雙氯芬酸鈉透皮控釋制劑的研究

（中山大學(xué)藥學(xué)院，廣東 廣州，510006）

雙氯芬酸鈉（Diclofenac sodium，DCS）是一種臨床常用的非甾體類抗炎藥物，主要作用為抑制花生四烯酸環(huán)氧化酶、白三烯以及緩激肽等物質(zhì)的生成，用于鎮(zhèn)痛及抗炎的治療。目前該藥臨床上使用十分廣泛，主要用于痛經(jīng)、偏頭痛或者機(jī)械損傷后的鎮(zhèn)痛及消炎，還對(duì)于關(guān)節(jié)炎等的疼痛和發(fā)熱具有一定的治療效果。將雙氯芬酸鈉制成透皮吸收的緩控釋制劑，可以獲得更加穩(wěn)定的血藥濃度，提高患者的依從性，更好的發(fā)揮其藥效。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用新型技，使用脂質(zhì)體-醇質(zhì)體制做雙氯芬酸鈉制成透皮吸收的緩控釋制劑，經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明，透皮吸收的效果好，控釋作用顯著，相對(duì)生物利用度高，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象和方法

1.1 研究方法

1.1.1 制備

使用超聲法與乙醇注入法相結(jié)合改良成一種新制備方法，并采用該法制備醇脂質(zhì)體。醇脂質(zhì)體處方組成為乙醇、卵磷脂、雙氯芬酸鈉及水。具體操作方法是：稱取處方量的卵磷脂于玻璃瓶中，加乙醇攪拌溶解，雙氯芬酸鈉用雙蒸水溶解并使混合均一。嚴(yán)密封合注射器與玻璃瓶，在能夠加入乙醇的同時(shí)避免乙醇蒸發(fā)。藥物全部溶解之后，再把卵磷脂乙醇溶液加入其中，流速控制在200μl/min，超聲5分鐘，用0.45μm過濾器過濾，制成雙氯芬酸鈉醇脂質(zhì)體混懸液。

分別取取含量不同的乙醇、磷脂、選擇超聲以及磷脂加入量的柔性輔料泊洛沙姆，其余處方及制備工藝完全相同，分別制成醇脂質(zhì)體，測(cè)定包封率。在單因素分析的基礎(chǔ)上，固定其他輔料的用量，采用正交試驗(yàn)的設(shè)計(jì)及方差分析考察對(duì)包封率及粒徑分布影響較大的幾種因素，A(乙醇濃度),B(磷脂濃度),C(超聲時(shí)間),D（柔性輔料的用量），采用方法分析和直觀分析法對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。

1.2 觀察指標(biāo)

1.2.1 包封率測(cè)定

采用超速離心法測(cè)定醇脂質(zhì)體的包封率。按下式計(jì)算包封率：

1.2.2 透皮率和體外釋藥性測(cè)定

采用漿法測(cè)定釋放度，樣品經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后測(cè)定吸光度。

1.2.3 生物相容性測(cè)定

生物利用度的研究方法采用血藥濃度法對(duì)相對(duì)生物利用度進(jìn)行評(píng)價(jià)。計(jì)算公式如下：

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

本次研究數(shù)據(jù)采用SPSS16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，使用用t檢驗(yàn)計(jì)量資料，并且用卡方檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料，差異是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義由p＜0.05判定。

2 結(jié)果

2.1 制備工藝中各指標(biāo)對(duì)雙氯芬酸鈉包封率影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，四個(gè)影響因素對(duì)透皮控釋貼劑的綜合影響效果為B＞A＞C＞D，根據(jù)評(píng)分，得最佳處方為：A3B2C2D1。

表1 正交試驗(yàn)因素與水平Tab 1 Orthogonal experimental factors and levels

2.2 透皮率和體外釋藥性測(cè)定結(jié)果

貼劑的初黏力隨著檸檬酸三乙酯的濃度增加而增加，而持黏力則隨著檸檬酸三乙酯的濃度的增加而下降，琥珀酸對(duì)黏持力影響不明顯。以黏持力為指標(biāo)，最優(yōu)的處方組成為：雙氯芬酸鈉醇脂質(zhì)體溶液含量10%、丙烯酸樹脂Ⅳ號(hào)0.4g，檸檬酸三乙酯0.25g，琥珀酸0.052g，氮酮含量5%。

表2 體外釋放度測(cè)定測(cè)定結(jié)果Table 2 Determination of in vitro release results

2.3 生物相容性結(jié)果

計(jì)算得出雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑的相對(duì)生物利用度為167.20%，說明采用本研究?jī)?yōu)化后工藝制備的雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑具有較高的生物利用度。

圖1 雙氯芬酸鈉血藥濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線Figure 1 standard diclofenac plasma concentration curve

3 討論

由于受人體表皮皮層屏障作用的限制，所以又很多藥物不適宜制成透皮吸收的制劑[1]，其中水溶性和大分子的藥物透皮吸收的吸收率最低[2]。脂質(zhì)體由于結(jié)構(gòu)比較特殊，所以比較容易透過表皮層，用脂質(zhì)體包裹藥物，可以增加藥物的透皮效率[3]，因此，用脂質(zhì)體制備透皮吸收的制劑成為目前研究的熱點(diǎn)，越來越多的研究者在脂質(zhì)體透皮吸收制劑的研究中取得長足進(jìn)展[4]，在這一方面，增加脂質(zhì)體的透皮吸收作用通常是工作的重心[5]。近年來，一種新型的柔性脂質(zhì)體引起人們的關(guān)注，柔性脂質(zhì)體具有脂質(zhì)體樣囊泡結(jié)構(gòu)、能增加透皮作用，而且來源廣泛[5]，主要以大豆卵磷脂作為膜材制備，其流動(dòng)性和變形性良好，十分有利于通過表皮屏障[6]。所以柔性脂質(zhì)體對(duì)透皮吸收制劑的研究開發(fā)將起到很大的促進(jìn)作用，具有良好的研究?jī)r(jià)值及應(yīng)用前景[6]。

含醇的脂質(zhì)體流動(dòng)性及變形性強(qiáng)，能顯著促進(jìn)藥物透過表皮屏障，增加藥物在皮膚中的蓄積，并有較高的包封率[8]，是一個(gè)高效、長效的透皮載體，毒性小，安全性高。一項(xiàng)針對(duì)醇脂質(zhì)體穩(wěn)定性的研究結(jié)果顯示[9]，醇脂質(zhì)體的粒徑分布、平均粒徑以及結(jié)構(gòu)兩年內(nèi)無明顯變化[10]。醇脂質(zhì)體處方組成為乙醇、卵磷脂、雙氯芬酸鈉及水，用乙醇濃度、磷脂濃度、超聲時(shí)間及柔性輔料的用量為因素，試驗(yàn)的結(jié)果表明，四個(gè)影響因素對(duì)透皮控釋貼劑的綜合影響效果為B＞A＞C＞D，根據(jù)評(píng)分，得最佳處方為：A3B2C2D1。用正交實(shí)驗(yàn)法進(jìn)一步篩選優(yōu)化制備雙氯芬酸鈉醇脂質(zhì)體的處方，確定最佳處方為乙醇濃度45%，磷脂濃度為1.0g/100ml，超聲時(shí)間為10min，柔性輔料的用量為6%。使用優(yōu)化后工藝制備的雙氯芬酸鈉透皮控釋貼劑平均包封率為93.26%，平均粒徑為76.53nm。