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    原發(fā)性閉角型青光眼患者房水和血漿β-內(nèi)啡肽的研究

    2020-05-18 13:18:12馮旭孫紅
    臨床眼科雜志 2020年2期
    關(guān)鍵詞:房水內(nèi)啡肽眼壓

    馮旭 孫紅

    臨床上對(duì)于青光眼的發(fā)病機(jī)制和眼壓調(diào)控機(jī)制的研究,目前關(guān)注較多的仍是其解剖結(jié)構(gòu),聚焦于眼球局部。從理論上看眼睛應(yīng)該和全身其它器官一樣受中樞、內(nèi)分泌體液的統(tǒng)一調(diào)節(jié)。已有一些文獻(xiàn)推測(cè)青光眼的發(fā)病和眼壓調(diào)控與內(nèi)分泌體液代謝有關(guān)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)嗎啡有顯著的劑量依賴的降眼壓作用,并且眼前段存在阿片受體[1]。β-內(nèi)啡肽(β-endorphin,β-EP)是人體中內(nèi)源性嗎啡樣物質(zhì)的一種,作為神經(jīng)激素和調(diào)制物質(zhì)參予許多生理功能的調(diào)節(jié),在眼壓的調(diào)節(jié)中可能起著重要作用。目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于β-內(nèi)啡肽與青光眼的研究還不是很多。本實(shí)驗(yàn)旨在探討β-內(nèi)啡肽是否與青光眼眼壓相關(guān)。

    資料與方法

    一、實(shí)驗(yàn)對(duì)象

    1.16只18~43 歲健康新鮮離體人眼球。

    2.10例(10只眼)原發(fā)性閉角型青光眼(primary angle-closure glaucoma,PACG)急性發(fā)作期高眼壓狀態(tài)患者和10例(10只眼)白內(nèi)障手術(shù)患者。PACG急性發(fā)作期高眼壓狀態(tài)患者男性4例,女性6例,年齡49~85歲,平均(67.18±10.13)歲,白內(nèi)障手術(shù)患者男性5例,女性5例,年齡55~82歲,平均(70.54±12.10)歲。均否認(rèn)有全身疾病史和其他眼病史。

    二、實(shí)驗(yàn)方法

    1.健康新鮮離體人眼球4 ℃濕房保存,于24 h 之內(nèi)仔細(xì)分離虹膜、睫狀體、脈絡(luò)膜、玻璃體和視網(wǎng)膜,虹膜、睫狀體、脈絡(luò)膜和視網(wǎng)膜稱重后各取25 mg ,玻璃體取0.5 ml,加入300 μl的裂解液充分勻漿13000 rpm,10 min×3次,經(jīng)10000 rpm 離心10 min ,取上清液置-70 ℃冰箱保存,于2個(gè)月內(nèi)行β-內(nèi)啡肽放射免疫技術(shù)檢測(cè)。

    2.對(duì)PACG患者和白內(nèi)障患者,分別抽取血液2 ml和房水0.1 ml。血液抽出后立即注入EDTA管中,1000 rpm離心20 min,收集血漿置于-20 ℃冰箱中,采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)法測(cè)定血漿β-內(nèi)啡肽含量。房水采集方法:PACG組于前房穿刺降眼壓時(shí)抽取,或在高眼壓狀態(tài)下手術(shù)時(shí)抽取,白內(nèi)障組于白內(nèi)障手術(shù)中切開前房前穿刺抽吸,抽出的房水立即置于-70 ℃冰箱保存,于2個(gè)月內(nèi)行β-內(nèi)啡肽放射免疫技術(shù)檢測(cè)。

    三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    結(jié) 果

    一、健康新鮮離體人眼球眼內(nèi)各標(biāo)本中β-內(nèi)啡肽含量

    結(jié)果提示,正常新鮮離體人眼球的虹膜、睫狀體、脈絡(luò)膜、玻璃體和視網(wǎng)膜中均有β-內(nèi)啡肽存在。見表1。

    二、β-內(nèi)啡肽含量測(cè)定結(jié)果

    表1 β-內(nèi)啡肽在正常新鮮離體人眼組織中的含量

    房水標(biāo)本中β-內(nèi)啡肽含量放射免疫測(cè)定結(jié)果:白內(nèi)障組為(173.20±21.31)pg/mL,PACG組為(106.69±14.07)pg/ mL。白內(nèi)障組房水β-內(nèi)啡肽含量明顯高于PACG組,t=2.254,P<0.05,差異有顯著性。

    血漿β-內(nèi)啡肽含量酶聯(lián)免疫法測(cè)定結(jié)果:白內(nèi)障組為(14.98±4.02)ng/mL,PACG組為(10.22±3.20)ng/mL。白內(nèi)障組血漿β-內(nèi)啡肽含量明顯高于PACG組,t=-2.271,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

    討 論

    眼睛作為整個(gè)機(jī)體的一部分,應(yīng)該和全身其它器官一樣受中樞、內(nèi)分泌體液的統(tǒng)一調(diào)節(jié)。那么我們推測(cè)眼壓的調(diào)控可能也存在著機(jī)體內(nèi)分泌體液的調(diào)節(jié)。臨床上我們發(fā)現(xiàn)很多青光眼患者當(dāng)一眼眼壓下降后,另一眼也出現(xiàn)了眼壓下降的現(xiàn)象,可能就和體內(nèi)某些物質(zhì)的改變有關(guān),具體的物質(zhì)還不明了。已有一些文獻(xiàn)推測(cè)青光眼的發(fā)病、眼壓調(diào)控與內(nèi)分泌體液代謝有關(guān),目前研究的比較多的是心鈉素。我們?cè)?jīng)做過人眼房水心鈉素含量與PACG關(guān)系的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)正常人眼房水、葡萄膜及玻璃體組織中均有心鈉素的存在:青光眼組患者房水中心鈉素含量明顯高于對(duì)照組。除了心鈉素是否還有其他的物質(zhì)參與調(diào)節(jié)呢?

    已經(jīng)有文獻(xiàn)報(bào)道發(fā)現(xiàn)嗎啡有顯著的劑量依賴的降眼壓作用。Bonfiglio V等用不同濃度的嗎啡注射入新西蘭白兔單側(cè)眼的結(jié)膜囊,發(fā)現(xiàn)嗎啡有顯著的劑量依賴的降眼壓和縮小瞳孔直徑的作用,這種作用可以被納絡(luò)酮(非選擇性阿片受體拮抗劑)抵消,表明了阿片肽的降眼壓作用;該實(shí)驗(yàn)還表明兔眼前段存在阿片受體[1]。另有文獻(xiàn)報(bào)道使用β-內(nèi)啡肽點(diǎn)眼,可以引起虹膜根部睫狀體褪黑素水平的下降,推測(cè)β-內(nèi)啡肽對(duì)于治療青光眼是有用的[2]。

    β-內(nèi)啡肽是人體中內(nèi)源性嗎啡樣物質(zhì)的一種,是來源于阿片促黑素皮質(zhì)激素原(POMC)的一種重要激素,與腦啡肽、強(qiáng)啡肽共同組成阿片肽家族。它是由腦垂體和脊椎動(dòng)物的丘腦下部所分泌的氨基化合物(肽)。它在體內(nèi)的分布是廣泛的,具有特異性受體,即μ-阿片肽受體。β-內(nèi)啡肽能與μ-阿片肽受體結(jié)合,產(chǎn)生跟嗎啡、鴉片劑一樣的止痛和欣快感,具有很強(qiáng)的鎮(zhèn)痛效應(yīng);能促進(jìn)生長(zhǎng)素、催乳素、生長(zhǎng)抑素和胰高血糖素的釋放等;對(duì)動(dòng)物攝食行為有促進(jìn)作用;與體溫調(diào)節(jié)有關(guān),并可視為免疫反應(yīng)的生理調(diào)節(jié)因子,在中樞神經(jīng)與免疫系統(tǒng)間起著體液傳遞介質(zhì)的作用,調(diào)節(jié)機(jī)體許多生理功能[3]。少量的一些資料表明β-內(nèi)啡肽和眼壓的變化有關(guān)。Chu TC[4]等研究了電針刺激的降眼壓作用,在眼壓下降的同時(shí)房水中的去甲腎上腺素和多巴胺水平也下降,而房水中內(nèi)啡肽水平上升了8倍,電針引起的眼壓下降可以被納絡(luò)酮事先應(yīng)用抵消,表明眼壓的下降可能和內(nèi)啡肽有關(guān)[4]。目前有限的文獻(xiàn)都是在正常眼壓的狀態(tài)下研究得出的結(jié)論,那么對(duì)于高眼壓狀態(tài)下兩者又是什么關(guān)系呢?目前也沒有涉及到β-內(nèi)啡肽與青光眼關(guān)系研究的文獻(xiàn)。因此,本實(shí)驗(yàn)主要研究PACG患者高眼壓狀態(tài)時(shí)房水和血漿β-內(nèi)啡肽含量與單純老年性白內(nèi)障患者是否有區(qū)別,從而探討人眼房水、血漿β-內(nèi)啡肽含量與PACG關(guān)系。

    本課題早期研究[5],在兔眼內(nèi)注射某種物質(zhì)制備實(shí)驗(yàn)性兔青光眼模型,6只家兔血漿β-內(nèi)啡肽濃度在造模后4 h和8 h時(shí)血漿β-內(nèi)啡肽濃度明顯高于造模前水平,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),而4 h和8 h時(shí)血漿β-內(nèi)啡肽濃度相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05),造模后24 h時(shí)血漿β-內(nèi)啡肽濃度與造模前相比,沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示血漿β-內(nèi)啡肽含量與眼壓呈正向直線相關(guān),說明眼壓升高可以引起血漿β-內(nèi)啡肽濃度的升高。但具體機(jī)制是什么?是眼壓高引起疼痛等其他原因?qū)е卵獫{β-內(nèi)啡肽濃度的升高還是高眼壓自身原因?qū)е碌难獫{β-內(nèi)啡肽濃度的升高。有文獻(xiàn)評(píng)價(jià)β-內(nèi)啡肽在內(nèi)源性大麻素受體2(cannabinoid receptor2,CB2)介導(dǎo)的抗傷害性刺激(如疼痛、焦慮、青光眼、惡心、肌肉痙攣及消瘦病)中是必須的[6],說明并不是只有疼痛才會(huì)導(dǎo)致β-內(nèi)啡肽濃度的升高。

    在人體方面,對(duì)PACG目前關(guān)注較多的還是其解剖因素。但具備上述解剖特征者不一定都發(fā)生青光眼。它在情緒激動(dòng)、過勞、寒冷等誘發(fā)因素下急性發(fā)作,故而推測(cè)其發(fā)病還與內(nèi)分泌及體液代謝失衡有關(guān)。為了了解β-內(nèi)啡肽與青光眼的關(guān)系,本實(shí)驗(yàn)比較分析了PACG患者高眼壓狀態(tài)時(shí)房水和血漿β-內(nèi)啡肽含量與年齡相關(guān)性白內(nèi)障患者是否有區(qū)別,結(jié)果顯示,正常人眼葡萄膜、玻璃體及視網(wǎng)膜組織中均有β-內(nèi)啡肽的存在,PACG組急性大發(fā)作高眼壓狀態(tài)下患者房水、血漿中β-內(nèi)啡肽含量明顯低于白內(nèi)障組(P<0.05),而且房水中和血漿中β-內(nèi)啡肽濃度同步下降。說明β-內(nèi)啡肽含量的高低和PACG的急性發(fā)作是有關(guān)的,到底哪個(gè)是因哪個(gè)是果?β-內(nèi)啡肽是如何參與到青光眼的病程中?是參與發(fā)病機(jī)制,β-內(nèi)啡肽濃度的降低導(dǎo)致眼壓的升高?還是β-內(nèi)啡肽濃度參與青光眼眼壓的調(diào)控中,在眼壓升高的過程中為了降低眼壓而消耗β-內(nèi)啡肽導(dǎo)致其濃度降低?具體機(jī)制不詳。有一篇文獻(xiàn)報(bào)道電針降低眼壓的同時(shí)β-內(nèi)啡肽濃度上升了8倍,房水生成降低,從而推斷針灸治療青光眼的治療作用可能是通過降低房水生成來實(shí)現(xiàn)的,其機(jī)制可能是通過抑制交感神經(jīng)系統(tǒng)的活性和β-內(nèi)啡肽水平升高而介導(dǎo)的[4]。那么β-內(nèi)啡肽就可能參與青光眼降眼壓的機(jī)制,參與眼壓的調(diào)控,降眼壓的機(jī)制可能就是通過減少房水生成來實(shí)現(xiàn)的。

    一些文獻(xiàn)描述了有關(guān)眼壓神經(jīng)內(nèi)分泌激素可能的調(diào)控機(jī)制。眼壓受房水的產(chǎn)生與流出的平衡調(diào)控,正常眼壓狀態(tài)下,房水流出的變化并不參與眼壓一日內(nèi)的波動(dòng),房水產(chǎn)生的變化與眼壓波動(dòng)有著密切關(guān)系,房水產(chǎn)生的晝夜性節(jié)律信息的傳導(dǎo)途徑是通過交感神經(jīng)實(shí)現(xiàn)的[7,8]。正常狀態(tài)下房水的產(chǎn)生決定了眼壓的高低并受神經(jīng)內(nèi)分泌激素的調(diào)節(jié)。如果β-內(nèi)啡肽降眼壓的機(jī)制是通過減少房水生成來實(shí)現(xiàn),那么β-內(nèi)啡肽就可能參與眼壓晝夜節(jié)律的調(diào)節(jié),影響眼壓一日內(nèi)的波動(dòng)。另有文獻(xiàn)報(bào)道β-內(nèi)啡肽濃度改變能導(dǎo)致虹膜根部睫狀體褪黑素水平的下降[2],而褪黑素調(diào)控著眼壓的節(jié)律,也說明了β-內(nèi)啡肽參與眼壓晝夜節(jié)律的調(diào)節(jié)的可能性。有文獻(xiàn)報(bào)道β-內(nèi)啡肽在CB2介導(dǎo)的抗傷害性刺激(如疼痛、焦慮、青光眼、惡心、肌肉痙攣及消瘦病)中是必須的。由此可見,β-內(nèi)啡肽對(duì)于正常眼壓的調(diào)控起著很重要的作用,當(dāng)β-內(nèi)啡肽濃度改變就有可能引起正常眼壓及其眼壓波動(dòng)、眼壓節(jié)律的改變,這也是正常眼壓性青光眼的可能發(fā)病機(jī)制。β-內(nèi)啡肽有可能參與正常眼壓性青光眼的發(fā)病機(jī)制和眼壓調(diào)控,這需要我們進(jìn)一步去研究證實(shí)。

    總之,β-內(nèi)啡肽的含量與眼壓的高低有關(guān),在眼壓的調(diào)控中可能起著一定的作用,然而具體機(jī)制尚不清楚,但結(jié)果是令人鼓舞的,值得進(jìn)一步深入研究。

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