)基的篩選

不同培養(yǎng)基對白及種子萌發(fā)的影響結(jié)果見表6。由表6中R值分析可以看出，3個因子對白及種子萌發(fā)的影響從高至低依次為NAA>6-BA>基本培養(yǎng)基，說明激素NAA和6-BA對白及種子萌發(fā)的影響大于基本培養(yǎng)基。顯著差異分析表明，不同培養(yǎng)基之間白及種子萌發(fā)率有顯著差異，其中

9個處理的白及種子萌發(fā)率為74.11%，極顯著于其他8個處理。而萌發(fā)率最低的是處理2，其萌發(fā)率為62.05%。因此，處理9即3/4MS+0.7 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+土豆粒70 g/L+蔗糖30 g /L+瓊脂6.5 g /L+活性炭0.3 g /L是白及種子萌發(fā)的最佳培養(yǎng)基。

24不同培養(yǎng)基對白及假鱗莖誘導(dǎo)的比較

不同培養(yǎng)基對白及假鱗莖誘導(dǎo)影響的結(jié)果如圖2所示。從圖2可知，不同培養(yǎng)基都能誘導(dǎo)假鱗莖的形成，9個處理的假鱗莖誘導(dǎo)率為78%～98%。在9個處理中，假鱗莖誘導(dǎo)率最高的是處理7，誘導(dǎo)率最高達(dá)到98%;最低的是處理6，誘導(dǎo)率僅為78%。因此，處理7（3/4MS+0.5 mg/L6-BA+0.3 mg/LNAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭0.3 g/L）最有利于誘導(dǎo)白及假鱗莖的形成和膨大。

2.5不同處理對白及組培苗生長的影響

不同處理對白及組培苗生長的影響結(jié)果見表8。從表8可以看出，不同處理之間白及假鱗莖直徑存在顯著差異，其中處理7假鱗莖的平均直徑為3.75 mm，高于其他處理，達(dá)到了極顯著水平。因此，處理7的培養(yǎng)基最有利于白及假鱗莖直徑的增大。白及組培苗處理7的株高達(dá)到了最大值1899 mm，處理5的株高最小為10.91 mm，處理8的株高和其他8個處理相比達(dá)到了極顯著水平。處理1的葉片數(shù)達(dá)到了最大值3.18，達(dá)到了極顯著水平。結(jié)果表明，最適合白及苗株高生長的培養(yǎng)基是3/4MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭0.3 g/L;最適合葉片數(shù)增加的培養(yǎng)基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭03 g/L。顯著性分析表明，處理7的根數(shù)達(dá)到了最大值3.1，極顯著大于其他處理。因此，適宜白及增根的培養(yǎng)基是處理7，即3/4MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭0.3 g/L。處理3和處理7的根長最大，分別為11.54、11.45 mm，都極顯著高出其他處理，因此，適合白及根系生長的培養(yǎng)基為處理3或處理7，即MS+1.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/LNAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭0.3 g/L或3/4MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/LNAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭0.3 g/L。

綜合分析各處理對白及假鱗莖的誘導(dǎo)以及白及苗生長的影響表明處理7最適合白及假鱗莖的誘導(dǎo)以及白及組培苗的生長發(fā)育。

3結(jié)論與討論

試驗研究表明：貯藏種子時，隨時間推移，不同含水率和溫度條件下的種子活力與萌發(fā)率都差異明顯，在含水率為5%，貯藏溫度為4? ℃、-20? ℃時，都可以在長時間下保持較高種子活力和萌發(fā)率，但4? ℃貯藏種子的萌發(fā)率相對較高，因此，建議4? ℃下貯種子;隨著貯藏時間的增加，種子活力和萌發(fā)率會有一定的下降，該結(jié)果與胡開治[5]在研究不同貯藏方法及貯藏時間對白及種子萌發(fā)的影響時提出的觀點相一致。另外，在白及苗培育試驗中，在處理9條件下，萌發(fā)時間最快，20 d時萌發(fā)率達(dá)到了74.11%;在以白及苗為材料誘導(dǎo)假鱗莖時，基本培養(yǎng)基、激素的濃度對白及的生長都有顯著的影響，大部分都誘導(dǎo)出了假鱗莖，處理7培養(yǎng)白及組培苗，其假鱗莖誘導(dǎo)率高達(dá)98%，有利于利于白及假鱗莖的生長。在該培養(yǎng)基培養(yǎng)條件下，白及組培苗的根系生長旺盛，根的數(shù)量也多于其他處理。處理8有利于植株的生長，但植株的平均葉片數(shù)沒有處理1條件下培養(yǎng)的白及葉片數(shù)多。

綜合上述分析，最終選擇適合白及種子萌發(fā)和培育成幼苗的培養(yǎng)基為：3/4 MS+0.7 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+土豆70 g/L+30 g/L蔗糖+7 g/L瓊脂;適合白及假鱗莖誘導(dǎo)以及白及苗生長的培養(yǎng)基是3/4 MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+香蕉50 g/L+土豆70 g/L+蔗糖30 g/L+瓊脂7 g/L+活性炭03 g/L;白及種子的貯藏條件選擇含水率為5%，貯藏溫度為4? ℃。在種子的萌發(fā)和假鱗莖的誘導(dǎo)試驗中，3/4 MS培養(yǎng)基對種子和白及苗生長的影響總體優(yōu)于MS和1/2 MS基本培養(yǎng)基，其原因在于MS培養(yǎng)基的鹽溶液較高，對種子以及幼苗有一定的毒害作用。1/2 MS培養(yǎng)基的鹽溶液較低于3/4 MS培養(yǎng)基，但效果沒有3/4 MS基本培養(yǎng)基好，其原因在于1/2 MS培養(yǎng)基的鹽溶液不能滿足種子以及幼苗生長發(fā)育的影響。故在組織培養(yǎng)方面，3/4 MS基本培養(yǎng)基的提出，是對組織培養(yǎng)技術(shù)的補(bǔ)充，有益于為今后組織培養(yǎng)技術(shù)提供一定的參考和指導(dǎo)。

參考文獻(xiàn)：

[1]

李時珍.本草綱目：第二冊[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1999：765-767.

[2]國家藥典委員會編.中華人民共和國藥典：一部[S].北京：北京醫(yī)藥科技出版社，2015：103.

[3]陶阿麗，金耀東，劉金旗，等.中藥白及化學(xué)成分、藥理作用及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，41（11）：6-9.

[4]林立，聶鮮鈺，陸春云，等.白及蒴果長寬重與種子質(zhì)量相關(guān)性研究[J].山地農(nóng)業(yè)生物學(xué)報，2019，38（2）：80-83.

[5]胡開治，劉杰，肖波，等.不同貯藏方法及貯藏時間對白及種子萌發(fā)的影響[J].中藥材，2010，33（1）：7-10.

[6]李慧敏，楊冠海，李明靜，等.白芨瓶內(nèi)假鱗莖誘導(dǎo)研究[J].南方農(nóng)業(yè)學(xué)報，2013，44（10）：1607-1612.

[7]彭麗麗，劉祥東，劉華， 等.白芨的組培快繁[J].中國野生植物資源，2004（5）：65.

[8]余朝秀，李枝林，王玉英. 野生白芨組培快繁技術(shù)研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2005，27（5）：601-604.

[9]袁寧，何俊蓉，何銳，等.白芨組培快繁育苗技術(shù)研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，22（3）：781-785.

[10]管常東，葉靜，鄭曉君，等，白芨組織快繁育苗技術(shù)研究進(jìn)展[J].云南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2010，32（S1）：416-421.

[11]王楷，李玥，張云峰，等.白芨種子的高效萌發(fā)及其無性繁殖體系的構(gòu)建[J].云南師范大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2014，34（4）：71-78.

[12]和壽星，徐中志，薛潤光，等.白芨無菌播種育苗技術(shù)[J].云南農(nóng)業(yè)科技，2010（6）：38-39.