生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測與影響因素分析

天津醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腫瘤科 （天津 300211）

內(nèi)容提要： 目的：分析生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測與影響因素。方法：采用平板自然沉降法收集生物安全柜內(nèi)外空氣細(xì)菌，將在生物安全柜內(nèi)實(shí)驗(yàn)操作前準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)可能用到的材料，避免頻繁出入房間的和生物安全柜操作窗口的作為觀察組，將沒有特別要求的作為對照組，并將兩組分別分為生物安全柜內(nèi)消毒凈化空氣的BSC區(qū)和柜外周邊消毒區(qū)域的外周區(qū)，分別進(jìn)行生物安全柜工作后10min、20min、40min以及60min的空氣細(xì)菌數(shù)對比分析。結(jié)果：觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)均明顯少于周邊區(qū)（P＜0.05）；觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)無明顯差異（P＞0.05）；觀察組對對照組各個(gè)時(shí)間段外周區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)存在顯著差異（P＜0.05）。結(jié)論：生物安全柜在動(dòng)態(tài)條件下可以有效保證柜內(nèi)空氣的清潔和細(xì)菌數(shù)量的穩(wěn)定性，不會(huì)隨著采樣次數(shù)的增加而出現(xiàn)細(xì)菌數(shù)有所增加的趨勢，人員活動(dòng)并不會(huì)對空氣安全柜內(nèi)空氣的清潔造成影響。

在我國醫(yī)學(xué)技術(shù)高速發(fā)展的今天，在細(xì)菌學(xué)監(jiān)測和鑒定過程中所運(yùn)用的儀器，也越來越豐富和先進(jìn)，生物安全柜就是科學(xué)技術(shù)高速發(fā)展的產(chǎn)物之一，這一新型儀器的出現(xiàn)與使用成為了醫(yī)療團(tuán)隊(duì)和機(jī)構(gòu)的主流[1]。在醫(yī)院進(jìn)行多種類型的實(shí)驗(yàn)操作過程中，可能會(huì)因?yàn)閴毫Σ畹漠a(chǎn)生而導(dǎo)致氣溶膠擴(kuò)散，使得實(shí)驗(yàn)室內(nèi)得菌落失衡，造成再次感染，尤其是對于敏感性相對較高的細(xì)菌來說，它們屬于實(shí)驗(yàn)室的危險(xiǎn)物，應(yīng)該在一個(gè)較為安全的地方進(jìn)行儲(chǔ)存，生物安全柜就是可以儲(chǔ)存高敏感性細(xì)菌的一個(gè)安全性相對較高的地方，其可以阻斷外來細(xì)菌的感染，對于空氣污染的監(jiān)測也有著相對較高的準(zhǔn)確性[2,3]。在生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下也就是工作的情況下柜內(nèi)以及室內(nèi)的空氣與靜止時(shí)是有所不同的，因此，為了更好地分析生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測水平與效果就應(yīng)該進(jìn)行相關(guān)的實(shí)驗(yàn)與分析，相關(guān)內(nèi)容如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

本次實(shí)驗(yàn)研究所需要的材料分別包括工作狀態(tài)下生物安全柜內(nèi)的空氣、工作狀態(tài)下生物安全柜外被封閉外圍房間消毒、凈化后的空氣以及規(guī)格為90mm的平板培養(yǎng)皿數(shù)個(gè)。

1.2 方法

采用平板自然沉降法收集生物安全柜內(nèi)外空氣細(xì)菌，將在生物安全柜內(nèi)實(shí)驗(yàn)操作前準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)可能用到的材料，避免頻繁出入房間的和生物安全柜操作窗口的作為觀察組，將沒有特別要求的作為對照組，并將兩組分別分為生物安全柜內(nèi)消毒凈化空氣的BSC區(qū)和柜外周邊消毒區(qū)域的外周區(qū)。

在生物安全柜內(nèi)以及外周區(qū)域的四個(gè)角和中心點(diǎn)分別放置規(guī)格為90mm的平板培養(yǎng)皿，并對下降的氣流點(diǎn)進(jìn)行注意，避免放置平板培養(yǎng)皿的位置與其偏離過遠(yuǎn)，讓空氣自然沉降于規(guī)格為90mm的平板培養(yǎng)皿重，并保證細(xì)菌培養(yǎng)環(huán)境的溫度在36oC，細(xì)菌培養(yǎng)的時(shí)間為48h，對生物安全柜工作后10min、20min、40min以及60min BSC區(qū)以及外周區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。

1.3 觀察指標(biāo)

本次實(shí)驗(yàn)研究中兩組觀察指標(biāo)分別為生物安全柜工作后10min、20min、40min以及60min的BSC區(qū)與周邊區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

收集有關(guān)于兩組生物安全柜工作后各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)與周邊區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)，并借助SPSS20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件完成數(shù)據(jù)的處理與分析，采用±s對不同時(shí)間段空氣細(xì)菌數(shù)進(jìn)行表示，行t檢驗(yàn)，如果P＜0.05則表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。

2.結(jié)果

通過實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)和分析發(fā)現(xiàn)，觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)均明顯少于周邊區(qū)（P＜0.05）；觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)無明顯差異（P＞0.05）；觀察組對對照組各個(gè)時(shí)間段外周區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)存在顯著差異（P＜0.05）。詳見表1。

3.討論

生物安全柜是目前臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用較多的一種具有較高細(xì)菌保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)設(shè)備，同時(shí)也是箱型超凈負(fù)壓裝置，主要由特殊氣流組織結(jié)構(gòu)以及高效空氣過濾器組成，這一實(shí)驗(yàn)設(shè)備可以較好地保護(hù)被檢測細(xì)菌的穩(wěn)定性，避免受到外界環(huán)境的干擾，其最為常見的應(yīng)用就是對危害大、感染性強(qiáng)的細(xì)菌的保護(hù)，有相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究了生物安全柜對于易感染、危害大細(xì)菌的保護(hù)作用，并肯定了其空氣污染監(jiān)測的準(zhǔn)確性，但是對于動(dòng)態(tài)條件下其柜內(nèi)、外空氣質(zhì)量的分析較少，應(yīng)該對生物安全柜動(dòng)態(tài)條件下空氣細(xì)菌污染監(jiān)測與影響因素進(jìn)行分析[4]。

生物安全柜有相關(guān)操作窗口與周邊區(qū)域的空氣相流通，但是生物安全柜內(nèi)的負(fù)壓凈化系統(tǒng)可以保證柜內(nèi)的空氣并不會(huì)受到人員流動(dòng)、實(shí)驗(yàn)物品進(jìn)出以及柜內(nèi)接種、加樣、混勻等相關(guān)實(shí)驗(yàn)操作的影響，并不會(huì)因?yàn)橥饨绛h(huán)境的影響而出現(xiàn)空氣質(zhì)量變化，可以始終保持相對較為潔凈的狀態(tài)[5]。但是在使用生物安全柜的過程中，也應(yīng)該注意應(yīng)該盡可能保證生物安全柜的處理封閉隔離的位置，遠(yuǎn)離人員通道和潛在氣流干擾，并做好生物安全柜的日常維護(hù)，準(zhǔn)確測量其氣流速度和負(fù)壓，同時(shí)，使用前后應(yīng)該徹底清洗、消毒，在此基礎(chǔ)上使用生物安全柜前也可以通過讓其凈化系統(tǒng)運(yùn)行10min的方式來凈化和排除受到污染的空氣，實(shí)驗(yàn)操作方向應(yīng)該是以從清潔區(qū)到污染區(qū)為基本原則，從而為生物安全柜內(nèi)空氣的潔凈和細(xì)菌數(shù)目的穩(wěn)定提供基礎(chǔ)以及保證[6]。通過實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)和分析發(fā)現(xiàn)，觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)的空氣細(xì)菌數(shù)均明顯少于周邊區(qū)（P＜0.05）；觀察組與對照組各個(gè)時(shí)間段BSC區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)無明顯差異（P＞0.05）；觀察組對對照組各個(gè)時(shí)間段外周區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)存在顯著差異（P＜0.05）。

綜上所述，生物安全柜在動(dòng)態(tài)條件下可以有效保證柜內(nèi)空氣的清潔和細(xì)菌數(shù)量的穩(wěn)定性，不會(huì)隨著采樣次數(shù)的增加而出現(xiàn)細(xì)菌數(shù)有所增加的趨勢，人員活動(dòng)并不會(huì)對空氣安全柜內(nèi)空氣的清潔造成影響。

表1. 對比分析兩組不同時(shí)間段BSC區(qū)與外周區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)(±s,cfu/m3)

表1. 對比分析兩組不同時(shí)間段BSC區(qū)與外周區(qū)空氣細(xì)菌數(shù)(±s,cfu/m3)

組別 區(qū)域 10min 20min 40min 60min觀察組 BSC區(qū) 146.58±53.62 149.54±49.68 148.57±55.21 150.66±45.32外周區(qū) 556.54±99.6 487.65±96.54 497.52±89.35 449.68±94.85對照組 BSC區(qū) 156.98±53.2 160.32±88.55 159.87±61.23 158.57±64.52外周區(qū) 678.45±87.42 563.32±66.59 687.54±98.66 585.62±76.88