白花蛇舌草注射液在中晚期肺腺癌治療中的作用及對(duì)血清中miR-155的影響研究

唐洪成 羅剛 和平海 武偉華 李巖

[摘要] 目的 探討中晚期肺腺癌患者輔助應(yīng)用白花蛇舌草注射液的臨床效果，關(guān)注其對(duì)血清中miR-155的影響。方法方便選擇該院2018年1—12月收治的82例中晚期肺腺癌患者，按入院順序分為觀察組（41例）和對(duì)照組（41例），對(duì)照組應(yīng)用順鉑聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱治療，觀察組在上述基礎(chǔ)上加用白花蛇舌草注射液進(jìn)行治療，治療2個(gè)周期觀察療效，同時(shí)關(guān)注治療前、后血清中微小RNA-155（miR-155）的表達(dá)水平。結(jié)果 觀察組共38例、對(duì)照組共38例完成治療及觀察。兩組治療總有效率﹙55.3% vs 28.9%﹚，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.398，P=0.020）。兩組在骨髓抑制（26.3% vs 48.6%），（χ2=3.996，P=0.046）及嘔吐III和IV度（23.7% vs 55.3%），（χ2=7.930，P=0.005）的發(fā)生率比較中有差異統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。治療后兩組血清中miR-155的表達(dá)均下降，但是觀察組的下降值明顯高于對(duì)照組（t=4.020，P=0.012）。結(jié)論 中晚期肺腺患者在順鉑聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱治療方案的基礎(chǔ)上積極應(yīng)用白花蛇舌草注射液，臨床效果明顯，可降低化療的不良反應(yīng)，并能有效下調(diào)血清中miR-155的含量，臨床中可以積極應(yīng)用。

[關(guān)鍵詞]白花蛇舌草注射液;中晚期肺腺癌;miR-155;臨床療效

[中圖分類號(hào)] R737? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1674-0742（2020）01（b）-0020-03

The Role of Hedyotis Diffusa Injection in the Treatment of Advanced Lung Adenocarcinoma and Its Effect on Serum miR-155

TANG Hong-cheng， LUO Gang， HE Ping-hai， WU Wei-hua， LI Yan

Department of Oncology， Beijing Zhenguo Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine， Yizhuang， Beijing， 100176 China

[Abstract] Objective To investigate the clinical effect of adjuvant application of Herba Hedyotis extract in patients with advanced lung adenocarcinoma， and to observe its effect on serum miR-155. Methods Convenient selection eighty-two patients with advanced lung adenocarcinoma from January to December 2018 were enrolled in our hospital. They were divided into observation group （41 cases） and control group （41 cases）. The control group was treated with cisplatin combined with vinorelbine. The observation group was treated with Hedyotis diffusa injection on the above basis. The therapeutic effect was observed in two cycles， and the expression level of microRNA-155 （miR-155） in the serum before and after treatment was also considered. Results A total of 38 patients in the observation group and 38 patients in the control group were treated and observed. The total effective rate of the two groups （55.3% vs 28.9%） ，the difference was statistically significant （χ2=5.398， P=0.020）. There was a statistically significant difference between the two groups in the incidence of myelosuppression （26.3% vs 48.6%），（χ2=3.996， P=0.046） and vomiting III and IV （23.7% vs 55.3%），（χ2=7.930， P=0.005）. The expression of miR-155 in the serum of both groups decreased after treatment， but the decrease of the observation group was significantly higher than that of the control group （t=4.020， P=0.012）. Conclusion The patients with advanced lung adenocarcinoma are actively applied to the treatment of Herba Hedyotis extract on the basis of cisplatin combined with vinorelbine treatment. The clinical effect is obvious， which can reduce the adverse reactions of chemotherapy and effectively down-regulate the content of miR-155 in serum. It can be actively applied in clinical practice.

[Key words] Hedyotis diffusa injection; Advanced lung adenocarcinoma; miR-155; Clinical efficacy

肺腺癌臨床常見的惡性腫瘤，化療是重要的治療方法，但是其療效不確定，且不良反應(yīng)多。白花蛇舌草注射液近年應(yīng)用于腫瘤治療中的藥物，對(duì)提高化療藥物的敏感性及減少不良反應(yīng)均有重要作用[1]。近年學(xué)者也觀察到肺腺癌病變形成和進(jìn)展時(shí)血清和內(nèi)環(huán)境中形成較多的細(xì)胞因子[2]。微小RNA（miRNAs）是與腫瘤形成和進(jìn)展相關(guān)的因子，其表達(dá)升高不僅促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展，還對(duì)療效判斷及預(yù)后評(píng)估有重要價(jià)值[3]。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用TCGA軟件對(duì)肺腺癌患者血清中miRNAs的表達(dá)進(jìn)行篩查，選擇與肺腺癌關(guān)聯(lián)性最強(qiáng)且可能與中藥治療相關(guān)的miR-155進(jìn)行相實(shí)驗(yàn)?；诖?，該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用前瞻性研究，方便選擇2018年1—12月2共82例在該院診治的中晚期肺腺癌患者，應(yīng)用對(duì)照研究，觀察在順鉑聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱（NP）方案基礎(chǔ)上加用白花蛇舌草注射液治療的效果及對(duì)血清中miR-155的影響，以期為臨床治療提供幫助，報(bào)道如下。

1? 資料與方法

1.1? 一般資料

方便收集在該院治療的肺腺癌患者82例作為對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①有病理學(xué)或細(xì)胞學(xué)證實(shí)符合肺腺癌的明確診斷，患者為中晚期;②有可測(cè)量的病灶;③無(wú)其他明顯的嚴(yán)重疾病;④肝腎功能指標(biāo)不超過(guò)正常值2倍;⑤白細(xì)胞4.0×109/L，血小板>100×109/L，無(wú)出血傾向;⑥體力狀況尚好，KPS評(píng)分≥60分，無(wú)其他明顯禁忌證。排除標(biāo)準(zhǔn)：①診斷不明確或病理類型中混有其它類型腫瘤;②臨床病灶不可測(cè)量;③依從性差;④有嚴(yán)重的其他器官的內(nèi)科疾病。該組中男44例，女38例，年齡40～88歲，平均﹙61.4±8.5﹚歲。按患者入院順序編號(hào)，單號(hào)為觀察組，雙號(hào)為對(duì)照組，各41例。觀察組男21例，女20例，年齡40～86歲，平均年齡﹙61.1±7.5﹚歲。對(duì)照組男23例，女18例，年齡41～88歲，平均年齡﹙61.7±8.9﹚歲。兩組在性別、年齡等常規(guī)因素的比較中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者或家屬簽定知情同意書。

1.2? 治療方法

對(duì)照組確診后采用順鉑聯(lián)合酒石酸長(zhǎng)春瑞濱（NP）方案，應(yīng)用經(jīng)皮支氣管動(dòng)脈內(nèi)灌注化療術(shù)。酒石酸長(zhǎng)春瑞濱注射液（規(guī)格：10 mg， 國(guó)藥準(zhǔn)字：H20067722），用量25 mg/m2，d1動(dòng)脈灌注，21d一周期。注射用順鉑（凍干型，規(guī)格：20 mg， 國(guó)藥準(zhǔn)字：H20023460），用量75 mg/m2，d1動(dòng)脈灌注，分別溶于0.9%的生理鹽水250 mL中于第1天動(dòng)脈灌注。觀察組在上述基礎(chǔ)上加用白花蛇舌草注射液（ 國(guó)藥準(zhǔn)字：Z22022101）肌內(nèi)注射， 2次/d，每4 mL。積極對(duì)癥處理相關(guān)并發(fā)癥。以21 d作為一個(gè)周期。共治療2個(gè)周期后觀察療效。

1.3? 療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

兩組均在2個(gè)周期后進(jìn)行評(píng)價(jià)，依據(jù)WHO實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)新標(biāo)準(zhǔn)，即完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、無(wú)變化（NC）和進(jìn)展（PD）。以CR和PR評(píng)定為有效，計(jì)算總有效率。

1.4? miR-155的檢測(cè)

觀察組患者于確診后（治療前）、治療2個(gè)周期期結(jié)束后的1周內(nèi)抽取3 mL空腹靜脈血，3 000 r/min 離心20 min分離血清，-20℃冰箱中凍存?zhèn)溆?。血清?biāo)本均于1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)。miR-155的檢測(cè)應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法。引物合成由上海吉瑪科技有限公司完成。引物上游：5'-TACTGGTGGACGTTTAG-3'，下游：5'-TCATGCGCAAACCCTA-3'。U6為內(nèi)參。引物上游：5'-GGAACAGAGAAAGAGC-3'下游：5'-TTGGAATTC AATTCCG-3'。應(yīng)用TRIzol法提取總RNA，檢測(cè)RNA濃度，cDNAs由TaqMan MicroRNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成。miR-155試劑購(gòu)自美國(guó)Initrogen公司。PCR循環(huán)參數(shù)：95℃ 10 min，循環(huán)1次;95℃ 30s，59℃ 30 s，72℃ 30s，共35個(gè)循環(huán)，72℃延伸7min。在60℃時(shí)收集信號(hào)。記錄Ct值，通過(guò)2-ΔΔCt法計(jì)算目的基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.5? 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析， 計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2? 結(jié)果

2.1? 兩組療效比較

觀察組38例（1例死亡，2例改變治療藥物，排除觀察）、對(duì)照組38例（2例改變治療藥物，1例轉(zhuǎn)院，排除觀察）完成治療及觀察。觀察組的總有效率明顯高于對(duì)照組，見表1。

2.2? 兩組不良反應(yīng)發(fā)生率的比較

兩組在骨髓抑制及嘔吐III和IV度的發(fā)生率比較中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），見表2。兩組在肝功能損害[2/38（5.3%） vs 3/38（7.9%），χ2=0.214， P=0.644]、腎功能損害發(fā)生率[3/38（7.9%） vs 4/38（10.4%），χ2=0.157， P=0.692]的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

2.3? 兩組治療前、后血清中miR-155變化的比較

兩組治療前血清中miR-155的表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），治療后兩組血清中的表達(dá)均下降，但是觀察組的下降值更明顯。見表3、圖1。

3? 討論

肺腺癌是發(fā)生于肺泡上皮細(xì)胞的腫瘤，部分患者發(fā)現(xiàn)時(shí)即為中晚期，并伴有轉(zhuǎn)移及胸腔積液，預(yù)后較差。標(biāo)準(zhǔn)的治療方案對(duì)緩解癥狀及延緩腫瘤進(jìn)展有重要意義。臨床上常應(yīng)用含鉑的多藥聯(lián)合治療方案為著選[4]，近年來(lái)順鉑聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱逐漸得到認(rèn)可。順鉑起作用時(shí)與腫瘤細(xì)胞中的鳥嘌呤進(jìn)行結(jié)合，使用DNA交聯(lián)出現(xiàn)異常，引起其結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，發(fā)揮殺滅腫瘤細(xì)胞的作用。長(zhǎng)春瑞濱抗腫瘤作用是在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過(guò)核苷激酶作用轉(zhuǎn)化，使DNA 合成終止、斷裂直至細(xì)胞死亡，達(dá)到抗腫瘤的目的。但是常規(guī)化療藥物治療的有效性及不良反應(yīng)仍是臨床需要解決的問(wèn)題，治療后機(jī)體的化學(xué)損傷也較明顯。中藥制劑的輔助治療對(duì)對(duì)化療效果起到增效的作用。

該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示應(yīng)用白花蛇舌草地注射液后治療的總有效率為55.3%，明顯高于對(duì)照組的總有效率28.9%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示治療效果明顯。這與王露瑤等[5]觀察到的白花蛇舌草注射液在腫瘤治療中的總有效率為54.2%、對(duì)照組中的總有效率37.5%的結(jié)果相似。結(jié)果顯示觀察組在骨髓抑制III和IV度（26.3%）及嘔吐III和IV度（23.7%）的發(fā)生率明顯低于對(duì)照組（發(fā)生率分別為48.6%、55.3%），提示白花蛇舌草能減少化療物治療時(shí)對(duì)骨髓和消化系統(tǒng)的影響。白花蛇舌草是近年關(guān)注的與腫瘤治療相關(guān)的藥物，最早于《廣西中藥志》中有記錄，藥性味苦、寒、甘，且入心、脾、肝三經(jīng)，藥物具有解毒清熱、利水消腫和止痛的作用。中藥注射劑常用于惡性腫瘤的治療[6-7]。腫瘤患者應(yīng)用能減少毒副作用、安全、功效顯著。白花蛇舌草對(duì)提高機(jī)體免疫力有明顯作用，主要表現(xiàn)為其能提高荷瘤鼠細(xì)胞的免疫功能，提高B 細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫功能，使T細(xì)胞亞群的功能活化，也有研究認(rèn)為白花蛇舌草能發(fā)揮荷瘤鼠抑瘤的作用，其中14.84 g/kg抑瘤作用最好[8]，并能使綜合的免疫功能得到明顯提升，使機(jī)體的抗腫瘤的作用增強(qiáng)。腫瘤形成和進(jìn)展時(shí)局部腫瘤組織和血清中miR-155的表達(dá)均升高，該研究顯示兩組肺腺癌治療前的表達(dá)量分別為﹙2.79±0.35﹚、﹙2.82±0.36﹚，這與龔星[9]通過(guò)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)肺癌患者血清中miR-155的表達(dá)量為2.16±0.85的結(jié)果相類似，而治療后二組miR-155的表達(dá)量下降到﹙1.34±0.37﹚、﹙2.01±0.27﹚，此結(jié)果較龔星[9]研究中顯示的正常人群中﹙0.74±0.36﹚的表達(dá)量要高，提示治療可以下調(diào)血清中miR-155的含量。白花蛇舌草注射液應(yīng)用組的下調(diào)效果更明顯[觀察組下降值為﹙1.45±0.29﹚，對(duì)照組下降值為﹙0.81±0.27﹚ ]，可以優(yōu)化內(nèi)環(huán)境和血清中細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)環(huán)境，但是均未將miR-155的調(diào)節(jié)到正常范圍。因此miR-155是重要的癌基因，特定的干預(yù)使其表達(dá)下調(diào)可能對(duì)控制腫瘤進(jìn)展有一定作用，可以改變腫瘤患者的內(nèi)環(huán)境，降低由miR-155等因子介導(dǎo)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)，在細(xì)胞調(diào)節(jié)通路中抑制癌細(xì)胞生成和侵襲。也有學(xué)者認(rèn)為白花蛇舌草對(duì)細(xì)胞因子的作用可能更多，如通過(guò)IGF-1和VEGF等信號(hào)途徑抑制腫瘤的生長(zhǎng)。當(dāng)IGF-1下調(diào)后，其誘導(dǎo)的腫瘤細(xì)胞增殖減弱，細(xì)胞生長(zhǎng)周期延遲，細(xì)胞增生障礙，有效控制腫瘤侵襲和播散[10]。

綜上所述，中晚期肺腺患者在順鉑聯(lián)合長(zhǎng)春瑞濱治療方案的基礎(chǔ)上積極應(yīng)用白花蛇舌草注射液，臨床效果明顯，可降低化療的不良反應(yīng)，并能有效下調(diào)血清中miR-155的含量，臨床中可以積極應(yīng)用。

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（收稿日期：2019-10-23）

[作者簡(jiǎn)介] 唐洪成（1974-），男，滿族，遼寧錦州人，碩士，中級(jí)，研究方向：惡性腫瘤治則及方藥研究。