退行性心臟瓣膜病患者血清LP（a）、OPN、IRF-4表達(dá)及其臨床意義

王俊華 崔勤濤 韓培立 劉曉晨

退行性心臟瓣膜?。―egenerative heart valvular disease，DHVD）為臨床多發(fā)性瓣膜病，是引起老年人心力衰竭、心律失常、暈厥和猝死的重要原因之一［1-2］。目前，臨床尚無緩解DHVD 病情進(jìn)展的特效方法，主要根據(jù)患者病情及心功能給予對(duì)癥治療［3］。因此，及時(shí)明確患者病情及其心功能變化，及時(shí)調(diào)整治療方案，對(duì)改善治療效果及預(yù)后具有重要影響［4-5］。近年來研究指出，脂蛋白（a）［Lipoprotein（a），LP（a）、骨橋蛋白（Osteopontin，OPN）、干擾素調(diào)節(jié)因子-4（Interferon regulatory factor-4，IRF-4）參與心血管疾病的發(fā)生發(fā)展，其異常表達(dá)具有促進(jìn)疾病進(jìn)展的作用［6-8］?；诖?，本研究首次分析DHVD 患者血清LP（a）、OPN、IRF-4的表達(dá)及臨床意義，旨在為臨床診治DHVD 提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院2016年1月至2018年12月120例DHVD 患者作為研究組，另選取同期健康體檢者115例作為對(duì)照組。兩組在性別、年齡、體質(zhì)量、空腹血糖、是否酗酒、病變情況的對(duì)比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①研究組均符合DHVD 診斷標(biāo)準(zhǔn)［9］；②認(rèn)知功能良好；③無溝通交流障礙；④臨床資料完整；⑤所有患者均已簽署知情同意書。⑥本實(shí)驗(yàn)經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批通過。排除標(biāo)準(zhǔn)：①惡性腫瘤患者；②近3 周內(nèi)有感染性疾病史者；③糖尿病患者；④血液系統(tǒng)疾病患者；⑤先天性心臟瓣膜畸形或發(fā)育異常者；⑥合并風(fēng)濕性心臟病等其他嚴(yán)重心臟疾病者；⑦有心臟手術(shù)史者；⑧傳染性疾病患者。

1.2 方法

1.2.1 指標(biāo)檢測方法

采集兩組晨起空腹靜脈血5 mL，其中3 mL 血液標(biāo)本以3 000 r/min 轉(zhuǎn)速離心處理10 min，取血清置于-80℃冷藏室待檢，采用免疫透射比濁法測定LP（a）水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定OPN 水平；2 mL 血液標(biāo)本采用Trizol 一步法提取總RNA，以逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法檢測IRF-4 mRNA 水平。

1.2.2 治療方法

研究組均給予血管擴(kuò)張劑、利尿劑、洋地黃等常規(guī)對(duì)癥治療，持續(xù)治療3 個(gè)月后評(píng)估療效，評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)［10］：顯效：心力衰竭癥狀明顯減輕，心動(dòng)過速、心房顫動(dòng)基本控制或偶有發(fā)生，心功能改善1 級(jí)以上；有效：心力衰竭癥狀好轉(zhuǎn)，心功能改善1 級(jí)；無效：未達(dá)以上標(biāo)準(zhǔn)。120例DHVD 患者經(jīng)常規(guī)對(duì)癥治療3 個(gè)月后，顯效38例，有效60例，無效22例。

1.2.3 觀察指標(biāo)

①兩組入組時(shí)血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA水平。②DHVD 發(fā)病的影響因素。③分析血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 診斷DHVD 的價(jià)值。④不同療效患者治療前、治療3 個(gè)月后血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 水平。⑤不同療效患者治療前、治療3 個(gè)月后心功能指標(biāo)，包括左心室射血分?jǐn)?shù)（Left ventricular ejection fraction，LVEF）、心臟指數(shù)（Cardiac index ，CI）。⑥分析血清LP（a）、OPN、IRF-4 與LVEF、CI 相關(guān)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以n（%）表示，用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（）表示、兩組間采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析，通過Logistic 進(jìn)行多因素回歸分析，采用Pearson進(jìn)行相關(guān)性分析，采用受試者工作（Receiver operating characteristic，ROC）曲線分析診斷價(jià)值，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組一般資料的比較

兩組資料中性別、年齡、體質(zhì)量空腹血糖酗酒等指標(biāo)比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 兩組一般資料比較（±s）Table1 Comparison of two groups of general data（±s）

表1 兩組一般資料比較（±s）Table1 Comparison of two groups of general data（±s）

項(xiàng)目性別（女/男）年齡（歲）體質(zhì)量（kg）空腹血糖（mmol/L）酗酒（例）研究組（n=120）51/69 64.29±5.84 63.76±7.85 4.51±0.49對(duì)照組（n=115）47/68 63.17±5.91 65.19±7.59 4.42±0.45t/χ2值0.064 1.461 1.419 1.465P 值0.800 0.145 0.157 0.144是否19（15.83）101（84.17）15（13.04）100（86.96）0.369 0.543病變情況（例）單瓣膜病變多瓣膜病變57（47.50）63（52.50）--

2.2 兩組血清各指標(biāo)水平

多瓣膜病變患者血清LP（a）、OPN 較單瓣膜病變患者高，且均較對(duì)照組高，多瓣膜病變患者IRF-4mRNA 水平較單瓣膜病變患者低，且均較對(duì)照組低（P＜0.05），見表2。

表2 兩組血清LP（a）、OPN、IRF-4 mRNA 水平比較（±s）Table2 Comparison of LP（a），OPN andIRF-4 mRNA levels between the 2 groups（±s）

n LP（a）mg/dL）OPN（μg/L）IRF-4 mRNA 組別研究組多瓣膜病變患者單瓣膜病變患者對(duì)照組F 值P 值63 57 115 61.93±20.57 54.51±18.11 38.17±12.65 47.427＜0.001 74.23±24.16 50.49±16.05 42.28±14.07 66.514＜0.001 0.75±0.04 0.79±0.05 0.85±0.10 36.432＜0.001

2.3 退行性心臟瓣膜?。―egenerative heart valvular disease，DHVD）發(fā)病的影響因素

以發(fā)生DHVD 作為因變量，將血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 作為自變量納入Logistic 回歸分析模型，結(jié)果顯示，冠心病、吸煙史、高血壓、血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 是DHVD 發(fā)病的重要影響因素（P＜0.05），見表3。

表3 DHVD 發(fā)病的影響因素Table3 influencing factors of DHVD

2.4 血清各指標(biāo)診斷DHVD 的價(jià)值

ROC 曲線分析顯示，血清LP（a）診斷DHVD的AUC 為0.802，大于OPN、IRF-4mRNA，當(dāng)截?cái)嘀担?2.57 mg/dL 時(shí)，診斷敏感度為70.00%，特異度為86.09%。見表4。

2.5 不同療效患者血清各指標(biāo)水平

治療3 個(gè)月后，顯效者血清LP（a）、OPN 水平較有效者、無效者低，IRF-4mRNA 水平較有效者、無效者高（P＜0.05），見表5。

2.6 不同療效患者心功能指標(biāo)水平

治療3 個(gè)月后，顯效者LVEF、CI 較有效者、無效者高（P＜0.05），見表6。

2.7 血清各指標(biāo)與心功能相關(guān)性

Pearson 相關(guān)性分析可知，血清LP（a）、OPN 與LVEF、CI 呈負(fù)相關(guān)，IRF-4mRNA 與LVEF、CI 呈正相關(guān)（P＜0.05），見圖1。

3 討論

本研究發(fā)現(xiàn)，多瓣膜病變DHVD 患者血清LP（a）、OPN 水平異常升高，IRF-4mRNA 水平較低。LP（a）具有抑制纖維蛋白溶解的作用，可促進(jìn)血栓形成，同時(shí)能促進(jìn)炎癥細(xì)胞對(duì)血管內(nèi)皮的粘附作用，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化及炎性心臟疾病的發(fā)生發(fā)展［11］。OPN 是一種具有多種功能的分泌型糖基化磷蛋白，參與炎癥反應(yīng)、血管重塑、組織鈣化等過程，在DHVD 患者體內(nèi)，OPN 的鈣化作用可能促進(jìn)心臟瓣膜鈣化及炎癥反應(yīng)加重，且能刺激心室重構(gòu)，加重心肌損傷，從而促進(jìn)病情進(jìn)展及心功能降低［12］。此外，IRF 家族對(duì)干擾素的基因表達(dá)具有調(diào)控作用，參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡等生物學(xué)過程，且是維持T 淋巴細(xì)胞分化、功能及平衡的重要因子，隨著年齡的增長，淋巴細(xì)胞內(nèi)IRF-4 逐漸減少，機(jī)體免疫功能降低，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞過多釋放炎癥因子，引發(fā)心肌組織自身免疫反應(yīng)，從而刺激心臟瓣膜炎癥發(fā)生［13-14］。本研究經(jīng)Logistic 回歸分析發(fā)現(xiàn)，血清LP（a）、OPN、IRF-4 mRNA 是DHVD 發(fā)病的重要影響因素，充分表明DHVD 患者血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 表達(dá)異常，是DHVD 發(fā)生的重要影響因素。且此次研究發(fā)現(xiàn)，冠心病、吸煙史、高血壓均為DHVD 發(fā)病的重要影響因素，因此，針對(duì)并發(fā)冠心病、高血壓及有吸煙史的DHVD 患者，應(yīng)加強(qiáng)治療及干預(yù)措施，以改善病情控制效果。

表4 ROC 分析結(jié)果Table4 ROC analysis results

表5 不同療效患者血清LP（a）、OPN、IRF-4 mRNA水平比較（±s）Table5 Comparison of serum Lp（a），OPN andIRF-4 mRNA levels in patients with different therapeutic effects（±s）

表5 不同療效患者血清LP（a）、OPN、IRF-4 mRNA水平比較（±s）Table5 Comparison of serum Lp（a），OPN andIRF-4 mRNA levels in patients with different therapeutic effects（±s）

n 指標(biāo)LP（a）（mg/dL）38 60 22 OPN（μg/L）38 60 22IRF-4 mRNA組別顯效者有效者無效者F 值P 值顯效者有效者無效者F 值P 值顯效者有效者無效者F 值38 60 22治療前56.91±16.22 58.76±18.93 60.05±20.01 0.226 0.798 61.84±19.06 63.27±20.85 63.99±21.28 0.092 0.912 0.78±0.07 0.77±0.06 0.75±0.05 1.648治療3 個(gè)月后42.10±7.05 49.13±8.26 54.39±11.87 15.220＜0.001 40.72±7.27 48.01±8.15 58.84±11.09 31.731＜0.001 0.83±0.04 0.80±0.03 0.77±0.02 25.242 LVEF（%）38 60 22 CI［L/（min·m2）］顯效者有效者無效者F 值P 值顯效者有效者無效者F 值P 值38 60 22 30.24±3.18 30.86±3.30 31.01±3.74 0.522 0.595 2.43±0.15 2.45±0.14 2.46±0.16 0.347 0.708 38.40±3.14 35.64±2.76 33.29±2.28 24.542＜0.001 2.65±0.12 2.56±0.09 2.48±0.06 22.922＜0.001

圖1 血清各指標(biāo)與心功能相關(guān)性Figure1 Serum indexes were correlated with cardiac function

基于上述結(jié)論，本研究進(jìn)一步采用ROC 曲線分析血清各指標(biāo)對(duì)DHVD 的診斷價(jià)值3 種指標(biāo)聯(lián)合有助于改善DHVD 的診斷效能，但其聯(lián)合診斷的具體價(jià)值有待日后進(jìn)一步探究。

此外，DHVD 患者經(jīng)常規(guī)對(duì)癥治療3 個(gè)月后，不同療效患者的血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA及LVEF、CI 存在顯著差異，進(jìn)一步經(jīng)Pearson 進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血清LP（a）、OPN 與LVEF、CI 存在顯著負(fù)相關(guān)關(guān)系，IRF-4mRNA 與LVEF、CI 存在顯著正相關(guān)關(guān)系，由此可見，血清LP（a）、OPN、IRF-4mRNA 不僅可作為DHVD 的診斷、病情評(píng)估的重要指標(biāo)，同時(shí)與患者治療后心功能具有密切相關(guān)性，治療期間動(dòng)態(tài)監(jiān)測其水平變化，有助于明確患者心功能改變情況，對(duì)臨床及時(shí)調(diào)整治療方案具有重要指導(dǎo)性作用，利于改善治療效果及患者預(yù)后。

綜上可知，LP（a）、OPN 及IRF-4mRNA 在DHVD 患者血清中存在異常表達(dá)，與DHVD 的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，在DHVD 診斷方面具有較高應(yīng)用價(jià)值，且與患者治療后心功能密切相關(guān)，可應(yīng)用于DHVD 的診斷、病情及療效評(píng)估。