黃孢原毛平革菌后處理深度提升醋糟產(chǎn)甲烷潛力

李 倩，許之揚(yáng)，阮文權(quán)，*

(1.江南大學(xué) 環(huán)境與土木工程學(xué)院，江蘇 無錫 214122； 2.江蘇省環(huán)境厭氧生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，江蘇 無錫 214122)

醋糟是食醋生產(chǎn)過程中為疏松醋醅而加入麩皮、稻殼等木質(zhì)纖維素類物質(zhì)所產(chǎn)生的固態(tài)廢棄物，是一類重要的木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)資源[1]。我國醋糟的年產(chǎn)量已達(dá)200萬t以上，且每年仍在以7%的速度增長。厭氧消化產(chǎn)沼氣是實(shí)現(xiàn)醋糟資源化利用的重要技術(shù)途徑之一，不僅可以有效避免傳統(tǒng)方法導(dǎo)致的二次污染和資源浪費(fèi)，而且可以獲得清潔能源——沼氣[2]。木質(zhì)纖維素作為醋糟的主要成分，由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素(簡稱“三素”)組成。纖維素是木質(zhì)纖維素的骨架，半纖維素通過氫鍵與纖維素連接，木質(zhì)素則填滿了纖維素和半纖維素之間的空隙，使木質(zhì)纖維素形成了復(fù)雜的三維立體結(jié)構(gòu)。在醋糟的厭氧消化過程中，由于木質(zhì)素難以被降解，大大阻礙了微生物和酶對底物的接觸，使得醋糟的厭氧消化率低下[3-4]。因此，采用高效的處理方法對木質(zhì)素進(jìn)行脫除是提高醋糟生物利用性的重要途徑。

目前，脫除木質(zhì)素、破壞木質(zhì)纖維素致密結(jié)構(gòu)的方法主要包括物理法、化學(xué)法和生物法。相比物理法和化學(xué)法，生物法因具有低能耗和無二次污染的優(yōu)勢而受到了廣泛的關(guān)注[5]。木質(zhì)素降解是真菌、放線菌、細(xì)菌等共同作用的結(jié)果，其中真菌占主導(dǎo)地位[6]。能降解木質(zhì)素的真菌主要包括3大類：白腐菌、褐腐菌和軟腐菌，其中白腐菌降解木質(zhì)素的能力最強(qiáng)，應(yīng)用最廣，研究最深入，也是目前已知的唯一可以將木質(zhì)素徹底降解為CO2和H2O的微生物[7]。黃孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)是目前研究最多的典型白腐菌之一，無性繁殖迅速，分泌木質(zhì)素降解酶的能力強(qiáng)，是研究木質(zhì)素降解的模式菌。真菌處理在提高木質(zhì)纖維素可生物降解性的同時(shí)會(huì)造成主要的甲烷轉(zhuǎn)化組分纖維素和半纖維素的損失，從而對甲烷產(chǎn)量造成影響。真菌處理?xiàng)l件是影響纖維素和半纖維素處理效果的重要因素[5，8]。目前，關(guān)于P.chrysosporium處理木質(zhì)纖維素類物質(zhì)的報(bào)道多集中在前處理環(huán)節(jié)，鮮有關(guān)于其后處理的研究。例如：柳珊等[9]對經(jīng)P.chrysosporium預(yù)處理15 d后的青貯玉米秸稈進(jìn)行厭氧消化，累積甲烷產(chǎn)量提高了29.2%；Ghosh等[10]利用P.chrysosporium預(yù)處理稻草秸稈進(jìn)行厭氧消化，累積沼氣和甲烷產(chǎn)量分別提高了34.7%和46.1%。P.chrysosporium預(yù)處理雖然可以提高木質(zhì)纖維素類物質(zhì)的產(chǎn)氣性能，但是預(yù)處理過程中P.chrysosporium會(huì)優(yōu)先利用底物中易降解的碳源，且所需的場所、工作量和菌劑都很大[11]，以上原因限制了該方法的工程應(yīng)用。作者前期研究發(fā)現(xiàn)，厭氧發(fā)酵對醋糟木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)的破壞有限，發(fā)酵后的醋糟仍具有巨大的產(chǎn)甲烷潛力。鑒于以上原因，特提出后處理的概念，即相對于傳統(tǒng)的P.chrysosporium預(yù)處理方法，將厭氧發(fā)酵后的醋糟采用P.chrysosporium處理，以達(dá)到深度提升醋糟的產(chǎn)沼氣潛力，并減少菌劑用量的目的。

本研究以厭氧發(fā)酵后的醋糟為原材料，以P.chrysosporium作為接種物，探討不同接種量和后處理時(shí)間下醋糟的降解情況，并結(jié)合醋糟產(chǎn)甲烷潛力(BMP)實(shí)驗(yàn)確定最佳的后處理?xiàng)l件，以深度提升醋糟的產(chǎn)甲烷潛力，為后續(xù)醋糟后處理反應(yīng)器的構(gòu)建和工程化應(yīng)用提供數(shù)據(jù)和理論支撐。

1 材料與方法

1.1 底物與接種物

后處理實(shí)驗(yàn)分別以厭氧發(fā)酵后的醋糟和P.chrysosporium作為底物和接種物。P.chrysosporium購于中國工業(yè)微生物菌種保藏管理中心(CICC)(保藏菌種編號為40299)，具有良好的木質(zhì)素降解能力。BMP實(shí)驗(yàn)所用的接種污泥與后處理的原料取自同一穩(wěn)定運(yùn)行的醋糟厭氧反應(yīng)器，經(jīng)長期馴化，其中的微生物具有良好的木質(zhì)纖維素類降解能力。后處理原料和接種污泥的主要性質(zhì)如表1所示，經(jīng)厭氧發(fā)酵后的醋糟中仍含有69.15%(以干質(zhì)量計(jì))的木質(zhì)纖維素，產(chǎn)沼氣潛力巨大。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 菌種培養(yǎng)

購買回菌種后，先用0.5 mL液體培養(yǎng)基(1.0 L馬鈴薯提取液，20.0 g葡萄糖，3.0 g KH2PO4，1.5 g MgSO4，8.0 mg維生素B1，pH 6.0)溶解凍干菌粉，溶解后的菌懸液全部轉(zhuǎn)移至5.0 mL液體培養(yǎng)基中，混勻，于28 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)8 d。將培養(yǎng)8 d后的菌種進(jìn)行勻漿處理，接種到新的5.0 mL液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。重復(fù)以上步驟3次，以恢復(fù)菌種活力。將恢復(fù)活力后的菌種接種于固體培養(yǎng)基(除了另加15.0 g瓊脂外，其他與液體培養(yǎng)基配方相同)中，28 ℃培養(yǎng)7 d，此時(shí)菌絲布滿整個(gè)培養(yǎng)皿，可用于接種。

1.2.2 后處理實(shí)驗(yàn)

為研究不同接種量和后處理時(shí)間對厭氧發(fā)酵后的醋糟組分及其產(chǎn)氣的影響，稱取100 g(以濕重計(jì))厭氧發(fā)酵后的醋糟放入1 L燒杯中，于121 ℃滅菌20 min，滅菌后放入超凈臺冷卻，用直徑為11 mm的打孔器接種不同量(3塊、6塊和9塊)的P.chrysosporium菌塊于燒杯中，每個(gè)條件設(shè)置3個(gè)平行，分別于第8天、第12天和第16天各取樣一次，根據(jù)接種量和后處理時(shí)間，各處理相應(yīng)標(biāo)記，如T3-8表示接種量為3塊、后處理時(shí)間8 d，以下依此類推。接種時(shí)，應(yīng)使菌塊均勻分布在醋糟中，從而保證醋糟降解均衡。燒杯用8層紗布封口，放于28 ℃培養(yǎng)箱(SPX-150B，上海坤天實(shí)驗(yàn)室儀器有限公司)中培養(yǎng)，自然濕度。每天定時(shí)通風(fēng)、補(bǔ)水和攪拌，保證菌種生長所需的氧氣和水分。經(jīng)后處理過的醋糟一部分用于測定總固體(TS)和揮發(fā)性固體(VS)的降解率，以及纖維素等組分和木質(zhì)纖維素酶活的變化，一部分用于BMP實(shí)驗(yàn)。

表1 實(shí)驗(yàn)用醋糟和接種污泥的性質(zhì)

Table 1 Characteristics of vinegar residue and seed sludge

參數(shù)Parameter醋糟Vinegar residue接種污泥Seed sludge總固體Total solids/%a23.66±0.2214.58±0.11揮發(fā)性固體Violate solids/%a20.76±0.1712.85±0.24C/N12.59±0.3526.12±0.20纖維素Cellulose/%b36.19±0.22—半纖維素Hemicellulose/%b11.61±0.12—木質(zhì)素Lignin/%b21.35±0.34—

a，基于濕質(zhì)量；b，基于干質(zhì)量。n=3。

a: Based on wet weight; b: based on dry weight.n=3.

1.2.3 BMP實(shí)驗(yàn)

采用BMP實(shí)驗(yàn)對經(jīng)后處理的醋糟進(jìn)行產(chǎn)氣特性評估。采用體積為500.0 mL的血清瓶作為消化瓶，有效工作體積為300.0 mL。血清瓶出氣口與AMPTS Ⅱ系統(tǒng)(Bioprocess control，瑞典)相連，以采集實(shí)驗(yàn)過程中的累積甲烷產(chǎn)量和產(chǎn)甲烷速率。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，將接種物(300 mL)和原料(揮發(fā)性固體濕質(zhì)量2.67 g)放入血清瓶中，向瓶中通入氮?dú)? min排盡空氣，通過水浴保持厭氧消化溫度[(37±1)℃]，采用間歇式攪拌。設(shè)置1個(gè)空白組(不添加醋糟，添加接種污泥)、1個(gè)對照組(添加未經(jīng)后處理的醋糟，接種污泥)和9個(gè)實(shí)驗(yàn)組(添加經(jīng)后處理的醋糟，接種污泥)。實(shí)驗(yàn)組或?qū)φ战M的凈甲烷產(chǎn)量等于相應(yīng)總甲烷產(chǎn)量減去空白組甲烷產(chǎn)量。

1.3 分析方法

總固體和揮發(fā)性固體質(zhì)量，采用干重法[12]測定；C、N元素含量，采用元素分析儀(Elementar VarioMACRO，德國)測定；纖維素、半纖維素和木質(zhì)素含量，參照van Soest[13]的洗滌法，利用纖維素分析儀(ANKOM A2000i，美國)測定。計(jì)算TS、VS和木質(zhì)纖維素降解率，以及木質(zhì)纖維素降解選擇性。

木質(zhì)纖維素酶酶活測定：取4.0 g經(jīng)P.chrysosporium后處理的醋糟置于20.0 mL蒸餾水中，振蕩浸提2.0 h，12 000×g離心10 min，上清液過膜(0.45 μm)，所得液體即為酶活測定的粗酶液[14]。漆酶(Lac)活性測定采用ABTS法[15]，木質(zhì)素過氧化物酶(LiP)活性測定采用藜蘆醇法[16]，錳過氧化物酶(MnP)活性測定采用二價(jià)錳氧化分光光度法[17]，木聚糖酶和羧甲基纖維素酶(CMCase)活性測定采用二硝基水楊酸(DNS)顯色法[18]。

2 結(jié)果與分析

2.1 后處理?xiàng)l件對醋糟理化特性的影響

2.1.1 醋糟主要組分降解情況

TS和VS是表征醋糟中可被厭氧菌群利用的干物質(zhì)量的重要指標(biāo)，不同后處理?xiàng)l件下醋糟TS和VS的降解率如表2所示。可以看出，P.chrysosporium可以有效降解經(jīng)厭氧發(fā)酵后醋糟中的干物質(zhì)，且隨著后處理時(shí)間延長和接種量增大，醋糟中的TS和VS降解率增加。

木質(zhì)纖維素是醋糟的主要成分，纖維素和半纖維素是醋糟厭氧發(fā)酵的重要甲烷轉(zhuǎn)化組分，木質(zhì)素則是限制醋糟發(fā)酵效率的重要因素。為此，本研究考查了后處理前后醋糟“三素”的降解率和降解選擇性，如圖1和表3所示。P.chrysosporium在初生代謝過程中優(yōu)先利用易被降解的碳源，如半纖維素和纖維素等，來滿足自身生長和之后降解活動(dòng)的營養(yǎng)需要。因?yàn)槟举|(zhì)素的降解發(fā)生在次生代謝階段，所以P.chrysosporium對纖維素(34.96%～38.19%)和半纖維素(31.82%～39.16%)的降解選擇性高于木質(zhì)素的降解選擇性(23.41%～32.35%)。纖維素被半纖維素和木質(zhì)素包裹，纖維素酶較難進(jìn)入到木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)中，且半纖維素分子量更小，結(jié)構(gòu)更簡單[19]，因此半纖維素的降解率始終高于纖維素的降解率?？傮w來看，接種量越大，P.chrysosporium初生代謝對碳源的需求就越大，纖維素和半纖維素降解率就越高，醋糟被降解得就越徹底，與干物質(zhì)的降解結(jié)果一致。與纖維素、半纖維素相比，木質(zhì)素復(fù)雜的組成和結(jié)構(gòu)決定了其降解率較低。前12 d，各處理的木質(zhì)素降解率差異不顯著，隨著P.chrysosporium次生代謝逐漸增強(qiáng)，木質(zhì)素酶酶活提高，木質(zhì)素的降解選擇性逐漸升高，不同接種量實(shí)驗(yàn)組的木質(zhì)素降解率差異亦逐漸增大。綜上，延長后處理時(shí)間和增大接種量有助于提高醋糟“三素”的降解效率。

表2 不同后處理?xiàng)l件下醋糟總固體(TS)和揮發(fā)性固體(VS)的降解率

Table 2 Degradation rates of total solids (TS) and violate solids (VS) in vinegar residue under different post-treatments

實(shí)驗(yàn)組Experimental group降解率Degradation rate/%TSVST3-85.18±0.225.76±0.25T3-126.81±0.307.59±0.28T3-168.37±0.429.35±0.35T6-85.33±0.225.91±0.27T6-127.60±0.358.48±0.36T6-168.87±0.439.89±0.47T9-85.49±0.276.10±0.27T9-128.20±0.379.10±0.41T9-168.96±0.409.91±0.41

2.1.2 水解酶活性情況

目前，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的木質(zhì)素降解酶系主要包括LiP、MnP和Lac，三者在白腐菌降解木質(zhì)素的過程中起著重要的作用。本實(shí)驗(yàn)測定了不同后處理?xiàng)l件下醋糟基質(zhì)上木質(zhì)素降解酶活性的變化規(guī)律，旨在為后續(xù)最佳后處理?xiàng)l件的選擇提供參考。

在P.chrysosporium降解木質(zhì)素的過程中，一直未能檢測出Lac，這與前人的研究結(jié)果[14，20]相符。木質(zhì)素的降解與Lac酶的分泌沒有必然的相關(guān)性，LiP、MnP和Lac三者既能單獨(dú)降解木質(zhì)素，也能兩兩聯(lián)合，或者三者共同降解木質(zhì)素[6]。如圖2所示，MnP的活性高于LiP，MnP和LiP活性有著相同的變化趨勢，與木質(zhì)素的降解率趨勢相符，說明兩者在木質(zhì)素降解過程中起重要作用。LiP的作用是降解木質(zhì)素中的非酚型結(jié)構(gòu)；MnP既可以降解木質(zhì)素中的酚型結(jié)構(gòu)也可以降解非酚型結(jié)構(gòu)。后處理第8天，接種量越大，木質(zhì)素降解酶分泌量越多，其活性也越高。然而，由于前期P.chrysosporium接種于醋糟主要為初級代謝以滿足自身生長，所以各實(shí)驗(yàn)組的木質(zhì)素降解酶活性不高，且各實(shí)驗(yàn)組差異不大，這從木質(zhì)素降解率上也可以看出。后處理第12天，各實(shí)驗(yàn)組的木質(zhì)素降解酶分泌量因次生代謝的增強(qiáng)而增多，相比于前期各實(shí)驗(yàn)組木質(zhì)素降解酶的活性差異增大。后處理第16天，接種量為3塊和6塊的實(shí)驗(yàn)組(T3-16、T6-16)木質(zhì)素降解酶的活性基本保持穩(wěn)定，而接種量為9的實(shí)驗(yàn)組(T9-16)木質(zhì)素降解酶的活性下降明顯，MnP和LiP的活性分別降至4.21 U·g-1和2.50 U·g-1。這可能是因?yàn)楹笃诰觊_始衰退，分泌酶的能力下降，后期的酶分泌量不足以彌補(bǔ)前期大量分泌酶的失活。綜上，加大接種量和延長后處理時(shí)間可以在一定程度上促進(jìn)P.chrysosporium分泌木質(zhì)素降解酶。

圖1 不同后處理?xiàng)l件下木質(zhì)纖維素的降解情況Fig.1 Lignocellulose degradation under different post-treatment conditions

表3 不同后處理?xiàng)l件下木質(zhì)纖維素的降解選擇性

Table 3 Degradation selectivity for lignocellulose under different post-treatment conditions

實(shí)驗(yàn)組Experimentalgroup降解選擇性Degradation selectivity/%纖維素Cellulose半纖維素Hemicellulose木質(zhì)素LigninT3-838.1937.9023.91T3-1236.3035.7727.93T3-1636.0734.0329.90T6-837.4339.1623.41T6-1237.2934.4928.22T6-1635.8331.8232.35T9-836.7439.1424.11T9-1235.4034.8729.73T9-1634.9633.9131.13

P.chrysosporium在降解木質(zhì)纖維素的過程中除分泌木質(zhì)素降解酶系外，還會(huì)分泌纖維素酶和半纖維素酶，兩者在P.chrysosporium降解木質(zhì)纖維素的過程中起著重要的作用。本研究考查了后處理過程中纖維素酶和半纖維素酶的分泌情況，分別用CMCase和木聚糖酶表征纖維素酶和半纖維素酶，結(jié)果如圖3所示。

當(dāng)接種量為6塊和9塊時(shí)，半纖維素酶的活性隨后處理時(shí)間延長先升高然后保持穩(wěn)定，在第12天達(dá)到峰值，分別為53.52 U·g-1和53.96 U·g-1。接種量為3塊時(shí)，半纖維素酶的活性不斷升高，第12天時(shí)半纖維素酶的活性為53.28 U·g-1，第16天時(shí)接種量為3塊的實(shí)驗(yàn)組有更多剩余的半纖維素，半纖維素酶的活性也升高至54.13 U·g-1。再結(jié)合半纖維素降解結(jié)果可以看出，加大接種量可以促進(jìn)半纖維素酶快速分泌，使半纖維素被快速利用。P.chrysosporium接種于醋糟之后，由于纖維素和木質(zhì)素之間的交聯(lián)結(jié)構(gòu)阻礙了纖維素與纖維素酶的接觸，白腐菌優(yōu)先利用易于降解的半纖維素，所以纖維素酶的活性低于半纖維素酶的活性，與降解結(jié)果一致。半纖維素和木質(zhì)素的降解提高了纖維素的可生物降解性，所以纖維素酶活性隨著后處理時(shí)間的延長而不斷升高，接種量為3塊和6塊實(shí)驗(yàn)組的纖維素酶的活性在第16天達(dá)到了最大值，分別為48.01 U·g-1和46.16 U·g-1。接種量為9塊的實(shí)驗(yàn)組，其纖維素酶和半纖維素酶活性在第12天達(dá)到峰值，到第16天略降，與前人研究結(jié)果[21]一致。

圖2 不同后處理?xiàng)l件下木質(zhì)素酶的活性Fig.2 Activity of ligninase under different post-treatment conditions

圖3 不同后處理?xiàng)l件下CMCase酶和木聚糖酶的活性Fig.3 Activity of CMCase and xylanase under different post-treatment conditions

2.2 后處理?xiàng)l件對醋糟產(chǎn)甲烷性能的影響

BMP實(shí)驗(yàn)常用于確定底物在厭氧消化過程中可被利用的有機(jī)物的量[22]。用未經(jīng)后處理的醋糟和經(jīng)不同后處理?xiàng)l件處理的醋糟進(jìn)行BMP實(shí)驗(yàn)，發(fā)酵產(chǎn)氣時(shí)間為53 d。

累積甲烷產(chǎn)量是表征底物產(chǎn)氣性能的重要指標(biāo)之一[23]。如圖4所示，各實(shí)驗(yàn)組醋糟的累積甲烷產(chǎn)量差異較大，說明接種量和后處理時(shí)間是影響醋糟可生物降解性的重要因素。各組的甲烷累積產(chǎn)量由高到低依次為T6-16>T9-8>T6-12>T3-16>T6-8>T3-12>T3-8>T9-16>T9-12>對照>空白，9個(gè)實(shí)驗(yàn)組的累積甲烷產(chǎn)量都高于對照組，說明P.chrysosporium后處理可以有效提高醋糟的可生物降解性。最佳產(chǎn)氣實(shí)驗(yàn)組T6-16單位質(zhì)量底物(以揮發(fā)性固體計(jì))甲烷產(chǎn)量為246.8 mL·g-1，是對照組的2.82倍；其次為實(shí)驗(yàn)組T9-8，單位質(zhì)量底物甲烷產(chǎn)量為237.8 mL·g-1，是對照組的2.72倍。然而，后處理實(shí)驗(yàn)降解效果較好的實(shí)驗(yàn)組T9-16和T9-12，只獲得了186.9 mL·g-1和166.1 mL·g-1的單位質(zhì)量底物甲烷產(chǎn)量，比T6-16分別低24.3%和32.7%。結(jié)合醋糟組分降解情況分析，與實(shí)驗(yàn)組T9-8相比，T9-16和T9-12的木質(zhì)素脫除效果更好，這意味著厭氧微生物更易與底物接觸，然而，其主要的產(chǎn)甲烷組分(纖維素和半纖維素)損失率也更高，后處理脫除木質(zhì)素所增加的甲烷產(chǎn)量不足以彌補(bǔ)后處理過程中纖維素和半纖維素?fù)p失所減少的甲烷產(chǎn)量，這是導(dǎo)致其獲得較低單位質(zhì)量底物甲烷產(chǎn)量的原因。由此可以看出，確定合適的接種量和后處理時(shí)間對于提升醋糟產(chǎn)甲烷潛力和實(shí)際應(yīng)用具有重要意義。綜上，接種量為6塊、后處理時(shí)間為16 d的實(shí)驗(yàn)組(T6-16)厭氧消化性能最佳。

日產(chǎn)甲烷量是直觀反映厭氧消化穩(wěn)定性的重要指標(biāo)[24]。如圖4所示，各組在厭氧發(fā)酵期的日甲烷產(chǎn)量變化趨勢一致，在第1天就達(dá)到了產(chǎn)氣高峰，然后逐漸下降，直至發(fā)酵結(jié)束。經(jīng)P.chrysosporium后處理的9個(gè)實(shí)驗(yàn)組在前20 d表現(xiàn)出了明顯的產(chǎn)甲烷優(yōu)勢，這是因?yàn)楹筇幚砻摮举|(zhì)素能有效破壞木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)，使得厭氧微生物更易利用醋糟。

3 結(jié)論

(1)P.chrysosporium后處理能有效降解沼渣中的木質(zhì)素纖維素成分，且底物降解效果隨接種量和后處理時(shí)間的延長而變優(yōu)。接種量為9塊、后處理時(shí)間為16 d的實(shí)驗(yàn)組(T9-16)降解最充分，纖維素、半纖維素和木質(zhì)素的降解率分別為7.84%、23.72%和11.84%。由于木質(zhì)素的降解發(fā)生在P.chrysosporium的次生代謝過程中，加上其自身較難降解，木質(zhì)素的降解率和選擇降解性都低于纖維素和半纖維素。

圖4 不同后處理?xiàng)l件下醋糟厭氧消化產(chǎn)甲烷情況Fig.4 Methane production during anaerobic digestion of vinegar residue under different post-treatment conditions

(2)P.chrysosporium后處理脫除醋糟中的木質(zhì)素、破壞木質(zhì)纖維素結(jié)構(gòu)，是使其可生物降解性提高的根本原因。接種量為6塊、后處理時(shí)間為16 d的實(shí)驗(yàn)組(T6-16)產(chǎn)氣潛力最佳，相應(yīng)的單位質(zhì)量底物甲烷產(chǎn)氣達(dá)到了246.8 mL·g-1，是對照組的2.82倍。這表明用P.chrysosporium后處理提升醋糟產(chǎn)甲烷潛力的方法是切實(shí)可行的。