分子生物學(xué)方法在痰結(jié)核分枝桿菌檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值分析

（安徽省胸科醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 合肥，230000）

結(jié)核病是發(fā)展中國(guó)家流行的一種致死性疾病，現(xiàn)已成為世界嚴(yán)重公共衛(wèi)生問(wèn)題。有研究表明，結(jié)核病的延遲診斷給患者及親密接觸者造成嚴(yán)重不良后果，因此，臨床早期明確診斷具有重要意義[1,2]。由于痰樣本采取較簡(jiǎn)單、易得，是一種常用的檢測(cè)樣本。故本研究中通過(guò)采用三種不同檢查方式檢測(cè)本院306例結(jié)核病患者的痰結(jié)核分枝桿菌，旨在為該疾病患者臨床檢查探討最佳實(shí)驗(yàn)室檢查方案，現(xiàn)將研究結(jié)果報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2018年4月-2019年4月本院診治的306例結(jié)核患者臨床資料，依據(jù)臨床表現(xiàn)及影像學(xué)等檢查確診為肺結(jié)核病患者[3]。按照不同檢查方式分為實(shí)驗(yàn)A組、實(shí)驗(yàn)B組和研究組；本組患者男女比例189:117，年齡 20-75歲，平均（49.36±2.21）歲，臨床主要癥狀表現(xiàn)：盜汗、低熱、體重下降、呼吸道感染等；同時(shí)收集同期臨床108例非結(jié)核病患者痰標(biāo)本，按照不同檢查方式分為對(duì)照A組、對(duì)照B組和研究對(duì)照組。

1.2 方法

1.2.1 采集痰標(biāo)本

采取清晨患者深部咳痰3口分別裝入3個(gè)無(wú)菌標(biāo)本盒內(nèi)，標(biāo)記送檢。

1.2.2 檢查方法

①萋-尼氏抗酸菌涂片染色法[4]；②分枝桿菌快速液體培養(yǎng)法：選擇美國(guó)BD公司液體培養(yǎng)箱和試劑；③FQ-PCR法：使用ABI7500PCR儀，試劑盒為達(dá)安基因結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)試劑盒。

1.3 觀察指標(biāo)

三組痰分枝桿菌檢出率；三組檢出特異性。

2 結(jié)果

2.1 三組痰分枝桿菌檢出數(shù)對(duì)比

實(shí)驗(yàn)B組與研究組的痰分枝桿菌檢出數(shù)均比實(shí)驗(yàn)A組高，其中研究組檢出數(shù)198最高，且高于實(shí)驗(yàn)B組，詳見(jiàn)表1。

表1 三組方法檢測(cè)痰標(biāo)本結(jié)果

2.2 三組方法檢測(cè)檢出率和特異性對(duì)比

實(shí)驗(yàn)B組與研究組檢測(cè)痰分枝桿菌檢出率均顯著高于實(shí)驗(yàn)A組的26.47%，且研究組檢出率64.71%顯著高于實(shí)驗(yàn)B組的40.85%；同時(shí)，用三種方法檢測(cè)108例非結(jié)核病患者痰標(biāo)本發(fā)現(xiàn),研究對(duì)照組檢測(cè)特異性均高于對(duì)照A組和對(duì)照B組，比較差異明顯具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），詳見(jiàn)表2。

表2 三組方法檢出率和特異性對(duì)比

3 討論

結(jié)核病主要是由分枝桿菌引發(fā)的一種以呼吸系統(tǒng)為主的傳染病，是目前嚴(yán)重威脅人類(lèi)生命安全的重要性傳染病[5]。臨床早期檢查及明確診斷利于為結(jié)核病患者建立有效治療方案提供科學(xué)指導(dǎo)，從而提高臨床療效，改善結(jié)核病患者生存質(zhì)量。由此可知，為結(jié)核病患者探索出臨床科學(xué)、有效的檢測(cè)方案是當(dāng)下亟待解決的問(wèn)題，具有重要研究?jī)r(jià)值。

本研究通過(guò)對(duì)比接受抗酸菌涂片染色、培養(yǎng)法以及FQ-PCR法檢查的三組實(shí)驗(yàn)臨床資料，結(jié)果顯示PCR組的痰菌檢出率及特異性均顯著高于其他組，可見(jiàn)，F(xiàn)Q-PCR法檢查痰結(jié)核分枝桿菌操作方法簡(jiǎn)捷、診斷快速、特異性較高，且檢查結(jié)果具有較高的真實(shí)度和可靠性，表明FQ-PCR法對(duì)結(jié)核分枝桿菌的快速檢測(cè)具重要意義[6]?？顾峋科旧珯z查雖然方法簡(jiǎn)單，但是實(shí)際應(yīng)用中難以達(dá)到臨床需求；分枝桿菌快速液體培養(yǎng)法要求較高，且等待時(shí)間長(zhǎng)，在實(shí)際應(yīng)用中存在一定局限性。由此可知，F(xiàn)Q-PCR檢查技術(shù)具有重要的推廣應(yīng)用價(jià)值，更容易被患者接受和使用[7-8]。

綜上所述，F(xiàn)Q-PCR技術(shù)檢測(cè)痰結(jié)核分枝桿菌具有較高陽(yáng)性檢出率，檢測(cè)特異性較高，臨床操作簡(jiǎn)捷，并且克服了其他檢測(cè)方法的一些缺點(diǎn)，具有臨床實(shí)際應(yīng)用價(jià)值，是一種值得推薦和推廣的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)，可以作為結(jié)核病常規(guī)檢測(cè)方案。