不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖對0～4周黃羽肉雞性能的影響

陳靜文 何雪萍 王潤蓮 梁翠萍 汪忠艷 劉國清

摘? 要：旨在研究不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖對0～4周齡黃羽肉雞生長、血脂含量、抗氧化能力及屠宰性能的影響。選取400只1日齡健康體重相近的黃羽肉雞母雞，隨機(jī)分為5組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)10只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.58%分子質(zhì)量為600、1117、2374、3600Da的甲殼低聚糖。試驗期為28d。結(jié)果表明：①各組間平均日增重、平均日采食量和料重比均無顯著差異（P>0.05）;②添加不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖使血清甘油三酯含量趨于降低（P=0.069）;與對照組相比，2374Da和3600Da甲殼低聚糖組顯著降低血清游離脂肪酸含量（P<0.05），其它血脂成分組間均有明顯變化（P>0.05）;③添加2374Da和3600Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖顯著提高血清SOD和GSH-PX活性（P<0.05），而添加600Da和1117Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖對肉雞抗氧化能力未顯效應(yīng);④屠宰率、全凈膛率、半凈膛率、胸肌率和腿肌率等各項屠宰性能組間差異不顯著（P>0.05）。綜上所述，0～4周齡黃羽肉雞日糧中添加分子質(zhì)量為600～3600Da的甲殼低聚糖對其生長和屠宰性能無顯著影響，但對肉雞血脂含量和抗氧化功能有明顯的影響，添加2374Da和3600Da甲殼低聚糖可顯著降低肉雞血脂水平，改善了肉雞的抗氧化能力，而添加600Da和1117Da的甲殼低聚糖對肉雞血脂含量和抗氧化能力未顯效應(yīng)。

中圖分類號：S831.5???? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B???? 文章編號：1673-1085（2020）3-0009-06

關(guān)鍵詞：甲殼低聚糖;黃羽肉雞;生長性能;屠宰性能;血脂;抗氧化能力

現(xiàn)代肉雞產(chǎn)業(yè)長期偏重生產(chǎn)性能的選育，造成肉雞脂肪過度沉積、飼料消耗增加、料重比增加、胴體品質(zhì)下降等問題，很多學(xué)者試圖通過營養(yǎng)調(diào)控手段（氨基酸、微量元素、添加劑等）減少肉雞脂肪沉積以提高胴體品質(zhì)[1-4]。甲殼低聚糖是由甲殼素脫乙酰基后得到的天然、無毒、生物可降解的堿性多糖，具有降脂、抗菌抑菌和免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)功效[5]，很多人試圖利用甲殼低聚糖減少肉雞脂肪沉積以提高胴體品質(zhì)，但隨著甲殼低聚糖加工技術(shù)的進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)其生物學(xué)活性與其脫乙酰度和分子質(zhì)量大小等理化特性密切相關(guān)[5-6]。有報道指出，脫乙酰度越高的甲殼低聚糖其體外結(jié)合脂肪能力越強(qiáng)[7];對肉雞的降脂效果越明顯[8]。但對不同分子質(zhì)量大小甲殼低聚糖的降脂效應(yīng)結(jié)果差異很大。LeHoux & Grondin[9]在大鼠日糧中添加5%分子質(zhì)量為70000、750000Da甲殼低聚糖，結(jié)果表明70000Da的降膽固醇效果優(yōu)于750000kDa;Zhang等[10]在大鼠上做了研究，發(fā)現(xiàn)39800Da的甲殼低聚糖降脂活性優(yōu)于712600Da;李兆杰[11]在小鼠日糧中添加200mg/kg分子質(zhì)量為24500、8450、1500、600Da的甲殼低聚糖，結(jié)果表明低分子質(zhì)量甲殼低聚糖顯著降低肝臟中甘油三酯和總膽固醇含量，且隨著分子質(zhì)量的降低其降血脂的作用有加強(qiáng)的趨勢。王紅衛(wèi)[12]在蛋雞日糧中添加200mg/kg分子質(zhì)量為8000、3000、1000Da甲殼低聚糖，結(jié)果表明8000、3000Da的甲殼低聚糖均能顯著降低血清中甘油三酯的含量，而1000Da沒有表現(xiàn)出明顯的降脂效果。動物的脂質(zhì)代謝與其抗氧化狀態(tài)密切相關(guān)。樊冰心[13]提出低分子質(zhì)量（相對分子質(zhì)量<5000Da）甲殼低聚糖可以提高抗氧化能力，從而抑制脂質(zhì)過氧化，降低脂肪和膽固醇含量。本實驗室研究表明Li等[14]，不同分子質(zhì)量（50000、5000、2000Da）甲殼低聚糖對麒麟雞的生長性能無影響，但能提高肉雞的抗氧化活性，相對于50000Da分子的甲殼低聚糖，5000Da以下的甲殼低聚糖降脂效果更為明顯，后者不僅可以降低脂肪的消化吸收，還可以被吸收進(jìn)入體組織對脂質(zhì)生化代謝產(chǎn)生影響，推測5000Da以下的甲殼低聚糖可能因此更易于影響肉雞的脂質(zhì)代謝和胴體性能，且其適宜分子質(zhì)量的大小尚不明確。本研究擬在前人研究基礎(chǔ)上進(jìn)一步探討600～3600Da甲殼低聚糖對黃羽肉雞生長、血脂含量、抗氧化能力及屠宰性能的影響。

1? 材料和方法

1.1? 試驗材料? 甲殼低聚糖平均分子質(zhì)量分別為600、1117、2374、3600Da，脫乙酰度≥85%，均為粉末狀，粒度≥0.100mm，水分≤10%，不溶物≤1%，分別由大連中科格萊克生物科技有限公司、惠州長龍生物技術(shù)有限公司、浙江澳興生物科技有限公司、青島博智匯力生物科技有限公司提供。1日齡黃羽肉雞品種（K902）由高州市萬農(nóng)農(nóng)業(yè)有限公司提供。

1.2? 試驗設(shè)計與動物分組? 試驗采用單因子完全隨機(jī)設(shè)計，選取400只1日齡健康、體重相近的黃羽肉雞母雞，隨機(jī)分為5組，每組8個重復(fù)，每個重復(fù)10只。其中，對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗組在基礎(chǔ)日糧上添加分子質(zhì)量分別為600、1117、2374、3600Da甲殼低聚糖，添加水平為0.58%，試驗期28d?；A(chǔ)日糧的組成及營養(yǎng)水平參照我國黃羽肉雞的營養(yǎng)水平[15]配制0～4周齡玉米-豆粕型日糧?；A(chǔ)日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.3? 飼養(yǎng)管理? 試驗肉雞飼養(yǎng)于3層立式金屬雞籠，飼養(yǎng)前一周對試驗用具（雞籠、料槽、水槽等）、雞舍以及周圍環(huán)境進(jìn)行全面清洗和甲醛熏蒸消毒，雛雞入舍后飲水1.5h后開食。雞舍內(nèi)采用紅外燈保溫。雞自由采食和飲水，每天對雞舍進(jìn)行清糞，保持雞舍衛(wèi)生，舍內(nèi)的溫度、濕度、光照等按要求進(jìn)行嚴(yán)格控制。定期按照制定的免疫程序進(jìn)行免疫。每天觀察并詳細(xì)記錄雞的行為及飼料消耗、死亡數(shù)等情況。

1.4? 樣品采集與測定

1.4.1? 生長性能測定? 記錄初始重，試驗期以重復(fù)為單位在4周末對雞進(jìn)行空腹稱重（禁食12h，不禁水），觀察采食情況，于每周末對料槽余料稱重，并計算平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）、料重比（F/G）。

1.4.2? 血脂和抗氧化能力測定? 4周末稱量體重后，從每個重復(fù)抽取體重接近平均體重的1只雞，翅靜脈采血，室溫靜置至有少量血清析出后，3000 r/min離心10min，分離出血清，于-20℃冰箱保存。血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）用酶法測定;游離脂肪酸（NFFA）用銅試劑比色法測定;高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）用選擇性沉淀法測定。血清抗氧化指標(biāo)包括超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化酶（GSH-PX）活性、過氧化氫酶（CAT）活性及丙二醛（MDA）的含量采用酶標(biāo)法測定。

1.4.3? 屠宰性能測定? 試雞采血后進(jìn)行屠宰，測定屠宰性能指標(biāo)。屠宰率、半凈膛率及全凈膛率分別為供試雞屠體重、半凈膛重、全凈膛重占宰前體重的百分比;腹脂率、胸肌率、腿肌率分別為供試雞腹脂重、胸肌重、腿肌重占全凈膛重的百分比。

1.5? 數(shù)據(jù)處理? 數(shù)據(jù)分析利用 SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件，采用 One-way ANOVA 進(jìn)行單因素方差分析，并用 Duncan 法進(jìn)行多重比較，P<0.05表示差異性顯著，試驗結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差的方式表示。

2? 結(jié)果與分析

2.1? 不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖對0～4周齡黃羽肉雞生長性能的影響? 結(jié)果見表2。由表2可以看出，甲殼低聚糖組與對照組相比，平均日增重均有所增加，分別增加0.65%、5.19%、5.54%和2.00%;平均日采食量分別提高2.08%、1.29%、1.69%和0.79%。此外，甲殼低聚糖組料重比與對照組相比，除600Da分子甲殼低聚糖組有所提高外，其它甲殼低聚糖組均有所降低，分別降低4.72%、4.72%、1.89%，但各組間平均日增重、平均日采食量和料重比均無顯著差異（P>0.05）。

2.2? 不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖對0～4周齡黃羽肉雞血脂含量的影響? 結(jié)果見表3。由表3可知，與對照組相比，甲殼低聚糖組甘油三酯含量均有降低的趨勢（P=0.069），分別降低25.32%、27.85%、2.53%和15.19%;總膽固醇含量各組之間差異不顯著（P>0.05）。血清游離脂肪酸含量組間差異顯著（P<0.05），與對照組相比，2374Da和3600Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組顯著下降（P<0.05），但600Da和1117Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組未有變化（P>0.05）;各添加組之間，2374Da和3600Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組差異不顯著（P>0.05），但2374Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組顯著低于600Da和1117Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組（P<0.05）;低密度脂蛋白膽固醇和高密度脂蛋白膽固醇含量組間均差異不顯著（P>0.05）。

2.3? 不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖對0～4周齡黃羽肉雞抗氧化能力的影響? 結(jié)果見表4。由表4可知，血清CAT活性與MDA含量組間差異不顯著（P>0.05）。血清SOD活性和GSH-PX活性組間差異顯著（P<0.01），與對照組相比，血清SOD和GSH-PX活性2374Da和3600Da甲殼低聚糖組顯著提高（P<0.05），而600Da和1117Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組未顯變化（P>0.05）。各添加組之間，血清SOD活性差異不顯著（P>0.05），而血清GSH-PX活性3600Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組顯著高于600Da和1117Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組（P<0.05）。

3? 討論

本試驗結(jié)果表明，在黃羽肉雞日糧中添加不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖（<5000Da）對其平均日增重、平均日采食量、料重比無顯著差異，該結(jié)果與Li等[14]的研究一致。Li等[14]進(jìn)行肉雞研究，發(fā)現(xiàn)不同分子質(zhì)量（2000、5000、50000Da）的甲殼低聚糖對動物生長性能沒有影響。但與Yao等[16]和Zhang等[10，17]在大鼠上的研究結(jié)果有出入。Yao等[16]在大鼠飼糧中添加5%分子量為14000、1000000Da的甲殼低聚糖，能顯著降低體增重，但其采食量沒有明顯影響;Zhang等[17]也報道了飼糧中添加3%分子量分別為315000、51000Da的甲殼低聚糖可以顯著降低大鼠體增重與飼料轉(zhuǎn)化率。后者試驗中選用甲殼低聚糖分子質(zhì)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于本試驗，因此推測甲殼低聚糖對動物生長性能的影響與其分子質(zhì)量大小密切相關(guān)，小分子質(zhì)量甲殼低聚糖對生長性能沒有明顯的影響。

大量研究表明甲殼低聚糖的降脂效果與分子質(zhì)量大小有關(guān)，多數(shù)研究趨向于小分子質(zhì)量的甲殼低聚糖活性比大分子更強(qiáng)。LeHoux & Grondin[9]和李兆杰[11]在鼠上做了相關(guān)研究，發(fā)現(xiàn)隨著分子質(zhì)量的降低，降脂作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢;王紅衛(wèi)[12]在蛋雞上得到了相似的結(jié)論，但提出1000Da甲殼低聚糖沒有表現(xiàn)出明顯的降脂效果;Li等[14]得出，相對于50000Da分子的甲殼低聚糖，5000Da以下的甲殼低聚糖降脂效果更為明顯。本試驗日糧中添加600～3600Da甲殼低聚糖，發(fā)現(xiàn)甘油三酯含量趨于降低，游離脂肪酸含量在添加2374Da和3600Da分子質(zhì)量甲殼低聚糖組顯著下降。但試驗表明，添加600、1117Da的甲殼低聚糖組各項血脂成分和對照組無異。

血脂水平的高低與脂質(zhì)過氧化程度相對應(yīng)，肉雞由于其營養(yǎng)及生理特點，體內(nèi)脂質(zhì)含量相對較高，故容易發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，產(chǎn)生的過氧化產(chǎn)物對機(jī)體有一定的傷害[18]。SOD、GSH-PX、CAT、MDA是衡量機(jī)體抗氧化性能的重要指標(biāo)，SOD、GSH-PX主要抑制自由基的生成與清除體內(nèi)的自由基，防止自由基對生物膜和細(xì)胞質(zhì)造成損傷，其活性高低直接反應(yīng)了機(jī)體的抗氧化能力，CAT與SOD存在協(xié)同作用;MDA是脂質(zhì)過氧化作用的分解產(chǎn)物，它通過生物膜中多不飽和脂肪酸的過氧化作用引起細(xì)胞損傷，所以MDA含量能反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化程度[19]。本試驗結(jié)果表明，2374Da和3600Da分子甲殼低聚糖組SOD活性和GSH-PX活性顯著提高，由此說明上述分子質(zhì)量的甲殼低殼聚糖能通過提高機(jī)體內(nèi)的抗氧化酶活性來降低機(jī)體的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，這與Li等[14]研究結(jié)果一致。Li等[14]在麒麟雞日糧中添加0.75%分子質(zhì)量為2000、5000、50000Da的甲殼低聚糖，結(jié)果表明均顯著提高SOD活性。盧美鸞等[20]報道添加不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖（Mr>100000Da，Mr<5000Da;Mr為相對分子量）不影響肉雞血清中MDA含量，本試驗MDA含量結(jié)果與盧美鸞等[20]報道一致。

添加不同分子質(zhì)量甲殼低聚糖（<3600Da）對黃羽肉雞的屠體率、半凈膛率、全凈膛率、胸肌率和腿肌率無顯著性影響，說明分子質(zhì)量較小的甲殼低聚糖對黃羽肉雞胴體各個部分的生長和產(chǎn)肉性能無影響，該結(jié)果也和黎秋萍等[21]的相近。

4? 結(jié)論

4.1? 在0～4周齡黃羽肉雞日糧中添加分子質(zhì)量為600～3600Da的甲殼低聚糖對其生長和屠宰性能無顯著影響。

4.2? 高于2374Da分子殼聚糖可顯著降低黃羽肉雞血清游離脂肪酸含量，使血脂水平下降;并使血清SOD活性和GSH-PX活性顯著提高，改善了肉雞的抗氧化能力;低于1117Da的甲殼低聚糖對肉雞血脂含量和抗氧化能力未顯效應(yīng)。

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Effects of different molecular weight chitosan oligosaccharides on growth， lipid content ，antioxidant activity and slaughter performance of Chinese Color-feathered chickens at the age of 0 to 4 weeks

CHEN Jingwen ?HE Xueping WANG Runlian ?LIANG Cuiping

WANG Zhongyan ?LIU Guoqing

（1.Shenzhen Institute of Guangdong Ocean University， Shenzhen518108，China;

2.Department of Animal Science，Guangdong Ocean University，Zhanjiang524088，China;

3.Guangzhou Applon Technology Co， Ltd.， Guangzhou510310， China）

Abstract：The purpose of this study was to investigate the effects of different molecular weight chitosan oligosaccharides on the growth， lipid content， antioxidant activity and slaughter performance of Chinese Color-feathered chickens at the age of 0 to 4 weeks.Four hundred 1-day-old healthy female Chinese Color-feathered chickens with similar body weight were randomly divided into 5 groups with 8 replicates of 10 birds each.The control group was fed with corn-soybean meal basal diet，and the experimental groups were fed basal diet supplemented 0.58% chitosan oligosaccharides with molecular weight of 600，1117，2374 and 3600 Da，respectively.The experiment lasted for 28 days. The results show that：1）there was no significantly difference in average daily gain， average daily feed intake and the feed conversion ratio among the groups （P>0.05）.2）Supplementation of different molecular weights of chitosan oligosaccharides trend to decrease the serum triglycerides （P =0.069）. Compred that of control group， the serum free fatty acid content of groups supplied chitosan oligosaccharides of molecular weights of 2374Da and 3600Da decreased significantly （P<0.05）. The other components of blood lipids did not differ between treatments （P>0.05）.3）Addition of 2374 and 3600 Da molecular weight chitosan oligosaccharides significantly increased serum SOD and GSH-PX activity （P<0.05），while addition of 600Da and 1117Da molecular weight chitosan oligosaccharides did not change the antioxidant activities in broilers.4）The slaughtering rate， full bore rate， half bore rate， breast muscle rate and leg muscle rate did not differ between groups （P>0.05）.In summary， the additions of chitosan oligosaccharides with molecular weights of 600～3600 Da had no significant influence on growth and slaughter performance，but the lipid content and antioxidant activity of broilers were significantly affected.Supplementation of 2374Da and 3600Da chitosan oligosaccharides significantly reduced blood lipids and improved antioxidant status in broilers，whereas supplementing 600Da and 1117Da? chitosan oligosaccharides had no significant effect on blood lipid content and antioxidant activity in broilers.

Key words： chitosan oligosaccharide; Chinese Color-feathered chickenss; growth performance; blood lipid; antioxidant activity; slaughter performance□

基金項目：深圳市科技計劃項目（JCYJ20170818111931279）;廣東海洋大學(xué)動物營養(yǎng)與飼料課程群教學(xué)團(tuán)隊項目。

作者簡介：陳靜文（1993-），女，碩士研究生，從事動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)的研究工作。E-mail：1395580704@qq.com。

通訊作者：王潤蓮（1965-），教授，碩士生導(dǎo)師，主要從事動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)的研究工作。E-mail：wangrunlian2005@163.com。